專利名稱：多肽及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的新型多肽及其在治療和預(yù)防炎癥和/或過度凝固中的用途。具體而言，本發(fā)明提供了用于醫(yī)學(xué)，例如用于治療或預(yù)防炎癥和/或過度凝固的多肽，所述多肽包含SEQ ID NO: I至11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由SEQ ID NO: I至11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成。發(fā)明背景 先天性免疫系統(tǒng)很大程度上基于抗微生物肽，提供針對侵入性微生物的第一線防御(Lehrer, R. I.和 T. Ganz, Curr Opin Hematol, 2002. 9(1) :p. 18-22; Harder, J.
,R. Glaser 和 J. M. Schroder, J Endotoxin Res, 2007. 13 (6) : p. 317-38; Zasloff, M. , Nature, 2002. 415(6870): p. 389-95;Tossi, A. , L. Sandri 和 A. Giangaspero, Biopolymers, 2000. 55(1) : p. 4-30; Yount, N. Y.等，Biopolymers, 2006)。在最近數(shù)年期間，變得越來越明顯的是，許多陽離子和兩親性抗微生物肽，諸如防御素和cathelicidin是多功能的，也介導(dǎo)免疫調(diào)控作用和血管發(fā)生(Zanetti，M.，J Leukoc Biol, 2004. 75(l):p. 39-48;Elsbach, P. , J Clin Invest, 2003. 111 (II):p. 1643-5;Ganz, T. , Defensins:antimicrobial peptides of innate immunity. Nat Rev Immunol, 2003. 3(9):p. 710-20),如此為先天性免疫系統(tǒng)的這些成員促成最近的且更寬的定義宿主防御肽(HDP)。最近已經(jīng)顯示了 HDP家族涵蓋各種具有抗微生物活性的生物活性肽，包括促炎性和趨化性細(xì)胞因子(Cole’A.M.等 J Immunol, 2001. 167(2) :p. 623-7)、神經(jīng)肽(Brogden, K.A. , Nat Rev Microbiol, 2005. 3 (3) :p. 238-50)、月太激素(Kowalska, K. , D. B. Carr 和A. ff. Lipkowski, Life Sci, 2002. 71(7) :p. 747-50;Mor, A. ,M. Amiche,and P. Nicolas, Biochemistry, 1994. 33 (21) :p. 6642-50) > 生長因子(Malmsten, M.等，Growth卩已(^(^8，2007.25(1): .60-70)、過敏毒素肽033 0(^(^111，￡.八.等，Natl Acad Sci U S A,2004. 101 (48): p. 16879-84 ;Pasupuleti,M.等，J Biol Chem, 2007. 282 (4) :p. 2520-8)、和激肽原衍生的肽(Frick, I. M.等,Embo J, 2006. 25 (23) : p. 5569-78; Nordahl, E.A.等，Domain 5 of high molecular weight kininogen is antibacterial. J Biol Chem,2005.280 (41): p. 34832-9;Rydengard, V. , E. Andersson Nordahl 和 A. Schmidtchen, Zincpotentiates the antibacterial effects of histidine-rich peptides againstEnterococcus faecalis. Febs J, 2006. 273 (11):p. 2399-406)。凝固級聯(lián)也代表響應(yīng)損傷和感染而激活的基礎(chǔ)系統(tǒng)(Davie，E. W.和J. D. Kulman, Semin Thromb Hemost, 2006.32 增刊 I: p. 3-15;Bode, W.，Semin ThrombHemost, 2006. 32增刊I:p. 16-31)。經(jīng)由一系列級聯(lián)樣蛋白酶激活步驟,形成凝血酶,導(dǎo)致血纖蛋白原降解和凝塊形成。凝固級聯(lián)受多種調(diào)節(jié)蛋白，諸如絲氨酸蛋白酶抑制劑(或“serpins”)、肝素輔因子II (HCII)、抗凝血酶III (ATIII)、和蛋白C抑制劑及組織因子蛋白酶抑制劑(TFPI)控制。此外，富含組氨酸的糖蛋白可以通過與血纖蛋白原及血纖蛋白溶酶原相互作用而調(diào)控凝固。
本發(fā)明尋求提供用于醫(yī)學(xué)，例如用于治療或預(yù)防炎癥和/或過度凝固的源自牽涉止血的分子的新型多肽藥劑。發(fā)明概述本發(fā)明的第一方面提供了用于治療或預(yù)防炎癥和/或過度凝固的多肽，所述多肽包含源自調(diào)控 血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)(與肝素輔因子II或凝血酶不同)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由該氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成，其中所述片段、變體、融合物或衍生物展現(xiàn)出抗炎和/或抗凝活性。本發(fā)明源自發(fā)明人意想不到的發(fā)現(xiàn)，即調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)在其C端和/或其它內(nèi)部區(qū)域內(nèi)包含展現(xiàn)出抗炎活性的“隱蔽肽”。認(rèn)為此類肽可以通過響應(yīng)傷口和其它生理學(xué)考驗(yàn)而切割親本肽酶全蛋白質(zhì)來“釋放”。如此，本發(fā)明的多肽構(gòu)成一種新穎的且先前未披露的HDP類別，其具有針對與炎癥有關(guān)的病癥和狀況的治療潛力?！罢{(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)”包括所有調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)，其或是正向或是負(fù)向調(diào)控血液凝固過程。此類調(diào)控活性可以通過本領(lǐng)域中公知的方法，例如使用活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)測試、凝血酶原時間(PT)測試、或凝血酶凝結(jié)時間(TCT)測試來測定。此外，可以實(shí)施前激肽釋放酶活化或因子X和其它凝固因子活性的具體測量。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，天然存在的蛋白質(zhì)可以直接或間接調(diào)控血液凝固。有利地，調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是人蛋白質(zhì)?！霸醋浴闭{(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的氨基酸序列意指氨基酸序列存在于天然存在的蛋白質(zhì)的氨基酸序列內(nèi)。例如，在一個實(shí)施方案中，氨基酸序列可以來自天然存在的蛋白質(zhì)中調(diào)控血液凝固的C端區(qū)域?！癈端區(qū)域”意指天然存在的蛋白質(zhì)的C端附近的100個氨基酸。