專利名稱：汽爆喜樹果提取及制備喜樹堿的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于藥用植物有效成分的提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及藥用植物有效成分提取 前的汽爆處理技術(shù)。
背景技術(shù)：
喜樹果是中國珙桐科植物喜樹(Camptotheca acuminata Decne)的成熟果實，主 要活性成分喜樹堿(Camptothecine，CPT)對治療結(jié)腸癌、卵巢癌等惡性腫瘤有很好療效。 以成熟喜樹果為原料提取喜樹堿，原料采收方便，對喜樹資源無破壞，不會引起生態(tài)破壞等 問題，并且實現(xiàn)了資源的綜合利用。國家知識產(chǎn)權(quán)局專利局公布了幾種有關(guān)從喜樹果中提取喜樹堿的工藝的專利工 藝1 :1996年5月8日公開的一種喜樹堿的提取方法，專利申請?zhí)枮?4111946. 7，該發(fā)明 專利以喜樹果實或根皮為原料，采用磨粉-水煮-煮液濃縮-膏狀物-乙醇分離樹膠雜 質(zhì)-析出粗品-氯仿混合液多次重結(jié)晶后得到產(chǎn)品的工藝路線，產(chǎn)品純度92%，產(chǎn)品得率為 0.2%。;工藝2 :2000年4月沈日公開的一種喜樹堿的生產(chǎn)方法，專利申請?zhí)枮?9113256. 4， 該發(fā)明專利以喜樹葉及種子為原料，經(jīng)粉碎-乙醇及水滲漉-濃縮滲漉液-大孔吸附樹脂 柱層析-重結(jié)晶得產(chǎn)品，產(chǎn)品純度97. 5%，產(chǎn)品得率為0.2 0.3%。;工藝3 :2005年6月1日 公開的喜樹堿的生產(chǎn)工藝，專利申請?zhí)枮?00310111050. 9，該發(fā)明以喜樹堿含量為0. 8 1.0%。喜樹果實為原料，經(jīng)粉碎-乙醇滲漉-濃縮滲漉液-過濾得濾液-溶劑萃取-混合溶 劑1重結(jié)晶純化-混合溶劑2重結(jié)晶純化得粗晶-混合溶劑3精致純化得精品，產(chǎn)品純度 94%，產(chǎn)品得率0. 4%。。工藝4 2009年1月21日公開的喜樹堿的分離提取方法，專利申請 號為2008100737811，該發(fā)明以喜樹果、喜樹葉為原料，經(jīng)粉碎-稀氫氧化鈉溶液浸提-浸提 液酸沉除雜-微濾-超濾-納濾-大孔吸附樹脂柱層析-乙醇解吸，乙醇解吸液濃縮至浸 膏-乙酸乙酯萃取，萃取液結(jié)晶，得到喜樹堿粗品-乙酸乙酯-丙酮的混合溶液進(jìn)行重結(jié)晶 得到喜樹堿精品，產(chǎn)品純度98%以上，產(chǎn)品得率達(dá)0. 5 0. 6%。。工藝5 2004年2月4日 公開的喜樹堿高效生產(chǎn)工藝，專利申請?zhí)枮?21327211，該發(fā)明將喜樹種子清洗去除雜質(zhì)后 于醇或酸醇提取溶劑混合-勻漿固液萃取-空化混旋固液萃取-過濾-提取液濃縮-空化 混旋液液萃取-純化-成品。喜樹堿得率為0. 4 0. 6%。，純度在98%以上。工藝1 4中喜樹堿的提取原料只是做了簡單的粉碎處理，而提取方法普遍存在 提取時間長，提取率及得率低，生產(chǎn)成品高、工序復(fù)雜不易于推廣等缺點，且產(chǎn)品收率僅為 0. 2 0. 6%。。工藝5采用勻漿提取，具有工藝簡單，溶劑使用量少，無污染等優(yōu)點，但喜樹 堿得率低于0.6%。。成熟喜樹果中喜樹堿含量一般為0. 左右，主要分布在細(xì)胞液泡內(nèi)，其提取必須 克服細(xì)胞壁、細(xì)胞膜和液泡膜的屏障作用。然而喜樹果富含纖維，細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密，是有效 成分喜樹堿提取的主要障礙。簡單的粉碎處理并未克服細(xì)胞壁致密結(jié)構(gòu)的屏障作用，因此， 盡管后續(xù)提取方法和提取工藝改進(jìn)較多，喜樹堿提取率仍然很低。蒸汽爆破(汽爆)技術(shù)是一種高溫短時處理原料的方法，原料用蒸汽加熱至180 235°C，維持一定時間后突然減壓釋放時，產(chǎn)生二次蒸汽，物料體積猛增，受機(jī)械力的 作用，固體物料結(jié)構(gòu)被破壞。富含纖維類原料經(jīng)汽爆處理后，半纖維素降解，木質(zhì)素軟化和 部分降解，纖維之間的連接強(qiáng)度降低，物料結(jié)構(gòu)膨脹變疏松，形成顯著的多孔結(jié)構(gòu)，內(nèi)部比 表面積顯著增大。喜樹果中纖維含量達(dá)50 80%，細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密，基于喜樹果的這種特 性，本發(fā)明采用汽爆技術(shù)對喜樹果進(jìn)行預(yù)處理，破壞其纖維質(zhì)結(jié)構(gòu)，克服其對有效成分提取 的屏障作用，提高溶劑提取的滲透力，使更多的喜樹堿被溶解提取，從而提高喜樹堿的提取 率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是為了解決喜樹堿現(xiàn)有提取技術(shù)中存在的提取時間長、提取率低的 問題，對原料喜樹果進(jìn)行汽爆預(yù)處理，使其形成疏松多孔的結(jié)構(gòu)，增大內(nèi)部比表面積，采用 乙醇提取喜樹堿，使胞內(nèi)更多的喜樹堿與溶劑接觸而被提取出來，從而提高其提取率。