專利名稱：低至中壓液相色譜在放射性示蹤劑純化中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備放射性示蹤劑的方法。特別地，本發(fā)明涉及用填充有固定相的容器來分離放射性示蹤劑。
背景技術(shù)：
在放射性藥物的制備中，為了臨床上關(guān)注的化合物的成功(放射性)合成和后續(xù)安全給藥，需要建立除去副產(chǎn)物如過量前體的策略。這類反應(yīng)通常采用相對(duì)于所用的放射性標(biāo)記試劑的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)過量的非放射性有機(jī)前體。然后，在放射性標(biāo)記的化合物施用于患者以進(jìn)行診斷和/或治療應(yīng)用之前，必須從反應(yīng)混合物除去過量的前體。為了臨床上關(guān)注的化合物的成功(放射性)合成和后續(xù)的安全給藥，需要建立除去副產(chǎn)物如過量前體的策略。這類反應(yīng)通常采用相對(duì)于所用的放射性標(biāo)記試劑的量遠(yuǎn)遠(yuǎn)過量的非放射性有機(jī)前體。然后，在放射性標(biāo)記的化合物施用于患者以進(jìn)行診斷和/或治療應(yīng)用之前，必須從反應(yīng)混合物除去過量的前體。放射性標(biāo)記的化合物的純化通常通過固相萃取(SPE)或高壓液相色譜(HPLC)實(shí)現(xiàn)?？紤]到大多數(shù)臨床使用的放射性同位素的半衰期，期望在給予患者之前盡快完成放射性合成和純化。例如，18F的半衰期為110分鐘，因而18F標(biāo)記的靶向底物在臨床使用的一小時(shí)內(nèi)合成和純化。考慮到這些時(shí)間限制，HPLC純化通常耗時(shí)并繁瑣。此外，這種技術(shù)需要專門的儀器，并不能作為用于盒式模塊的一次性合成試劑盒的一部分。這需要在后續(xù)合成之前進(jìn)行HPCL純化和平衡。然而，對(duì)于每次制備運(yùn)行，無法保證相同的HPLC條件，尤其是HPLC柱的條件。因此，無法保證過程的一致性。對(duì)于技術(shù)需求和時(shí)間消耗，SPE純化要求則低得多，而且SPE柱筒(cartridge)也可作為用于盒式模塊的一次性合成試劑盒的一部分。然而，用于純化放射性標(biāo)記的化合物的柱筒通常包含20mg-2g的固相材料。就這個(gè)量而言，全部副產(chǎn)物的完全除去通常是繁瑣的，而且在很多情況下甚至是不可實(shí)現(xiàn)的。由于以上原因，在本領(lǐng)域中顯然存在純化策略的需求，其提供可重現(xiàn)地、快速且有效地從最終放射性標(biāo)記化合物分離不期望的物質(zhì)。本發(fā)明通過應(yīng)用一次性純化容器代替多通道(multi-rim)HPLC純化步驟來解決上述技術(shù)問題。發(fā)明概述本發(fā)明一般地涉及將正相或反相快速色譜用于從任何種類副產(chǎn)物純化放射性標(biāo)記的化合物。所述快速色譜通過填充有固相材料的任何種類的一次性容器來進(jìn)行。這些容器可通過管道與任何種類的沖刷系統(tǒng)(flush system)連接，因此可作為盒式模塊上或?qū)儆诜呛惺侥K的一次性放射性藥物合成試劑盒的一部分。發(fā)明詳述第一方面，本發(fā)明涉及制備放射性藥物的方法，所述方法包括以下步驟
放射性標(biāo)記前體分子；和·使用容器從過量的前體和副產(chǎn)物純化放射性標(biāo)記的示蹤劑。任選地，進(jìn)一步的化學(xué)轉(zhuǎn)化可為所述方法的一部分。放射性示蹤劑的純化包括液相色譜步驟，其中所述液相色譜為低至中(low-to medium-)壓液相色譜。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述低至中壓液相色譜的壓力為1_20巴，更優(yōu)選1-10巴，甚至更優(yōu)選1-5巴。放射性標(biāo)記的化合物包含至少一種在以下組中選擇的放射性同位素99mTc、mh、 吁嚴(yán)打、,嚴(yán)^巧嚴(yán)^竹、 、^、72Α8、76ΒΓ、89δΓ、15^、186κΘ、18 ^、212Μ、213Μ^ΖΓ、86γ、 90Y、67CU、64CU、192Ir、165Dy、177LU、mmSn、213Bi、212Bi、211At、225AC、223Ra、16i3Yb、68(;a 和 67Ga0在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述放射性標(biāo)記的示蹤劑具有用于正電子發(fā)射斷層掃描的放射性同位素。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述放射性同位素選自包括18F、68fe的組。所述放射性示蹤劑可用于CNS、心血管或腫瘤疾病的成像。