在另一個實(shí)施方案中，氨基酸序列可以來自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的多至100個氨基酸的內(nèi)部區(qū)域。“抗炎活性”意指降低或預(yù)防與炎性事件有關(guān)的一種或多種生物學(xué)過程的能力?？梢允褂帽绢I(lǐng)域中公知的方法，例如通過測量LPS誘導(dǎo)的促炎性細(xì)胞因子自巨噬細(xì)胞的釋放(例如TNF a、IL-6、IF_ y )，或嗜中性粒細(xì)胞的釋放來測定多肽的此類抗炎活性(見下文實(shí)施例)。其它相關(guān)測定法包括脂磷壁酸質(zhì)、酵母聚糖、DNA、RNA、鞭毛蛋白或肽聚糖在上述系統(tǒng)中的效果及在轉(zhuǎn)錄水平測定調(diào)節(jié)(例如基因陣列、qPCR等)。此外，也可以使用樹突細(xì)胞活化或凝血細(xì)胞活化作為抗炎活性的量度?！翱鼓钚浴币庵秆娱L凝血酶原時間(PT)、凝血酶凝結(jié)時間(TCT)和/或活化部分促凝血酶原激酶時間(aPTT)的能力?；蛘?，可以通過與或不與肽和組織因子一起的大腸桿菌(E. coli)LPS刺激外周血單個核細(xì)胞(PBMNC)，并且可以測量在添加人血漿后接著的凝塊形成，或者全血的凝結(jié)時間。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，本發(fā)明涵蓋包含源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的氨基酸序列及保留抗炎活性的此類氨基酸序列的片段、變體、融合物和衍生物，或由該氨基酸序列及保留抗炎活性的此類氨基酸序列的片段、變體、融合物和衍生物組成的多肽。然而，優(yōu)選地，多肽不是天然存在的蛋白質(zhì)，例如全蛋白質(zhì)(盡管當(dāng)然應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，多肽可以構(gòu)成天然存在的蛋白質(zhì)的不完全部分或片段)。
在本發(fā)明的多肽的一個實(shí)施方案中，多肽包含肝素結(jié)合域?！案嗡亟Y(jié)合域”意指多肽內(nèi)能夠在生理學(xué)條件下結(jié)合肝素的氨基酸序列。此類序列經(jīng)常包含XBBXB和XBBBXXB (其中B=堿性殘基，且X=親水性或不帶電荷的殘基)，或堿性氨基酸的簇(XBX，XBBX，XBBBX)。以非堿性殘基間隔此類簇(BXB，BXXB)也可以存在。另外，堿性氨基酸間約20A的距離構(gòu)成肝素結(jié)合的前提。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)可以來自人或非人來源。例如，調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)可以源自(直接或間接)非人哺乳動物，諸如猿(例如，黑猩猩、倭黑猩猩(bonobo)、大猩猩、長臂猿和猩猩)、猴(例如，獼猴、狒狒和疣猴)、嚙齒類(例如小鼠、大鼠)或有蹄動物(例如，豬、馬和母牛)。在本發(fā)明多肽的優(yōu)選實(shí)施方案中，調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是人蛋白質(zhì)。如此，調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)可以選自下組絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpins)、組織因子途徑抑制劑(諸如TFPI-I和TFPI-2)和富含組氨酸的糖蛋白(HRG)。在一個實(shí)施方案中，調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是serpin。例如，serpin可以是抗凝血酶III (ATIII ;例如見Swiss Port登錄號P01008)。如此，所述多肽可以包含如下SEQ ID NO: I或2的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID NO: I或2的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“FFF21” FFFAKLNCRLYRKANKSSKLV [SEQ ID NO: I]“AKL22” AKLNCRLYRKANKSSKLVSANR [SEQ ID NO :2]所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID NO: I或2的抗炎活性和/或抗凝。在一個備選的實(shí)施方案中，serpin可以是蛋白C抑制劑(PCI ;例如見SwissPort登錄號P05154)。例如，所述多肽可以包含如下SEQ ID N0:3的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID NO: 3的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“SEK20” SEKTLRKWLKMFKKRQLELY [SEQ ID NO:3]所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID NO:3的抗炎和/或抗凝活性。在又一個實(shí)施方案中，所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是組織因子途徑抑制劑-I (TFPI-1 ;例如見 Swiss Port 登錄號 P10646)。例如，所述多肽可以包含如下SEQ ID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“GGL27”GGLIKTKRKRKKQRVKIAYEEIFVKNM[SEQ ID NO:4]“LIK17” LIKTKRKRKKQRVKIAY [SEQ ID NO:5]“TKR22” TKRKRKKQRVKIAYEEIFVKNM [SEQ ID NO:6]
所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID N0S:4至6中任一項(xiàng)的抗炎和/或抗凝活性。在又一個備選的實(shí)施方案中，所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是組織因子途徑抑制劑2(TFPI-2 ;例如見Swiss Port登錄號P48307)。例如，所述多肽可以包含如下SEQ ID N0:7或8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:7或8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“ALK25” ALKKKKKMPKLRFASRIRKIRKKQF [SEQ ID NO:7]“EDC34” EDCKRACAKALKKKKKMPKLRFASRIRKIRKKQF [SEQID NO:8]所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID N0:7或8的抗炎和/或抗凝活性。在又一個備選的實(shí)施方案中，所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是富含組氨酸的糖蛋白(HRG ;例如見Swiss Port登錄號P04196)。例如，所述多肽可以包含如下SEQ ID N0:9的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID N0:9的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成(X1X2X3X4X5)JSEQ ID NO:9],其中X1 和 X4 獨(dú)立代表 G，P，L, I，F(xiàn)，T，V，Y 或 W ;X2、X3和X5獨(dú)立代表H，R或K ;且“n” 是 2-6 的整數(shù)，所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID NO:9的抗炎和/或抗凝活性。