本發(fā)明的技術(shù)方案如下本發(fā)明提供的汽爆喜樹果提取及制備喜樹堿的方法，包括以下步驟1)蒸汽爆 破喜樹果用水預(yù)浸，預(yù)浸條件為室溫下加入等量水浸泡6 12h，使其含水量達(dá)40 60%，然后投入汽爆罐中，通入飽和蒸汽維持不同壓力，一定時間后泄壓釋放，收集汽爆后 物料；汽爆條件為10 15Kg/cm2維持1 IOmin ；2)收集的汽爆喜樹果采用50 90% (V/ V)乙醇50°C水浴振蕩提取喜樹堿，料液比為1 10 1 20，提取1 4h ；3)提取液離心 收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集析出物，加入體積比為1 1 4 1氯仿、甲醇混合 液萃取劑靜置萃取1 池，萃取2 3次，收集下層溶液減壓濃縮、烘干，得到喜樹堿粗品。本發(fā)明汽爆喜樹果提取及制備喜樹堿的方法，具有以下優(yōu)點(1)采用低壓蒸汽爆破處理的喜樹果與粉碎處理相比，其喜樹堿提取率高，而能耗 低，而且汽爆技術(shù)操作簡單，成本低、無污染；(2)汽爆后喜樹果采用乙醇提取喜樹堿，工藝路線簡單、溶劑用量少、提取時間短， 提取率達(dá)0. 4 1. 2%0 ；(3)汽爆與粉碎組合預(yù)處理喜樹果，其喜樹堿提取率更高。
具體實施例方式下面通過實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明。本發(fā)明實施例中使用的喜樹果購于北京仟草中藥有限公司，原產(chǎn)浙江。比較實施例1 干燥喜樹果200g粉碎至0. 9mm,加入20倍體積70% (V/V)乙醇， 50°C水浴搖床150r/min振蕩提取池。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集析 出物，加入體積比為1 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取lh，收集下層溶液減壓濃縮、 烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率為0. 341%。。比較實施例2 干燥喜樹果200g粉碎至0. 3mm,加入20倍體積70 % (V/V)乙醇， 50°C水浴搖床150r/min振蕩提取池。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集析 出物，加入體積比為1 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取lh，收集下層溶液減壓濃縮、 烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率為0. 522%。。實施例1 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐中，在水蒸汽壓力lOKg/cm2下處理IOmin ；汽爆后物料烘干，加入10倍體積70% (V/V)乙 醇，50°C水浴搖床150r/min振蕩提取4h。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集 析出物，加入體積比為1 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取lh，收集下層溶液減壓濃 縮、烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率為0. 401%。。實施例2 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力12Kg/cm2下處理8min ；汽爆后物料烘干，加入10倍70% (V/V)乙醇，50°C 水浴搖床150r/min振蕩提取4h。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集析出物， 加入體積比為1 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取lh，收集下層溶液減壓濃縮、烘干， 得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率為0. 513%。。實施例3 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力15Kg/cm2下處理6min ；處理后的物料烘干，加入10倍體積70% (V/V)乙 醇，50°C水浴搖床150r/min振蕩提取4h。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集 析出物，加入體積比為1 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取lh，收集下層溶液減壓濃 縮、烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率達(dá)0. 669%。。實施例4 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力15Kg/cm2下處理aiiin;汽爆后物料烘干，加入10倍體積70% (V/V)乙醇， 50°C水浴搖床150r/min振蕩提取4h。