專利名稱：一種從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是涉及一種從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法。
背景技術(shù)：
溪黃草甲素(rabdoserrinA)為對(duì)映貝殼杉烷型二萜化合物，化學(xué)名稱1，14-二羥基-7，20,19，20- 二環(huán)氧-16-貝殼杉烯_15_酮，分子式C2tlH26O5,分子量346. 42，分子結(jié)構(gòu)高純度溪黃草甲素為無色片狀結(jié)晶(氯仿-乙醇)，mp. 312 314°C，溶于甲醇、 乙醇、丙酮等，微溶于水、石油醚等。溪黃草甲素對(duì)Hela細(xì)胞具有顯著的抑制作用，具有顯著抗癌活性。其藥理活性， 廣被醫(yī)學(xué)專家關(guān)注和認(rèn)可。溪黃草為唇形科多年生草本溪黃草Rabdosia serra (Maxim. ) Hara的干燥全草。俗稱熊膽草、血風(fēng)草、黃汁草、溪溝草、香茶菜、土黃連等。溪黃草具有清熱利濕、退黃祛濕、涼血散瘀的功效，用于治療急性黃疸型肝炎、急性膽囊炎、痢疾、腸炎、跌打瘀痛等病癥。溪黃草在廣東各地臨床應(yīng)用普遍?，F(xiàn)有公開的從溪黃草中提取溪黃草甲素方法，都為實(shí)驗(yàn)室分離，不是專屬性工藝。 如金人玲等發(fā)表的“溪黃草甲素的結(jié)構(gòu)研究”，該文獻(xiàn)采用的方法為95%工業(yè)酒精回流提取，濃縮后，乙酸乙酯溶解浸膏，5%碳酸鈉溶液振提，乙酸乙酯層酸洗中性，濃縮后硅膠柱層析，氯仿-丙酮洗脫得到8個(gè)化合物，其中包括溪黃草甲素。此類方法較為繁瑣，分離過程工業(yè)“三廢”較多，而且溪黃草甲素收率低，工藝專屬性差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷，提供一種從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法，其特征在于包括以下步驟以溪黃草為原料，粉碎20-80目，加入萃取釜中，以95%乙醇為夾帶劑，采用超臨界(X)2萃取，收集萃取液，回收乙醇，得萃取物，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離萃取物，流分減壓干燥即得溪黃草甲素。所述的超臨界(X)2萃取條件為萃取溫度為55-60°C，萃取壓力為33_37MPa，分離釜I溫度為60-65°C，壓力為8-lOMPa，分離釜II溫度為50-55°C，壓力為5_6MPa，夾帶劑用量為原料的1-2倍量。所述的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統(tǒng)比例為3 (4-5) (5-6) 3。本發(fā)明中超臨界(X)2萃取時(shí)間控制在2-3小時(shí)，CO2流量控制在20_30L/h。本發(fā)明在高速逆流色譜分離萃取物時(shí)，是以溶劑上相為固定相，下相為流動(dòng)相，乙酸乙酯溶解萃取物，設(shè)備轉(zhuǎn)速控制在800-1200r/min，流動(dòng)相流速為l-3ml/min。本發(fā)明采用超臨界CO2萃取，具有提取時(shí)間短、效率高、能耗低、綠色環(huán)保的優(yōu)點(diǎn)。 解決了傳統(tǒng)提取工藝的高能耗、高污染、周期長的缺點(diǎn)。本發(fā)明采用高速逆流色譜分離溪黃草甲素，分離過程無產(chǎn)品損失，制備周期短，試劑可以重復(fù)利用，制備量大，無廢棄物產(chǎn)生，克服了傳統(tǒng)硅膠柱分離過程中樣品死吸附、工藝繁瑣、重現(xiàn)性差的技術(shù)缺陷。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 溪黃草藥材粉碎80目，取500g原料加入超臨界(X)2萃取釜中，開啟設(shè)備，設(shè)定參數(shù)萃取溫度為60°C，萃取壓力為35MPa，分離釜I溫度為65°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為50°C，壓力為5MPa。通入(X)2流體，達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2液體20L/h流量萃取，并夾帶95%乙醇200ml/h，動(dòng)態(tài)萃取3h，收集萃取液，回收乙醇，得到萃取物20g。取石油醚、乙酸乙酯、甲醇、7K，按比例為3 :5:5: 3混合，取上相注入色譜管內(nèi)做固定相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為900r/min，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為2ml/min，平衡后注入乙酸乙酯溶解的萃取物，紫外檢測器監(jiān)測，收集溪黃草甲素流分，連續(xù)分離，合并流分減壓干燥得溪黃草甲素，高效液相檢測，含量96.4%，收率87.6%。