如此，所述多肽可以包含如下SEQ ID NO: 10的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID NO: 10的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成(GHHPH)n[SEQ id NO: 10]，其中 “n” 是 2-6 的整數(shù)，所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID NO: 10的抗炎和/或抗凝活性。例如，所述多肽可以包含如下SEQ ID NO: 11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID NO: 11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“GHH25” GHHPHGHHPHGHHPHGHHPHGHHPH [SEQ IDNO:11]所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQ ID NO: 11的抗炎和/或抗凝活性。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，如本文中所使用的，術(shù)語“氨基酸”包括標(biāo)準(zhǔn)的20種遺傳編碼的氨基酸及其相應(yīng)的“D”形式的立體異構(gòu)體(與天然的“L”形式相比)、Q-氨基酸、其它天然存在的氨基酸、非常規(guī)的氨基酸(例如，a，a-雙取代氨基酸、N-烴基氨基酸等)和經(jīng)化學(xué)衍生化的氨基酸(見下文)。
在明確列舉氨基酸，諸如“丙氨酸”或“Ala”或“A”時，術(shù)語指L-丙氨酸和D-丙氨酸兩者，除非另有明確規(guī)定。其它非常規(guī)的氨基酸也可以是適合于本發(fā)明多肽的組分，只要多肽保留期望的功能性特性。對于顯示的肽，每個編碼的氨基酸殘基(在適當(dāng)?shù)那闆r中)由對應(yīng)于常規(guī)氨基酸俗名的單字母名稱代表。在一個實(shí)施方案中，本發(fā)明的多肽包含L-氨基酸或由L-氨基酸組成。在多肽包含依照參照序列的氨基酸序列(例如SEQ ID NO: I至11)情況中，它可以包含超出參照序列的在其N和/或C端的額外氨基酸，例如多肽可以包含在其N端的額外氨基酸。同樣地，在多肽包含依照參照序列的氨基酸序列的片段、變體或衍生物的情況中，它可以包含在其N和/或C端的額外氨基酸。在又一個實(shí)施方案中，多肽包含依照參照序列的氨基酸序列( 例如SEQID NO: I至11)的片段或由該片段組成。如此，所述多肽可以包含參照序列的至少5個連續(xù)氨基酸或由參照序列的至少5個連續(xù)氨基酸組成，例如，例如SEQ ID NO: I至11的至少6，7，8，9，10，I1，12，13，14，15，16，17，18，19，20 或 21 個連續(xù)氨基酸。在一個實(shí)施方案中，多肽片段以選自下組的氨基酸殘基開始SEQ IDN0:1的氨基酸殘基I, 2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15和16。或者/另外，所述多肽片段可以以選自下組的氨基酸殘基終止SEQ ID NO: I的氨基酸殘基5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，本發(fā)明的多肽可以包含依照參照序列的氨基酸序列(例如SEQ ID NO: I)的變體或所述變體的片段或由所述變體或所述變體的片段組成。此類變體可以是非天然存在的。多肽的“變體”包括插入、缺失和取代，其或是保守的或是非保守的。例如，保守取代指將相同通用類別(例如酸性氨基酸、堿性氨基酸、非極性氨基酸、極性氨基酸或芳香族氨基酸)內(nèi)的氨基酸用相同類別內(nèi)的另一種氨基酸的取代。如此，保守氨基酸取代和非保守氨基酸取代的意義是本領(lǐng)域中公知的。特別地，包括展現(xiàn)出抗炎活性的多肽的變體。在又一個實(shí)施方案中，變體具有與依照參照序列的氨基酸序列(例如，SEQ IDNO: I)或其片段具有至少 50% 同一性，例如至少 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%或至少99%同一性的氨基酸序列?？梢允褂煤线m的計算機(jī)程序,例如威斯康辛大學(xué)(University of Wisconsin)Genetic Computing Group的GAP程序來測定兩種多肽間的百分比序列同一丨丨生,并且應(yīng)當(dāng)領(lǐng)會，相對于其序列已經(jīng)得到最佳比對的多肽計算百分比同一性?；蛘?，可以使用Clustal W程序來實(shí)施比對(如記載于Thompson等，1994，Nuc.Acid Res. 22:4673-4680的，通過提及而將其收入本文)。所使用的參數(shù)可以如下快速成對比對參數(shù)K_元組(字)大小1，窗大小5，缺口罰分3，頂部對角線的數(shù)目5。得分方法x百分比。多比對參數(shù)缺口打開罰分10，缺口延伸罰分0. 05。得分矩陣BL0SUM?；蛘?，可以使用BESTFIT程序來測定局部序列比對。在一個實(shí)施方案中，可以將來自上述參照序列的氨基酸突變以降低對多肽的蛋白水解降解，例如通過I, F至W修飾來進(jìn)行(見StrQmstedt等，Antimicrobial Agents
Chemother 2009, 53, 593)。 在又一個實(shí)施方案中，所述多肽包含來自與ATIII不同的serpin的氨基酸序列或由該氨基酸序列組成，所述氨基酸序列對應(yīng)于ATIII的SEQ ID N0:1( “FFF21”)的序列。下文表I中顯示了此類序列的例子。表I 人serpin家族序列比對的選定區(qū)域?？鼓窱II(P01008)的SEQ ID NO :I ( “FFF21”)的突出顯示區(qū)域?qū)?yīng)于氨基
酸 153-173
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f r I Q&PYFl 丨 y&PYm—人TYHV-DRSCNVHHQFQKLLTEF-N-KSTDAYELKIANKLFGEKTYQFLQEYLDAIKEFYQ
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sp I P29622 j KA丄W_人-----LSKaDVHRGfgH^LHTL-W-LPGHGLKTRVGaALb'LSHWLKt'LAKij'LWUTmVYK
[SEQ XD NO:38]
sp j P30740 I ILEU—人---------EVHSRFQSLNACI-N-KRGASYILKLAWRLYGEKTYNFLPEFLV3TQKTYG
[SEQ ID NO:39]
sp 丨 P36932 丨 SPD5—人--------KDIPFGFQTVTSCV-N-KUSFYSLKLIKRLYVDKSLNLSTEFISGTKRPYA
[SEQ ID NO:40]
sp I F485 35 I SPBlO—人SfNL-SWSii]!丄SE丄一L-iUNDUYLLKTAMA丄iGKKTYAFHNKYLEDMK1 丄,Yt.G
[SEQ ID NO:434
P50453 丨人-------KFnTHRAFQRT1T1^KV-H-KAHTQYlJlRTftNRT1FfiKKTnQFTiSTFKKKCTiQFYH
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trIQ5ID03 丨 Q5TDD3—人-------EEQIIIRAFQSLLXEV-N-KAGTQYLLRTANRLFGEKTCQFLSTFKESCLQFyn