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，收集析 出物，加入體積比為4 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取池，收集下層溶液減壓濃縮、 烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率為0. 486%。。實施例5 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力15Kg/cm2下處理aiiin ；汽爆后物料烘干，粉碎至0. 9mm，加入20倍體積 70% (V/V)乙醇，50°C水浴搖床150r/min振蕩提取lh。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 除去乙醇，收集析出物，加入體積比為4 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取池，收集下 層溶液減壓濃縮、烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率達(dá)0. 521%。。實施例6 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力15Kg/cm2下處理aiiin ；汽爆后物料烘干，粉碎至0. 3mm，加入20倍體積 70% (V/V)乙醇，50°C水浴搖床150r/min振蕩提取lh。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 除去乙醇，收集析出物，加入體積比為4 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取池，收集下 層溶液減壓濃縮、烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率達(dá)0. 881%。。實施例7 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力15Kg/cm2下處理6min ；汽爆后物料烘干，粉碎至0. 9mm，加入20倍體積 70% (V/V)乙醇，50°C水浴搖床150r/min振蕩提取lh。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 除去乙醇，收集析出物，加入體積比為4 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取池，收集下 層溶液減壓濃縮、烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率達(dá)1.074%。。實施例8 取干燥喜樹果200g，室溫下加入等量水浸泡6 12h，然后投入汽爆罐 中，在水蒸汽壓力12Kg/cm2下處理6min ；汽爆后物料烘干，粉碎至0. 3mm，加入20倍體積 70% (V/V)乙醇，50°C水浴搖床150r/min振蕩提取lh。提取液離心收集上清液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā) 除去乙醇，收集析出物，加入體積比為4 1的氯仿、甲醇混合液萃取劑靜置萃取池，收集下 層溶液減壓濃縮、烘干，得到喜樹堿粗品。產(chǎn)品得率達(dá)1. 165%。。
權(quán)利要求
1.汽爆喜樹果提取及制備喜樹堿的方法，其特征在于采用蒸汽爆破技術(shù)預(yù)處理喜樹 果喜樹果用水預(yù)浸后投入汽爆罐中，通入飽和蒸汽維持不同壓力進(jìn)行爆破處理，然后用乙 醇提取、氯仿甲醇萃取制備喜樹堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通入飽和蒸汽使壓力達(dá)到10 15Kg/cm2 維持1 IOmin。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，喜樹果預(yù)浸條件為室溫下加入等量水浸 泡6 12h，使其含水量達(dá)40 60%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所用的乙醇濃度為50 90%(V/V)，提取 條件為料液比為1 10 1 20，50°C水浴振蕩提取1 4h。
全文摘要
本發(fā)明提供了汽爆喜樹果提取及制備喜樹堿的方法，該方法為喜樹果用水預(yù)浸后投入汽爆罐中，通入飽和蒸汽維持不同壓力，一定時間后泄壓釋放；收集汽爆后原料，用乙醇提取后氯仿甲醇萃取制備喜樹堿。該方法將汽爆技術(shù)用于喜樹果預(yù)處理，原料中細(xì)胞壁半纖維素降解率達(dá)40％，物料結(jié)構(gòu)變疏松、多孔，提高了溶劑提取時的滲透力，喜樹堿提取率達(dá)到0.401～1165‰。汽爆處理并未破壞喜樹堿的結(jié)構(gòu)和活性，而且汽爆技術(shù)操作簡單、投資成本低、無污染，其用于藥用植物有效成分提取的前處理將有廣闊的工業(yè)應(yīng)用前景。
文檔編號C07D491/22GK102093375SQ20111004703
公開日2011年6月15日 申請日期2011年2月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年2月28日
發(fā)明者王玉美, 陳洪章 申請人:中國科學(xué)院過程工程研究所