專利名稱：一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明屬于天然藥物提取技術(shù)領域，涉及ー種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，尤其涉及ー種應用超臨界萃取法和高速逆流色譜提取純化蓽茇寧的方法。
背景技術(shù)：
蓽茇為胡椒科植物蓽茇的近成熟或成熟果穗，是中、蒙醫(yī)常用藥材，具有溫中散寒、理氣止痛功能。臨床中不僅用于治療胃脘痛、嘔吐、泄瀉、臍腹痛、牙痛、頭痛，蒙醫(yī)還用于治療高脂血癥、冠心病等病。近些年，國內(nèi)外對蓽茇及其有效成分的認識不斷深入，其藥理作用一直是ー些學者的研究熱點。經(jīng)過數(shù)年的研究，從蓽茇中提取得到化學結(jié)構(gòu)明確的単一化合物——蓽茇寧，并且首次發(fā)現(xiàn)蓽茇寧具有顯著的降血脂活性。領小等采用熒光分析法對蓽茇中有效成分蓽茇寧進行了研究，結(jié)果顯示，蓽茇中蓽茇寧的含量約為0. 69%。 蓽茇寧是從蓽茇中提取分離獲得的胡椒堿類衍生物，白色針狀結(jié)晶，C16H19NO3，屬于酰胺類生物堿，弱堿性。長期以來，由于對蓽茇中各種具體組分的提取存在一定的困難，人們普遍以蓽茇生物堿提取物的形式用于醫(yī)學應用。如中國專利(公開號為CN101554409A)“蓽茇生物堿及其制備方法、制劑和用途”，該專利公開了ー種采用樹脂技術(shù)富集得到蓽茇總生物堿提取物的方法，該方法所得產(chǎn)品是多種生物堿的混合物；中國專利(公開號為CN101791336A) “來自蓽茇的提取物及其制備方法與應用”，該專利公開的方法是醇提、大孔樹脂吸附純化得到蓽茇提取物；中國專利(公開號為CN101863872A) “ー種蓽茇堿的提取方法和包含蓽茇堿的藥物組合物”，該專利采用兩次硅膠柱層析和重結(jié)晶的方法得到蓽茇堿単體，成本低，但操作繁復，重現(xiàn)性差，收率低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，解決了效率低和產(chǎn)品純度不高的問題。本發(fā)明是通過如下的技術(shù)方案來實現(xiàn)的一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于包括以下步驟以蓽茇藥材為原料，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集蓽茇寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調(diào)PH8-10，加入氯仿萃取，萃取液回收氯仿，以氯仿-甲醇-5%鹽酸為兩相溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜法進行分離純化，流出物濃縮、低溫干燥即得高含量的蓽茇寧。所述的醇為90-100%こ醇，用量為20_50ml/100g藥材。所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓カ為30_45MPa，CO2流量為20-50L/h，萃取時間為l_4h，分離釜I溫度為35-50°C，壓カ為8-10MPa，分離釜II溫度為30-45°C，壓カ為 6_8MPa。所述的酸水為2-5%的鹽酸或硫酸水溶液，堿為氨水溶液。所述的氯仿-甲醇-5%鹽酸比例為4-5 4-6 3，上相為固定相，下相為流動相。
本發(fā)明的提取方法簡單易行、污染少、效率高、樣品損失少、產(chǎn)品純度高，并可保護藥物的穩(wěn)定性。下面將結(jié)合實施例進ー步闡述本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施例。
具體實施例方式實施例I :以蓽茇藥材為原料，粉碎，取1kg，加入350ml95%こ醇浸潤I. 5小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，開啟設備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為45°C，萃取壓カ為30MPa，CO2流量為30L/h，萃取時間為2. 5h，分離釜I溫度為35°C，壓カ為lOMPa，分離釜II溫度為30°C，壓カ為8MPa，收集蓽茇寧萃取物，用2%的鹽酸或硫酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)PH8，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層回收溶劑，得到蓽茇寧粗品。以體積比為4 4 3的氯仿-甲醇-5%鹽酸為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設定流動相流速為4ml/min，同時開啟主機同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為IOOOrpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達成動態(tài)平衡，用下相溶解蓽茇寧粗品，通過進樣閥進樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含蓽茇寧收集液合并，真空濃縮，低溫干燥即得蓽茇寧6. 2g，含量為98. 91 %。實施例2:以蓽茇藥材為原料，粉碎，取1kg，加入300ml 90%こ醇浸潤I小時，加入萃取釜