ESEO 10 NO:43]
sp I PbCMW 丨 SERP-Fi 人-------3EEVHAGLGELLRSL-SNSTARNVTWKLGSRLYGPS3VSFADDFVRSSKQHYN
[SEQ ID HO:44
Sp 丨 Q(SLTXR4 I SPiU 3—人------PEEEIQEGFWDLLIRL-R-GQGPRLLLTMDQRRFSGLGARAW------------
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sp I Q(36U17 丨 SPAll —夕v——---PEADIHOGFESLLHTL-A-LPSPKLSLKVGNSLFLDKRLKPROHYLDSIKELYG
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sp I Q8IW75 丨 SP_A_12—人--------KDLREGFHYllHEL-iT-QKTQDLKLSIGNTLFIDQRLQPQRKFLEDAKNFYS
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sp|Q96P15jSPB11_ASPKC-SQAGRIHSEFGVEFSQI-W-Q DSNCTI,SIANRLyGXKTMAFHQQyLSCSEKWYa
[SEQ ID NO48]
spIQ96PG3 丨 SPB12—人GSLN-NE3GLVSCYFGQLLSKL-D-RIKTDYTL3TANRLYGEQEF IC2EYLDG\

權(quán)利要求
1.用于治療或預(yù)防炎癥和/或過度凝固的多肽，所述多肽包含源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)(與肝素輔因子II或凝血酶不同)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)(與肝素輔因子II或凝血酶不同)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成， 其中所述片段、變體、融合物或衍生物展現(xiàn)出抗炎和/或抗凝活性。
2.依照前述權(quán)利要求I的多肽，其中所述多肽不是天然存在的蛋白質(zhì)。
3.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是人蛋白質(zhì)。
4.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)選自下組絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpins)、組織因子途徑抑制劑(諸如TFPI-I和TFPI-2)和富含組氨酸的糖蛋白(HRG)。
5.依照權(quán)利要求4的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是serpin。
6.依照權(quán)利要求5的多肽,其中所述serpin是抗凝血酶III。
7.依照權(quán)利要求6的多肽，其中所述抗凝血酶III是SwissPort登錄號P01008。
8.依照權(quán)利要求6或7的多肽，其包含如下SEQID NO: I或2的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID NO: I或2的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“FFF21” FFFAKLNCRLYRKANKSSKLV [SEQ ID NO:I]“AKL22” AKLNCRLYRKANKSSKLVSANR [SEQ ID NO:2] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO: I或2的抗炎和/或抗凝活性。
9.依照權(quán)利要求8的多肽，其包含SEQID NOS: I或2的氨基酸序列或由SEQ ID NOSil或2的氨基酸序列組成。
10.依照權(quán)利要求5的多肽，其中所述serpin是蛋白C抑制劑(PCI)。
11.依照權(quán)利要求5的多肽，其中所述蛋白C抑制劑是SwissPort登錄號P05154。
12.依照權(quán)利要求10或11的多肽，其包含如下SEQID N0:8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:3的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“SEK20” SEKTLRKWLKMFKKRQLELY [SEQ ID NO:3] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO:3的抗炎和/或抗凝活性。
13.依照權(quán)利要求12的多肽，其包含SEQID NO:3的氨基酸序列或由SEQ ID NO:3的氨基酸序列組成。
14.依照權(quán)利要求4的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是組織因子途徑抑制劑(TFPI)。
15.依照權(quán)利要求14的多肽，其中所述組織因子途徑抑制劑是TFPI-1。
16.依照權(quán)利要求14的多肽，其中所述TFPI-I是SwissPort登錄號P10646。
17.依照權(quán)利要求15或16的多肽，其包含如下SEQID NOS:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“GGL27” GGLIKTKRKRKKQRVKIAYEEIFVKNM[SEQ ID NO:4] “LIK17” LIKTKRKRKKQRVKIAY[SEQ ID NO:5] “TKR22” TKRKRKKQRVKIAYEEIFVKNM [SEQ ID NO:6] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的抗炎和/或抗凝活性。
18.依照權(quán)利要求17的多肽，其包含SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列或由SEQ ID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列組成。
19.依照權(quán)利要求14的多肽，其中所述組織因子途徑抑制劑是TFPI-2。
20.依照權(quán)利要求19的多肽，其中所述TFPI-2是SwissPort登錄號P48307。
21.依照權(quán)利要求19或20的多肽，其包含如下SEQID N0:7或8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:7或8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成 “ALK25” ALKKKKKMPKLRFASRIRKIRKKQF[SEQ ID NO:7]“EDC34” EDCKRACAKALKKKKKMPKLRFASRIRKIRKKQF [SEQID NO:8] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID N0:7或8的抗炎和/或抗凝活性。
22.依照權(quán)利要求19的多肽，其包含SEQID NO: 7或8的氨基酸序列或由SEQ ID NO: 7或8的氨基酸序列組成。
23.依照權(quán)利要求4的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是富含組氨酸的糖蛋白(HRG)。
24.依照權(quán)利要求4的多肽，其中所述HRG是SwissPort登錄號P04196。