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述放射性標(biāo)記的示蹤劑用于CNS病癥成像，優(yōu)選用于檢測(cè)Αβ斑。這樣的示蹤劑包括芳基(或雜芳基)乙烯基苯胺衍生物，例如但不限于 4-[(E)-2-(4-{2-[242-[F-W]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺、4-[(E)-2-(6-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶_3_基)乙烯基]-N-甲基苯胺。所述容器為柱筒、柱或任何種類的圓柱體。所述容器由任何種類的金屬、合金、塑料、玻璃、碳或上述物質(zhì)的混合物制成。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，用于容器的材料選自以下組任何種類的塑料、玻璃或上述物質(zhì)的混合物，更優(yōu)選地選自USP級(jí)Vl塑料，甚至更優(yōu)選地選自藥用級(jí)聚乙烯或聚丙烯。所述容器填充有固定相。所述容器可包含另外的部分，例如但不限于多孔熔塊(frit)、連接器和適配器。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述固定相選自包括硅膠、改性硅膠、氧化鋁、樹脂、聚合物、共聚物或者上述物質(zhì)的混合物或?qū)拥慕M。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述固定相選自包括二氧化硅、氧化鋁A、氧化鋁B、氧化鋁N、硅酸鎂、氧化鎂、氧化鋯、C30、C18、tC18、C8、C4、C2、tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基 (CN)、二醇、羥基磷灰石、纖維素、石墨碳和聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物或其共聚物的組。將IOyg-IOOg的所述固定相填充于所述容器中。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，將 100mg-50g的所述固定相填充于所述容器中。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，將2g-20g的所述固定相填充于所述容器中。甚至更優(yōu)選地，將3. 5g-10g的所述固定相填充于所述容器中。相同或不同尺寸的、填充有相同或不同固定相的一個(gè)或多個(gè)容器可用于所述方法。填充有固定相的容器可與管道、注射器、針、閥或其他容器相連接。用于純化過程的液相選自以下組有機(jī)溶劑，水，鹽、酸、堿或添加劑的水溶液及上述物質(zhì)的混合物。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述液相選自包括以下物質(zhì)的組戊烷、己烷、 庚烷、辛烷、環(huán)戊烷、環(huán)己烷、異辛烷、甲苯、對(duì)二甲苯、氯苯、苯、二乙醚、二異丙醚、叔丁基甲醚、硝基甲烷、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、三乙胺、吡啶、氨、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、
4乙酸甲酯、乙腈、異丙醇、乙醇、甲醇、乙酸、三氟乙酸、水、鹽溶液、緩沖液及上述物質(zhì)的混合物。所述液相采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式通過容器。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述液相經(jīng)由泵、注射器、注射泵、氣流、真空或它們的組合通過容器。不同種類的檢測(cè)器可與本發(fā)明的方法組合。優(yōu)選的檢測(cè)器為UV檢測(cè)器、放射性檢測(cè)器、光散射檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、耐火指數(shù)檢測(cè)器。第二方面，本發(fā)明涉及自動(dòng)化制備放射性藥物的方法，所述方法包括以下步驟·放射性標(biāo)記前體分子；和·使用容器從過量的前體和副產(chǎn)物純化放射性標(biāo)記的示蹤劑。任選地，進(jìn)一步的化學(xué)轉(zhuǎn)化可為所述方法的一部分。放射性示蹤劑的純化包括液相色譜步驟，其中所述液相色譜為低至中壓液相色譜。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述液相色譜的壓力為1-20巴，更優(yōu)選為1-10巴。