實(shí)施例2 溪黃草藥材粉碎20目，取IOOOg原料加入超臨界0)2萃取釜中，開啟設(shè)備，設(shè)定參數(shù)萃取溫度為55°C，萃取壓力為37MPa，分離釜I溫度為60°C，壓力為8MPa，分離釜II溫度為55°C，壓力為6MPa。通入(X)2流體，達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2液體25L/h流量萃取，并夾帶95 0Z0乙醇1000ml/h，動(dòng)態(tài)萃取2h，收集萃取液，回收乙醇，得到萃取物210g。取石油醚、 乙酸乙酯、甲醇、7K，按比例為3 :4:6: 3混合，取上相注入色譜管內(nèi)做固定相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為800r/min，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為3ml/min，平衡后注入用乙酸乙酯的萃取物，紫外檢測器監(jiān)測，收集溪黃草甲素流分，連續(xù)分離，合并流分減壓干燥得溪黃草甲素，高效液相檢測，含量95.2%，收率91.6%。實(shí)施例3 溪黃草藥材粉碎60目，取2000g原料加入超臨界(X)2萃取釜中，開啟設(shè)備，設(shè)定參數(shù)萃取溫度為60°C，萃取壓力為33MPa，分離釜I溫度為60°C，壓力為9MPa，分離釜II溫度為50°C，壓力為6MPa。通入(X)2流體，達(dá)到上述參數(shù)后，以(X)2液體30L/h流量萃取，并夾帶95 0Z0乙醇1000ml/h，動(dòng)態(tài)萃取3h，收集萃取液，回收乙醇，得到萃取物398g。取石油醚、 乙酸乙酯、甲醇、7K，按比例為3 :4:5: 3混合，取上相注入色譜管內(nèi)做固定相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速為1200r/min，流動(dòng)相流速調(diào)節(jié)為lml/min，平衡后注入乙酸乙酯溶解的萃取物，紫外檢測器監(jiān)測，收集溪黃草甲素流分，連續(xù)分離，合并流分減壓干燥得溪黃草甲素，高效液相檢測，含量93. 1 %，收率90. 6 %。
權(quán)利要求
1.一種從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法，其特征在于包括以下步驟以溪黃草為原料，粉碎20-80目，加入萃取釜中，以95%乙醇為夾帶劑，采用超臨界(X)2萃取，收集萃取液， 回收乙醇，得萃取物，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離萃取物，流分減壓干燥即得溪黃草甲素。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法，其特征在于所述超臨界 CO2萃取條件為萃取溫度為55-60°C，萃取壓力為33-37MPa，分離釜I溫度為60_65°C，壓力為8-lOMPa，分離釜II溫度為50_55°C，壓力為5_6MPa，夾帶劑用量為原料的1_2倍量。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法，其特征在于所述的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶劑系統(tǒng)比例為3 (4-5) (5-6) 3。
全文摘要
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種從溪黃草中提取溪黃草甲素的方法。本發(fā)明采用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜分離技術(shù)，解決了傳統(tǒng)提取工藝污染嚴(yán)重、產(chǎn)品收率低的技術(shù)缺陷，方法步驟如下以溪黃草為原料，粉碎20-80目，加入萃取釜中，以95％乙醇為夾帶劑，采用超臨CO2萃取，收集萃取物，以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜分離，流分減壓干燥即得溪黃草甲素。本方法適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D493/18GK102241688SQ201110117528
公開日2011年11月16日 申請(qǐng)日期2011年5月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年5月6日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司