25.依照權(quán)利要求23或24的多肽，其包含如下SEQID N0:9的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:9的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成(X1X2X3X4X5)n[SEQ ID NO:9], 其中X1 和 X4 獨(dú)立代表 G，P，L, I，F(xiàn)，Τ，V，Y 或 W ; X2 > X3和X5獨(dú)立代表H，R或K ;且 “η”是2-6的整數(shù)， 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO:9的抗炎和/或抗凝活性。
26.依照權(quán)利要求23至25中任一項(xiàng)的多肽，其包含如下SEQID NO: 10的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ IDNO: 10的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成(GHHPH)n[SEQ ID NO: 10]，其中 “η” 是 2-6 的整數(shù)， 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO: 10的抗炎和/或抗凝活性。
27.依照權(quán)利要求23至26中任一項(xiàng)的多肽，其包含如下SEQID ΝΟ:11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ IDNO: 11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“GHH25” GHHPHGHHPHGHHPHGHHPHGHHPH[SEQ ID NO:11] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO: 11的抗炎和/或抗凝活性。
28.依照權(quán)利要求23至27中任一項(xiàng)的多肽，其包含SEQID NO:9, 10或11的氨基酸序列或由SEQ ID NO:9，10或11的氨基酸序列組成。
29.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽、或其片段、變體、融合物或衍生物包含L-氨基酸或由L-氨基酸組成。
30.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽、或其片段、變體、融合物或衍生物包含一個或多個經(jīng)修飾或衍生化的氨基酸。
31.依照權(quán)利要求30的多肽，其中所述一個或多個氨基酸是通過PEG化、酰胺化、酯化、?；?、乙?；?或烷基化修飾或衍生化的。
32.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽包含SEQID NO: I至11的任一種氨基酸序列的片段或由SEQ ID NO: I至11的任一種氨基酸序列的片段組成。
33.依照權(quán)利要求32的多肽，其中所述片段包含SEQID NO:3的至少5個連續(xù)氨基酸或由SEQ ID NO:3的至少5個連續(xù)氨基酸組成，例如至少6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18，19，20，21，22，23，24，25，26 或 27 個連續(xù)氨基酸。
34.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽包括SEQID NO: I至11中任一項(xiàng)的任一種氨基酸序列的變體或由SEQ ID NO: I至11中任一項(xiàng)的任一種氨基酸序列的變體組成。
35.依照權(quán)利要求34的多肽，其中所述變體與SEQID NOS: I至11中任一項(xiàng)的氨基酸序列具有至少 50% 同一性，例如至少 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%或至少99%同一性。
36.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽的長度是10-200個氨基酸，例如長度為 10-150、15-100、15-50、15-30、17-30、或 17-28 個氨基酸。
37.依照權(quán)利要求36的多肽，其中所述多肽的長度是至少17個氨基酸。
38.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽是線性的。
39.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽是重組多肽。
40.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽能夠抑制一種或多種促炎性細(xì)胞因子自人單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞的釋放。
41.依照權(quán)利要求33的多肽，其中所述促炎性細(xì)胞因子選自下組巨噬細(xì)胞抑制因子、TNF-a、HMGBl、C5a、IL-17、IL_8、MCP_1、IFN-γ、11-6, IL_lb、IL-12。
42.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽能夠阻斷血小板活化。
43.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽能夠干擾白細(xì)胞、上皮細(xì)胞(包括角質(zhì)形成細(xì)胞)和/或間充質(zhì)細(xì)胞(包括成纖維細(xì)胞)中的Toll樣受體(TLR)信號傳導(dǎo)。
44.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽在下列一種或多種模型中展現(xiàn)出抗炎活性 (a)使用LPS、LTA、酵母聚糖、鞭毛蛋白、塵螨、病毒或細(xì)菌DNA或RNA、或肽聚糖作為刺激物的體外巨噬細(xì)胞模型； (b)內(nèi)毒素休克的體內(nèi)小鼠模型；和/或 (c)或是與抗微生物療法組合或是單獨(dú)給予的體內(nèi)感染模型。
45.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽展現(xiàn)出抗凝活性。
46.依照權(quán)利要求45的多肽，其用于伴隨治療或預(yù)防炎癥和凝固。
47.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽展現(xiàn)出Toll樣受體(TLR)阻斷活性。
48.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽用于治療或預(yù)防與感染有關(guān)的炎癥。