放射性標(biāo)記的化合物包含至少一種在以下組中選擇的放射性同位素99mTc、mh、 吁嚴(yán)打、,嚴(yán)^巧嚴(yán)^竹、 、^、72Α8、76ΒΓ、89δΓ、15^、186κΘ、18 ^、212Μ、213Μ^ΖΓ、86γ、 90Y、67CU、64CU、192Ir、165Dy、177LU、mmSn、213Bi、212Bi、211At、225AC、223Ra、16i3Yb、68(;a 和 67Ga0在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述放射性標(biāo)記的示蹤劑具有用于正電子發(fā)射斷層掃描的放射性同位素。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述放射性同位素選自包括18F、68fei的組。所述容器為柱筒、柱或任何種類的圓柱體。所述容器由任何種類的金屬、合金、塑料、玻璃、碳或上述物質(zhì)的混合物制成。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，用于容器的材料選自以下組任何種類的塑料、玻璃或上述物質(zhì)的混合物，更優(yōu)選地選自USP級(jí)Vl塑料，甚至更優(yōu)選地選自藥用級(jí)聚乙烯或聚丙烯。所述容器填充有固定相。所述容器可包含另外的部分，例如但不限于多孔熔塊、連接器和適配器。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述固定相選自包括硅膠、改性硅膠、氧化鋁、樹脂、聚合物、共聚物或者上述物質(zhì)的混合物或?qū)拥慕M。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述固定相選自包括二氧化硅、氧化鋁A、氧化鋁B、氧化鋁N、硅酸鎂、氧化鎂、氧化鋯、C30、C18、tC18、C8、C4、C2、tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基 (CN)、二醇、羥基磷灰石、纖維素、石墨碳和聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物或其共聚物的組。將IOyg-IOOg的所述固定相填充于所述容器中。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，將 100mg-50g的所述固定相填充于所述容器中。在更優(yōu)選的實(shí)施方案中，將2g-20g的所述固定相填充于所述容器中。相同或不同尺寸的、填充有相同或不同固定相的一個(gè)或多個(gè)容器可用于所述方法。填充有固定相的容器可與管道、注射器、針、閥或其他容器相連接。用于純化過程的液相選自以下組有機(jī)溶劑，水，鹽、酸、堿或添加劑的水溶液及上述物質(zhì)的混合物。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述液相選自包括以下物質(zhì)的組戊烷、己烷、 庚烷、辛烷、環(huán)戊烷、環(huán)己烷、異辛烷、甲苯、對(duì)二甲苯、氯苯、苯、二乙醚、二異丙醚、叔丁基甲醚、硝基甲烷、氯仿、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、三乙胺、吡啶、氨、丙酮、四氫呋喃、乙酸乙酯、乙酸甲酯、乙腈、異丙醇、乙醇、甲醇、乙酸、三氟乙酸、水、鹽溶液、緩沖液及上述物質(zhì)的混合物。所述液相采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式通過容器。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，所述液相經(jīng)由泵、注射器、注射泵、氣流、真空或它們的組合通過容器。不同種類的檢測(cè)器可與本發(fā)明的方法組合。優(yōu)選的檢測(cè)器為UV檢測(cè)器、放射性檢測(cè)器、光散射檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、耐火指數(shù)檢測(cè)器。所述方法為用于制備放射性標(biāo)記的示蹤劑的自動(dòng)化方法。在一實(shí)施方案中，所述純化過程是與放射性示蹤劑的自動(dòng)化合成組合的獨(dú)立自動(dòng)化程序。在另一實(shí)施方案中，所述純化過程被納入放射性示蹤劑的自動(dòng)化合成。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，合成器用于制備放射性示蹤劑，并且所述純化過程在合成器中進(jìn)行。更優(yōu)選地，制備和純化過程在無任何手動(dòng)操作條件下進(jìn)行。