專利名稱：一種細(xì)胞色素c溶液的生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于化工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種細(xì)胞色素C溶液的生產(chǎn)工藝。
背景技術(shù)：
細(xì)胞色素c也稱細(xì)丙，是一種以鐵卟啉為輔基的呼吸酶，在生物氧化過(guò)程中，它是一個(gè)非常重要的電子傳遞體，其作用原理為在酶存在的情況下，對(duì)組織的氧化、還原有迅速的酶促作用。通常外源性細(xì)胞色素c不能進(jìn)入健康細(xì)胞，但在缺氧時(shí)，細(xì)胞膜的通透性增加，細(xì)胞色素C有可能進(jìn)入細(xì)胞及線粒體內(nèi)，增強(qiáng)細(xì)胞氧化，提高氧的利用。細(xì)胞色素c為細(xì)胞呼吸激動(dòng)劑，用作組織缺氧治療的急救和輔助用藥，如一氧化碳中毒，安眠藥中毒，也用于腦血管障礙，中風(fēng)后遺癥的治療。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種工藝簡(jiǎn)單，收率較高的細(xì)胞色素c溶液的生產(chǎn)方法。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)用該方法生產(chǎn)的細(xì)胞色素c溶液工藝簡(jiǎn)單，穩(wěn)定，成本低廉，收率達(dá)85%以上。本發(fā)明在酸水提取液采用了吸附材料A，以及對(duì)細(xì)胞色素c溶液粗品，經(jīng)離子交換樹(shù)脂處理，得優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞色素c溶液精品，可用于臨床。本發(fā)明的技術(shù)方案為一種細(xì)胞色素c溶液的生產(chǎn)方法，其工藝過(guò)程如下A)取經(jīng)獸醫(yī)檢驗(yàn)合格的哺乳動(dòng)物；B)哺乳動(dòng)物的心肌經(jīng)酸水提??；C)酸水提取液經(jīng)吸附材料A吸附后用無(wú)機(jī)鹽水溶液洗脫；D)洗脫液用無(wú)機(jī)鹽調(diào)節(jié)至比重達(dá)1. 22-1. 44 ；E)洗脫液用三氯乙酸沉淀，過(guò)濾得沉淀物；F)沉淀物用水溶解后用透析法純化，經(jīng)檢驗(yàn)合格后，得細(xì)胞色素c溶液粗品；G)細(xì)胞色素c溶液粗品，經(jīng)離子交換樹(shù)脂吸附后，用無(wú)機(jī)鹽水溶液洗脫；H)洗脫液用透析法純化，經(jīng)檢驗(yàn)合格后，得細(xì)胞色素c溶液精品，與_5°C以下保存。
具體實(shí)施例方式下面用實(shí)施例進(jìn)一步描述本發(fā)明，有利于對(duì)本發(fā)明及其優(yōu)點(diǎn)，效果更好的了解，但所述實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不是限制本發(fā)明。實(shí)施例A)取經(jīng)獸醫(yī)檢驗(yàn)合格的哺乳動(dòng)物。B)哺乳動(dòng)物的心肌10Kg，加入15Kg純化水，用2mol/L硫酸調(diào)pH4. 0，機(jī)械攪拌3 小時(shí)。靜置0. 5小時(shí)后，離心過(guò)濾，得酸水提取液約20Kg。C)酸水提取液用anol/L氨水調(diào)pH8. 0，按4%量(w/v)加吸附劑吸附樹(shù)脂，分三次攪拌吸附。將已經(jīng)吸附的吸附樹(shù)脂用純化水沖洗干凈后上柱，用硫酸銨(dl. 15)洗脫，得洗脫液。D)洗脫液用硫酸銨調(diào)節(jié)至比重達(dá)1. 22-1. 44 ；E)洗脫液按照每IOOOml加20%三氯乙酸25ml產(chǎn)生沉淀，過(guò)濾得沉淀物。F)沉淀物用水溶解后用透析袋進(jìn)行透析法純化，經(jīng)檢驗(yàn)合格后，得細(xì)胞色素c溶液粗品。G)細(xì)胞色素c溶液粗品，經(jīng)離子交換樹(shù)脂M 800吸附后，用0. 59mol/LNaCl和 90mmol/L Na2HPO4 溶液洗脫。H)洗脫液裝入透析袋，用透析法純化，經(jīng)檢驗(yàn)合格后，得細(xì)胞色素c溶液精品， 于-5°C以下保存。
權(quán)利要求
1.一種細(xì)胞色素C溶液的生產(chǎn)工藝，其特征是以哺乳動(dòng)物心制取細(xì)胞色素c溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)1所述的一種細(xì)胞色素c的生產(chǎn)方法，其特征在于，所述的哺乳動(dòng)物為豬、狗、牛、羊、馬中的一種，優(yōu)選為豬、牛。
3.根據(jù)權(quán)利要求書(shū)1或2所述的細(xì)胞色素c溶液的生產(chǎn)工藝，其特征是取哺乳動(dòng)物心臟經(jīng)酸水提取，吸附材料A吸附，酸水洗脫，鹽析，沉淀及透析法制取細(xì)胞色素c溶液粗品。 粗品經(jīng)離子交換純化，最終得到精制細(xì)胞色素c溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了以哺乳動(dòng)物心提取細(xì)胞色素c溶液的生產(chǎn)方法。將哺乳動(dòng)物心臟經(jīng)酸水提取，吸附材料吸附，酸水洗脫，鹽析，沉淀及透析法制得細(xì)胞色素c溶液粗品，粗品經(jīng)離子交換純化，最終精制得細(xì)胞色素c溶液。
文檔編號(hào)C07K1/18GK102206265SQ20111009475
公開(kāi)日2011年10月5日 申請(qǐng)日期2011年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年4月15日
發(fā)明者金榮富, 陳學(xué)鋒, 陳靜 申請(qǐng)人:安徽宏業(yè)藥業(yè)有限公司