49.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其用于治療或預(yù)防選自下列的疾病、狀況或適應(yīng)癥 i)伴有或沒有感染性成分的急性系統(tǒng)性炎性疾病，諸如系統(tǒng)性炎性應(yīng)答綜合征(SIRS)、ARDS、敗血癥、重度敗血癥、和感染性休克，其它全身性或局部侵入性傳染性和炎性疾病，包括丹毒、腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、毒性休克綜合征、憩室炎、闌尾炎、胰腺炎、膽囊炎、結(jié)腸炎、蜂窩織炎、燒傷創(chuàng)面感染、肺炎、尿路感染、術(shù)后感染、和腹膜炎； )慢性炎性和或傳染性疾病，包括囊性纖維化、coro和其它肺部疾病、胃腸疾病，包括慢性皮膚和胃潰瘍、其它上皮炎性和或傳染性疾病諸如特應(yīng)性皮炎、口腔潰瘍(口瘡性潰瘍)、生殖器潰瘍和炎性變化、牙周炎、眼部炎癥，包括結(jié)膜炎和角膜炎，外耳炎、中耳炎、泌尿生殖器炎癥； iii)術(shù)后炎癥，炎性和凝固性病癥，包括血栓形成、DIC、術(shù)后凝固病癥、和與接觸外來物質(zhì)有關(guān)的凝固病癥，包括體外循環(huán)、及生物材料的使用，此外，血管炎相關(guān)炎性疾病，及變態(tài)反應(yīng)，包括變應(yīng)性鼻炎和哮喘； iv)與中風(fēng)有關(guān)，但不限于中風(fēng)的過度接觸活化和/或凝固； V)與抗微生物治療組合的過度炎癥，使用的抗微生物劑可以通過多種路徑；靜脈內(nèi)Qv)、動脈內(nèi)、玻璃體內(nèi)、皮下(sc)、肌肉內(nèi)(im)、腹膜內(nèi)(ip)、膀胱內(nèi)、鞘內(nèi)(intratechal)、硬膜外、腸內(nèi)(包括口服、直腸、胃、和其它腸內(nèi)路徑)、或表面(包括皮膚、鼻應(yīng)用、眼或耳中的應(yīng)用，例如通過滴劑，及肺吸入)來施用，藥劑的例子是青霉素、頭孢菌素、碳頭孢烯、頭霉素、碳青霉烯、單酰胺菌素、氨基糖苷類、糖肽、喹諾酮、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯、和氟喹諾酮。防腐劑包括碘、銀、銅、氯己定(chlorhexidine)、聚己縮胍和其它雙胍、殼聚糖、乙酸、和過氧化氫。
50.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其用于治療或預(yù)防急性炎癥、敗血癥、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纖維化、哮喘、變應(yīng)性和其它類型的鼻炎、皮膚和系統(tǒng)性血管炎、血栓形成和彌散性血管內(nèi)凝固(DIC)。
51.依照權(quán)利要求50的多肽，其用于治療或預(yù)防敗血癥。
52.依照權(quán)利要求50的多肽，其用于治療或預(yù)防慢性阻塞性肺病(COPD)。
53.依照前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的多肽，其與一種或多種別的治療劑組合使用。
54.依照權(quán)利要求53的多肽，其中所述別的治療劑選自下組抗生劑、抗真菌劑、防腐劑、抗炎劑、免疫抑制劑、血管活性劑、受體阻斷劑、受體激動劑和防腐劑。
55.依照權(quán)利要求54的多肽，其中所述抗生劑選自下組抗細(xì)菌劑、抗殺真菌劑、抗病毒劑和抗寄生物劑。
56.一種分離的多肽，其包含源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成，所述多肽展現(xiàn)出抗炎和/或抗凝活性， 其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)選自下組serpin(與肝素輔因子II不同)、富含組氨酸的糖蛋白(HRG)和組織因子途徑抑制劑(諸如TFPI-I和TFPI-2)， 但須所述多肽不是天然存在的蛋白質(zhì)。
57.依照權(quán)利要求56的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是人蛋白質(zhì)。
58.依照權(quán)利要求56或57的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)選自下組絲氨酸蛋白酶抑制劑(serpins)、組織因子途徑抑制劑(諸如TFPI-I和TFPI-2)和富含組氨酸的糖蛋白(HRG)。
59.依照權(quán)利要求58的多肽,其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是serpin。
60.依照權(quán)利要求59的多肽,其中所述serpin是抗凝血酶III。
61.依照權(quán)利要求60的多肽，其中所述抗凝血酶III是SwissPort登錄號P01008。
62.依照權(quán)利要求60或61的多肽，其包含如下SEQID NO: I或2的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0S:1或2的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“FFF21” FFFAKLNCRLYRKANKSSKLV [SEQ ID NO:I]“AKL22”AKLNCRLYRKANKSSKLVSANR [SEQ ID NO:2] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID N0S: I或2的抗炎和/或抗凝活性。
63.依照權(quán)利要求62的多肽，其包含SEQID NO: I或2的氨基酸序列或由SEQ ID NO: I或2的氨基酸序列組成。
64.依照權(quán)利要求59的多肽，其中所述serpin是蛋白C抑制劑(PCI)。
65.依照權(quán)利要求64的多肽，其中所述蛋白C抑制劑是SwissPort登錄號P05154。
66.依照權(quán)利要求64或65的多肽，其包含如下SEQID NO: 3的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:3的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“SEK20” SEKTLRKWLKMFKKRQLELY [SEQ ID NO:3]所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO:3的抗炎和/或抗凝活性。
67.依照權(quán)利要求66的多肽，其包含SEQID NO: 3的氨基酸序列或由SEQ ID NO: 3的氨基酸序列組成。
68.依照權(quán)利要求58的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是組織因子途徑抑制劑(TFPI)。
69.依照權(quán)利要求68的多肽，其中所述組織因子途徑抑制劑是TFPI-1。
70.依照權(quán)利要求69的多肽，其中所述TFPI-I是SwissPort登錄號P10646。
71.依照權(quán)利要求68或69的多肽，其包含如下SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“GGL27”GGLIKTKRKRKKQRVKIAYEEIFVKNM [SEQ ID NO:4] “LIK17” LIKTKRKRKKQRVKIAY[SEQ ID NO:5] “TKR22” TKRKRKKQRVKIAYEEIFVKNM[SEQ ID NO:6] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的抗炎和/或抗凝活性。
72.依照權(quán)利要求71的多肽，其包含SEQID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列或由SEQ ID N0S:4至6中任一項(xiàng)的氨基酸序列組成。
73.依照權(quán)利要求68的多肽，其中所述組織因子途徑抑制劑是TFPI-2。
74.依照權(quán)利要求73的多肽，其中所述TFPI-2是SwissPort登錄號P48307。
75.依照權(quán)利要求73或74的多肽，其包含如下SEQID N0:7或8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:7或8的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成 “ALK25” ALKKKKKMPKLRFASRIRKIRKKQF[SEQ ID NO:7]“EDC34” EDCKRACAKALKKKKKMPKLRFASRIRKIRKKQF [SEQID NO:8] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID N0:7或8的抗炎和/或抗凝活性。