在一優(yōu)選實(shí)施方案中，通過“中壓色譜”合成和純化放射性示蹤劑在本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的用于制備放射性示蹤劑的“盒式模塊”上進(jìn)行，例如但不限于GE tracerlab MX (Coincidence FDG)、GE Fastlab、IBA Synthera0 優(yōu)選地，用于“中壓色譜，，的容器為一次性盒(或試劑盒)的一部分。第三方面，本發(fā)明涉及用于制備放射性藥物的方法的一次性試劑盒，所述方法包括以下步驟 放射性標(biāo)記前體分子；和·使用容器從過量的前體和副產(chǎn)物純化放射性標(biāo)記的示蹤劑。任選地，進(jìn)一步的化學(xué)轉(zhuǎn)化可為所述方法的一部分。所述試劑盒包括用于合成放射性示蹤劑的材料和用于純化的容器，其中所述容器如上文定義。本發(fā)明進(jìn)一步涉及以下內(nèi)容1.制備放射性示蹤劑的方法，所述方法包括使用低至中壓液相色譜的純化步驟， 其中使用一個(gè)或多于一個(gè)填充有固定相的容器。2.根據(jù)第1條的方法，其中所述放射性示蹤劑為正電子發(fā)射放射性示蹤劑。3.根據(jù)第1-2條的方法，其中使用選自硅膠、改性硅膠、氧化鋁、樹脂、聚合物、凝膠或者上述物質(zhì)的混合物或?qū)拥墓潭ㄏ唷?.根據(jù)第1-3條的方法，其中使用填充有固定相的容器，所述固定相選自包括二氧化硅、氧化鋁A、氧化鋁B、氧化鋁N、硅酸鎂、氧化鎂、氧化鋯、C30、C18、tC18、C8、C4、C2、 tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基(CN)、二醇、羥基磷灰石、纖維素、石墨碳、聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物、聚苯乙烯/二乙烯基苯共聚物或上述物質(zhì)的混合物的組。5.根據(jù)第1-4條的方法，其中所述容器填充有IOyg-IOOg的所述固定相。6.根據(jù)第1-5條的方法，其中所述容器填充有2g_20g的所述固定相。7.根據(jù)第1-6條的方法，其中用于所述液相色譜的溶劑選自有機(jī)溶劑，水，鹽、酸或堿或添加劑的水溶液及上述物質(zhì)的混合物。8.根據(jù)第1-7條的方法，其中所述容器被納入放射性示蹤劑的自動(dòng)化合成。9.用于制備放射性示蹤劑的試劑盒，其具有用于中低壓液相色譜的容器。
10.根據(jù)第9條的試劑盒，其在放射性示蹤劑的制備中單次使用。


圖1 粗4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺的中壓色譜的色譜圖。圖2 粗產(chǎn)物混合物(a，b)和“中壓色譜”純化后的產(chǎn)物(c，d)的分析HPLC色譜圖 (Atlantis T3 ； 150*4. 6mm ；3ym ;Merck Waters ；40-90% MeCN，在 5mM KH2PO4 中，pH2. 2)。圖3 :tracerlab MX合成的設(shè)定(由Coincidence軟件拷貝圖片并調(diào)整)。圖4 粗4-[(E)-2-(6-{2-[242-[F_18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶_3_基) 乙烯基]-N-甲基苯胺的中壓色譜的色譜圖。圖5 粗產(chǎn)物混合物(a，b)和“中壓色譜”純化后的產(chǎn)物(c，d)的分析HPLC色譜圖(Chromolith SpeedRod ；Merck ；0-95% MeCN，在 IOmMNii2HPO4 中，pHL 4)。圖6 :Eckert&Ziegler modular lab 上的粗 4_[F_18]氟芐基)(三苯基)溴化鱗的中壓色譜的色譜圖，上為Y信號(hào)，下為UV信號(hào)。圖7 粗產(chǎn)物混合物(a，b)和“中壓色譜”純化后的產(chǎn)物(c，d)的分析HPLC色譜圖(Zorbax SB-C18 ；Agilent ；50% MeCN，在 0. IM 甲酸銨中)。圖8 用于4-[￠)-2-(4-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺合成的iTracerlab MX的設(shè)定(出自coincidence FDG軟件)圖9 :MX合成的粗產(chǎn)物通過“純化柱筒”之前的分析HPLC(樣品來自反應(yīng)器)；上為放射性；下為UV信號(hào)320nm圖10 :MX合成和基于柱筒的純化后的4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基) 乙氧基]乙氧基}苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺的分析HPLC ；上為放射性；下為UV信號(hào) 320nm
實(shí)施例實(shí)施例1 4-[ (E) -2-(4-{2_[2_(2_[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}_苯基)