中，采用超臨界CO2萃取，開啟設備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為40°C，萃取壓カ為35MPa，CO2流量為45L/h，萃取時間為lh，分離釜I溫度為50°C，壓カ為8MPa，分離釜II溫度為45°C，壓カ為6MPa，收集蓽茇寧萃取物，用4%的鹽酸或硫酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)PH9，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層回收溶劑，得到蓽茇寧粗品。以體積比為5 6 3的氯仿-甲醇-5%鹽酸為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設定流動相流速為3ml/min，同時開啟主機同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為900rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達成動態(tài)平衡，用下相溶解蓽茇寧粗品，通過進樣閥進樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含蓽茇寧收集液合并，真空濃縮，低溫干燥即得蓽發(fā)寧6. 9g,含量為98. 52%。實施例3:以蓽茇藥材為原料，粉碎，取1kg，加入200ml 100%こ醇浸潤2小時，加入萃取釜
中，采用超臨界CO2萃取，開啟設備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為55°C，萃取壓カ為38MPa，CO2流量為50L/h，萃取時間為3h，分離釜I溫度為40°C，壓カ為8. 5MPa，分離釜I溫度為35°C，壓カ為6. 5MPa，收集蓽茇寧萃取物，用5%的鹽酸或硫酸水溶液溶解，濾去不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)PH10，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層回收溶劑，得到蓽茇寧粗品。以體積比為5 5 3的氯仿-甲醇-5%鹽酸為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設定流動相流速為5ml/min，同時開啟主機同時調(diào)節(jié)、分離柱轉(zhuǎn)速為850rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達成動態(tài)平衡，用下相溶解蓽茇寧粗品，通過進樣閥進樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含蓽茇寧收集液合井，真空濃縮，低溫干燥即得蓽茇寧5. lg，含量為99. 00%。實施例4 以蓽茇藥材為原料，粉碎，取1kg，加入500ml 100%こ醇浸潤I小時，加入萃取釜
中，采用超臨界CO2萃取，開啟設備調(diào)節(jié)參數(shù)萃取溫度為50°C，萃取壓カ為45MPa，CO2流量為20L/h，萃取時間為4h，分離釜I溫度為45°C，壓カ為lOMPa，分離釜II溫度為38°C，壓カ為7. 5MPa，收集蓽茇寧萃取物，用2%的鹽酸或硫酸水溶液溶解，濾去 不溶物，濾液加氨水溶液調(diào)PH8，加入氯仿萃取，離心，取氯仿層回收溶劑，得到蓽茇寧粗品。以體積比為4 5 3的氯仿-甲醇-5%鹽酸為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混合后，靜置分相，取上相為固定相，下相為流動相，用雙泵等比例同時泵入流動相和固定相，當溶劑從管路出ロ流出時停止泵入固定相，設定流動相流速為3. 5ml/min,同時開啟主機同時調(diào)節(jié)分離柱轉(zhuǎn)速為750rpm，待管柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)達成動態(tài)平衡，用下相溶解蓽茇寧粗品，通過進樣閥進樣，使用分步收集器收集流出組分，將富含蓽茇寧收集液合井，真空濃縮，低溫干燥即得蓽茇寧5. 9g，含量為99. 33%。
權(quán)利要求
1.一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于包括以下步驟以蓽茇藥材為原料，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集蓽茇寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調(diào)PH8-10，加入氯仿萃取，萃取液回收氯仿，以氯仿-甲醇-5%鹽酸為兩相溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜法進行分離純化，流出物濃縮、低溫干燥即得高含量的蓽茇寧。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于所述的醇為90-100%こ醇，用量為20-50ml/100g藥材。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40-55°C，萃取壓カ為30-45MPa，CO2流量為20_50L/h，萃取時間為l_4h，分離釜I溫度為35-50°C，壓カ為8-10MPa，分離釜II溫度為30_45°C，壓カ為6_8MPa。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于所述的酸水為2-5%的鹽酸或硫酸水溶液,堿為氨水溶液。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法，其特征在于所述的氯仿-甲醇-5%鹽酸比例為4-5 4-6 3，上相為固定相，下相為流動相。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從蓽茇中提取蓽茇寧的方法。該方法步驟是以蓽茇藥材為原料，粉碎，加入醇浸潤1-2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集蓽茇寧萃取物，用酸水溶解，濾去不溶物，濾液加堿調(diào)pH8-10，加入氯仿萃取，萃取液回收氯仿，再采用高速逆流色譜法進行分離純化，流出物濃縮、低溫干燥即得產(chǎn)品。本發(fā)明提取效率高，制備量大，樣品損失少，產(chǎn)品純度高。
文檔編號C07D317/60GK102649784SQ201110045358
公開日2012年8月29日 申請日期2011年2月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月25日
發(fā)明者劉東鋒, 李法慶 申請人:蘇州寶澤堂醫(yī)藥科技有限公司