76.依照權(quán)利要求75的多肽，其包含SEQID NO: 7或8的氨基酸序列或由SEQ ID NO: 7或8的氨基酸序列組成。
77.依照權(quán)利要求58的多肽，其中所述調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)是富含組氨酸的糖蛋白(HRG)。
78.依照權(quán)利要求77的多肽，其中所述HRG是SwissPort登錄號P04196。
79.依照權(quán)利要求77或78的多肽，其包含如下SEQID N0:9的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ ID N0:9的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成(X1X2X3X4X5)n[SEQ ID NO:9], 其中X1 和 X4 獨(dú)立代表 G，P，L, I，F(xiàn)，T，V，Y 或 W ; X2 > X3和X5獨(dú)立代表H，R或K ;且 “η”是2-6的整數(shù)， 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或 所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO:9的抗炎和/或抗凝活性。
80.依照權(quán)利要求77至79中任一項(xiàng)的多肽，其包含如下SEQID NO: 10的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ IDNO: 10的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成 (Ghhph)Jseq id no: 10]，其中 “η” 是 2-6 的整數(shù)， 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO: 10的抗炎和/或抗凝活性。
81.依照權(quán)利要求77至80中任一項(xiàng)的多肽，其包含如下SEQID Ν0:11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由如下SEQ IDNO: 11的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成“GHH25”GHHPHGHHPHGHHPHGHHPHGHHPH[SEQ ID NO:11] 所述其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物保留SEQID NO: 11的抗炎和/或抗凝活性。
82.依照權(quán)利要求77至81中任一項(xiàng)的多肽，其包含SEQID NO: 9, 10或11的氨基酸序列或由SEQ ID NO:9，10或11的氨基酸序列組成。
83.依照權(quán)利要求56至82中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽、或其片段、變體、融合物或衍生物包含L-氨基酸或由L-氨基酸組成。
84.依照權(quán)利要求56至83中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽、或其片段、變體、融合物或衍生物包含一個或多個經(jīng)修飾或衍生化的氨基酸。
85.依照權(quán)利要求84的多肽，其中所述一個或多個氨基酸是通過PEG化、酰胺化、酯化、?；?、乙酰化和/或烷基化修飾或衍生化的。
86.依照權(quán)利要求56至85中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽的長度是10-200個氨基酸，例如長度為 10-150、15-100、15-50、15-30、17-30、或 17-28 個氨基酸。
87.依照權(quán)利要求86的多肽，其中所述多肽的長度是至少17個氨基酸。
88.依照權(quán)利要求56至87中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽是線性的。
89.依照權(quán)利要求56至88中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽是重組多肽。
90.依照權(quán)利要求56至89中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽能夠抑制一種或多種促炎性細(xì)胞因子自人單核細(xì)胞衍生的巨噬細(xì)胞的釋放。
91.依照權(quán)利要求90的多肽，其中所述促炎細(xì)胞因子選自下組巨噬細(xì)胞抑制因子、TNF-a、HMGBl、C5a、IL-17, IL_8、MCP_1、IFN-γ、11-6, IL_lb、IL-12。
92.依照權(quán)利要求56至91中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽能夠阻斷血小板活化。
93.依照權(quán)利要求56至92中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽能夠干擾白細(xì)胞、上皮細(xì)胞(包括角質(zhì)形成細(xì)胞)和/或間充質(zhì)細(xì)胞(包括成纖維細(xì)胞)中的Toll樣受體(TLR)信號傳導(dǎo)。
94.依照權(quán)利要求56至93中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽在下列一種或多種模型中展現(xiàn)出抗炎活性 (a)使用LPS、LTA、酵母聚糖、鞭毛蛋白、塵螨、病毒或細(xì)菌DNA或RNA、或肽聚糖作為刺激物的體外巨噬細(xì)胞模型； (b)內(nèi)毒素休克的體內(nèi)小鼠模型；和/或 (c)或是與抗微生物療法組合或是單獨(dú)給予的體內(nèi)感染模型。
95.依照權(quán)利要求56至94中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽展現(xiàn)出抗凝活性。
96.依照權(quán)利要求56至95中任一項(xiàng)的多肽，其中所述多肽展現(xiàn)出Toll樣受體(TLR)阻斷活性。
97.—種分離的核酸分子,其編碼依照權(quán)利要求56至96中任一項(xiàng)的多肽。
98.—種載體,其包含依照權(quán)利要求97的核酸分子。
99.依照權(quán)利要求98的載體，其中所述載體是表達(dá)載體。
100.—種宿主細(xì)胞，其包含依照權(quán)利要求97的核酸分子或依照權(quán)利要求98或99的載體。
101.一種生成依照權(quán)利要求56至86中任一項(xiàng)的多肽的方法，包括在表達(dá)所述多肽的條件下培養(yǎng)依照權(quán)利要求100的宿主細(xì)胞的群體，并自其分離所述多肽。
102.一種生成依照權(quán)利要求56至86中任一項(xiàng)的多肽的方法，包括多肽的液相或固相合成。
103.一種藥物組合物，其包含依照權(quán)利要求56至86中任一項(xiàng)的多肽以及藥學(xué)可接受賦形劑、稀釋劑、載體、緩沖液或佐劑。
104.依照權(quán)利要求103的藥物組合物，其適合于經(jīng)由選自下組的路徑施用表面、眼、鼻、肺、含服、胃腸外(靜脈內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)和肌肉內(nèi))、口服、陰道和直腸。
105.依照權(quán)利要求103的藥物組合物，其適合于經(jīng)由植入物施用。
106.依照權(quán)利要求103至105中任一項(xiàng)的藥物組合物，其中所述藥物組合物與要在醫(yī)學(xué)中使用的裝置或材料結(jié)合。
107.依照權(quán)利要求106的藥物組合物，其中所述裝置在旁路手術(shù)、體外循環(huán)、傷口護(hù)理和/或透析中使用。