乙烯基]-N-甲基苯胺的合成和純化
權(quán)利要求
1.制備放射性示蹤劑的方法，所述方法包括使用低至中壓液相色譜的純化步驟，其中使用一個(gè)或多于一個(gè)填充有固定相的一次性容器。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述放射性示蹤劑為正電子發(fā)射放射性示蹤劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2所述的方法，其中使用選自硅膠、改性硅膠、氧化鋁、樹脂、聚合物、凝膠或者上述物質(zhì)的混合物或?qū)拥墓潭ㄏ唷?br> 4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的方法，其中使用填充有固定相的容器，所述固定相選自包括二氧化硅、氧化鋁A、氧化鋁B、氧化鋁N、硅酸鎂、氧化鎂、氧化鋯、C30、C18、tC18、C8、C4、 C2、tC2、氨基丙基(NH2)、氰基丙基(CN)、二醇、羥基磷灰石、纖維素、石墨碳、聚苯乙烯/ 二乙烯基苯聚合物、聚苯乙烯/ 二乙烯基苯共聚物或上述物質(zhì)的混合物的組。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的方法，其中所述容器填充有IOyg-IOOg的所述固定相。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述的方法，其中所述容器填充有2g-20g的所述固定相。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6所述的方法，其中用于所述液相色譜的溶劑選自有機(jī)溶劑，水， 鹽、酸或堿或添加劑的水溶液及上述物質(zhì)的混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7所述的方法，其中所述容器被納入放射性示蹤劑的自動(dòng)化合成。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8所述的方法，其中所述放射性示蹤劑在盒式模塊上制備，其中所述低至中壓色譜為所述方法的一部分。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其中將所述容器裝配在所述盒上。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10所述的方法，其用于制備F-18標(biāo)記的芳基(或雜芳基)乙烯基苯胺衍生物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述F-18標(biāo)記的芳基(或雜芳基)乙烯基苯胺衍生物選自4-[(E)-244-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基) 乙烯基]-N-甲基苯胺、4-[(E)-2-(6-{2-[2-(2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}吡啶-3-基)乙烯基]-N-甲基苯胺。
13.制備4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺的方法，所述方法包括以下步驟 親核放射性氟化； 任選地，將保護(hù)基轉(zhuǎn)化； 將粗產(chǎn)物填裝至用于低至中壓色譜的容器； 用溶劑混合物洗滌所述容器，所述溶劑混合物適合于從所述容器洗脫副產(chǎn)物，其中所述溶劑以1-10巴流經(jīng)所述容器； 用溶劑混合物2從所述容器洗脫純化的4-[(E)-2-(4-{2-[242-[F-18]氟乙氧基) 乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺，所述溶劑混合物2適合于從所述容器洗脫4-[(E)-2-(4-12-[2-[F-18]氟乙氧基)乙氧基]乙氧基}-苯基)乙烯基]-N-甲基苯胺，其中所述溶劑以1-10巴流經(jīng)所述容器。
14.用于制備放射性示蹤劑的試劑盒，其具有用于中低壓液相色譜的容器。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的試劑盒，其在放射性示蹤劑的制備中單次使用。
全文摘要
本發(fā)明涉及制備放射性示蹤劑的方法。特別地，本發(fā)明涉及用填充有固定相的容器來分離放射性示蹤劑。
文檔編號(hào)C07B59/00GK102471177SQ201080031248
公開日2012年5月23日 申請(qǐng)日期2010年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2009年7月10日
發(fā)明者H·西本艾歇爾, K·格雷厄姆, M·貝恩特 申請(qǐng)人:拜耳醫(yī)藥股份有限公司