108.依照權(quán)利要求106或107的藥物組合物，其中所述藥物組合物是包被、涂覆、噴霧或以其它方式應(yīng)用于縫合線、假體、植入物、傷口敷料、導(dǎo)管、鏡片、皮膚移植物、皮膚替代物、血纖蛋白膠或繃帶的。
109.依照權(quán)利要求106至108的藥物組合物，其中所述裝置或材料包含聚合物、金屬、金屬氧化物和/或陶瓷或由聚合物、金屬、金屬氧化物和/或陶瓷組成。
110.依照權(quán)利要求56至86中任一項(xiàng)的多肽，其在醫(yī)學(xué)中使用。
111.依照權(quán)利要求110的多肽，其用于治療和/預(yù)防急性和/或慢性炎癥。
112.依照權(quán)利要求110的多肽，其用于治療和/預(yù)防微生物感染(例如細(xì)菌性感染)。
113.依照權(quán)利要求110的多肽，其用于調(diào)控血液凝固。
114.依照權(quán)利要求110的多肽。其用于治療傷口。
115.依照權(quán)利要求110或114中任一項(xiàng)的多肽，其用于治療或預(yù)防選自下列的疾病、狀況或適應(yīng)癥 i)伴有或沒有感染性成分的急性系統(tǒng)性炎性疾病，諸如系統(tǒng)性炎性應(yīng)答綜合征(SIRS)、ARDS、敗血癥、重度敗血癥、和感染性休克，其它全身性或局部侵入性傳染性和炎性疾病，包括丹毒、腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、毒性休克綜合征、憩室炎、闌尾炎、胰腺炎、膽囊炎、結(jié)腸炎、蜂窩織炎、燒傷創(chuàng)面感染、肺炎、尿路感染、術(shù)后感染、和腹膜炎； )慢性炎性和或傳染性疾病，包括囊性纖維化、coro和其它肺部疾病、胃腸疾病，包括慢性皮膚和胃潰瘍、其它上皮炎性和或傳染性疾病諸如特應(yīng)性皮炎、口腔潰瘍(口瘡性潰瘍)、生殖器潰瘍和炎性變化、牙周炎、眼部炎癥，包括結(jié)膜炎和角膜炎，外耳炎、中耳炎、泌尿生殖器炎癥。
iii)術(shù)后炎癥，炎性和凝固性病癥，包括血栓形成、DIC、術(shù)后凝固病癥、和與接觸外來物質(zhì)有關(guān)的凝固病癥，包括體外循環(huán)、及生物材料的使用，此外，血管炎相關(guān)炎性疾病，及變態(tài)反應(yīng)，包括變應(yīng)性鼻炎和哮喘； iv)與中風(fēng)有關(guān)，但不限于中風(fēng)的過度接觸活化和/或凝固； V)與抗微生物治療組合的過度炎癥，使用的抗微生物劑可以通過多種路徑；靜脈內(nèi)(iv)、動脈內(nèi)、玻璃體內(nèi)、皮下(sc)、肌肉內(nèi)(im)、腹膜內(nèi)(ip)、膀胱內(nèi)、鞘內(nèi)、硬膜外、腸內(nèi)(包括口服、直腸、胃、和其它腸內(nèi)路徑)、或表面(包括皮膚、鼻應(yīng)用、眼或耳中的應(yīng)用，例如通過滴劑，及肺吸入)來施用，藥劑的例子是青霉素、頭孢菌素、碳頭孢烯、頭霉素、碳青霉烯、單酰胺菌素、氨基糖苷類、糖肽、喹諾酮、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯、和氟喹諾酮。防腐劑包括碘、銀、銅、氯己定、聚己縮胍和其它雙胍、殼聚糖、乙酸、和過氧化氫。
116.依照權(quán)利要求56至86中任一項(xiàng)的多肽在制備用于治療或預(yù)防炎癥和/或過度凝固的藥物中的用途。
117.依照權(quán)利要求116的用途，其中所述藥物用于治療或預(yù)防急性炎癥、敗血癥、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纖維化、哮喘、變應(yīng)性和其它類型的鼻炎、皮膚和系統(tǒng)性血管炎、血栓形成和彌散性血管內(nèi)凝固(DIC)。
118.依照權(quán)利要求114的用途，其中所述藥物用于治療或預(yù)防敗血癥。
119.依照權(quán)利要求114的用途，其中所述藥物用于治療或預(yù)防慢性阻塞性肺病(COPD)。
120.依照權(quán)利要求116至119中任一項(xiàng)的用途，其中所述藥物與一種或多種別的治療劑組合使用。
121.依照權(quán)利要求120的用途，其中所述別的治療劑選自下組抗生劑、抗真菌劑、抗炎劑、免疫抑制劑、血管活性劑和防腐劑。
122.依照權(quán)利要求121的用途，其中所述抗生劑選自下組抗細(xì)菌劑、抗殺真菌劑、抗病毒劑和抗寄生物劑。
123.依照權(quán)利要求121的用途，其中所述別的治療劑是類固醇。
124.—種用于治療或預(yù)防患者中的炎癥的方法，該方法包括對所述患者施用治療有效量的依照權(quán)利要求I至86中任一項(xiàng)的多肽或依照權(quán)利要求103或109中任一項(xiàng)的藥物組合物。
125.依照權(quán)利要求124的方法，其中所述患者是人。
126.依照權(quán)利要求124或125的方法，其用于治療或預(yù)防急性炎癥、敗血癥、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)、慢性阻塞性肺病(COPD)、囊性纖維化、哮喘、變應(yīng)性和其它類型的鼻炎、皮膚和系統(tǒng)性血管炎、血栓形成和彌散性血管內(nèi)凝固(DIC)。
127.依照權(quán)利要求126的方法，其用于治療或預(yù)防敗血癥。
128.依照權(quán)利要求126的方法，其用于治療或預(yù)防慢性阻塞性肺病(COPD)。
129.依照權(quán)利要求124至128中任一項(xiàng)的方法，其中所述方法對所述患者進(jìn)一步施用一種或多種別的治療劑。
130.依照權(quán)利要求129的方法，其中所述別的治療劑選自下組抗生劑、抗炎劑、免疫抑制劑、血管活性劑、受體阻斷劑、受體激動劑和防腐劑。
131.依照權(quán)利要求130的方法，其中所述抗生劑選自下組抗細(xì)菌劑、抗殺真菌劑、抗病毒劑和抗寄生物劑。
132.依照權(quán)利要求129的方法，其中所述別的治療劑是類固醇。
133.基本上如本文中參照說明書和附圖
所描述的多肽。
134.基本上如本文中參照說明書和附圖所描述的藥物組合物。
135.基本上如本文中參照說明書和附圖所描述的醫(yī)學(xué)移植物或裝置，或其中使用的生物材料。
136.基本上如本文中參照說明書和附圖所描述的多肽的用途。
137.基本上如本文中參照說明書和附圖所描述的用于治療或預(yù)防炎癥的方法。
全文摘要
本發(fā)明提供了用于治療或預(yù)防炎癥和/或血液過度凝固的多肽，所述多肽包含源自調(diào)控血液凝固的天然存在的蛋白質(zhì)的氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物，或由該氨基酸序列、或其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成。本發(fā)明的相關(guān)方面提供了包含SEQ ID NOS:1至11的氨基酸序列、或展現(xiàn)出抗炎和/或抗凝活性的其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物或由SEQ ID NOS:1至11的氨基酸序列、或展現(xiàn)出抗炎活性和/或抗凝血的其片段、變體、融合物或衍生物、或所述其片段、變體或衍生物的融合物組成的分離的多肽，以及用于制備所述分離的多肽的分離的核酸分子、載體和宿主細(xì)胞。另外，提供了包含本發(fā)明的多肽的藥物組合物，及使用其治療和/或預(yù)防炎性和/或過度凝固的方法。
文檔編號C07K14/435GK102639556SQ201080052709
公開日2012年8月15日 申請日期2010年9月22日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月22日
發(fā)明者A.施密特肯, B.U.沃爾斯, M.卡勒, N.M.馬爾姆斯騰, P.帕帕雷帝, V.賴登嘉德 申請人:X免疫股份公司