專利名稱：一種香葉木素的分離純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥提取技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種香葉木素的分離純化方法。
背景技術(shù)：
香葉木素(Diosmetin)，分子式為C16H12O6 ；分子量為300. 26，CAS登錄號(hào)為 520-；34-3，熔點(diǎn)253-255°C ；主要存在于唇形科植物薄荷ife/ iAa haplocalyχ Briq.等多種植物中，結(jié)構(gòu)式為
現(xiàn)代研究表明香葉木素有抗氧化、抗感染、抗休克、抗誘變和抗變應(yīng)性特性等功效?，F(xiàn)有技術(shù)中，尚沒有香葉木素的工業(yè)化生產(chǎn)工藝報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種利于大生產(chǎn)操作、產(chǎn)品純度高的香葉木素的分離純化方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案
一種香葉木素的分離純化方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成
(1)超臨界萃取將提取過揮發(fā)油的薄荷全草投入超臨界CO2萃取釜中，萃取壓力為 20-30MPa，溫度;M-45°C，0)2流量為l_3ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間60_180min，得到萃取物；
(2)大孔樹脂吸附將萃取物用水溶解，通過大孔吸附樹脂吸附，50-65%乙醇洗脫，收集3-6倍柱體積的洗脫液，減壓回收乙醇，得到濃縮液；
(3)逆流萃取將濃縮液加酸調(diào)節(jié)pH至4-6，然后用混合溶劑進(jìn)行多級(jí)逆流萃取，混合溶劑包括第一組分和第二組分，第一組分為乙酸乙酯，第二組分為甲醇、乙醇、丙酮或水中的任何一種；
(4)結(jié)晶干燥將分段收集到的萃取液合并，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。步驟(2)中大孔吸附樹脂選自D130、NKA-2、NKA-9、XAD-7HP、ADS-17、HPD600 型大孔吸附樹脂中的一種。步驟(3)中調(diào)節(jié)pH所采用的酸為鹽酸、磷酸、草酸、硫酸中的任何一種，多級(jí)逆流萃取級(jí)數(shù)為5-15級(jí)，第一組分和第二組分的混合比為10: (1-5)。
采用本發(fā)明方法制備香葉木素，能耗小、污染小、產(chǎn)品純度高，有利于大生產(chǎn)操作。下面將結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不僅限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
取提取過揮發(fā)油的薄荷全草20kg，投入超臨界(X)2萃取釜中，萃取壓力24MPa，溫度 350C，CO2流量2mg/g生藥·π η，萃取時(shí)間lOOmin，得到萃取物，加水溶解，通過HPD600大孔吸附樹脂柱吸附，用65%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積的洗脫液，減壓回收，得到濃縮液，加草酸調(diào)PH至4. 5，用比例為10:3的乙酸乙酯-甲醇混合溶劑進(jìn)行10級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得黃色結(jié)晶4. 52g， 經(jīng)IKMSjHNMR^CMffi分析為香葉木素，HPLC法檢測(cè)，其純度為95. 7%。實(shí)施例2:
取提取過揮發(fā)油的薄荷全草20kg，投入超臨界(X)2萃取釜中，萃取壓力21MPa，溫度 400C，CO2流量3mg/g生藥· min，萃取時(shí)間150min，得到萃取物，加水溶解，通過D130大孔吸附樹脂柱吸附，用陽％乙醇洗脫，收集6倍量柱體積的洗脫液，減壓回收，得到濃縮液，加稀鹽酸調(diào)PH至5. 5，用比例為10:1的乙酸乙酯-水混合溶劑進(jìn)行8級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得黃色結(jié)晶4. 26g, 經(jīng)IR、MSjHNMR^CMffi分析為香葉木素，HPLC法檢測(cè)，其純度為96. 3%。實(shí)施例3:
取提取過揮發(fā)油的薄荷全草20kg，投入超臨界(X)2萃取釜中，萃取壓力^MPa,溫度 380C，CO2流量lmg/g生藥·π η，萃取時(shí)間90min，得到萃取物，加水溶解，通過NKA-2大孔吸附樹脂柱吸附，用60%乙醇洗脫，收集3倍量柱體積的洗脫液，減壓回收，得到濃縮液，加稀磷酸調(diào)PH至5. 0，用比例為10:5的乙酸乙酯-乙醇混合溶劑進(jìn)行5級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得黃色結(jié)晶4. 33g， 經(jīng)IR、MS、2HNMR、13CNMR分析為香葉木素，HPLC法檢測(cè)，其純度為92. 4%。實(shí)施例4:
取提取過揮發(fā)油的薄荷全草20kg，投入超臨界(X)2萃取釜中，萃取壓力23MPa，溫度 420C，CO2流量3mg/g生藥· min,萃取時(shí)間180min，得到萃取物，加水溶解，通過NKA-9大孔吸附樹脂柱吸附，用50%乙醇洗脫，收集4倍量柱體積的洗脫液，減壓回收，得到濃縮液，加稀硫酸調(diào)pH至4. 5，用比例為10 2的乙酸乙酯-丙酮混合溶劑進(jìn)行6級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得黃色結(jié)晶4. 21g， 經(jīng)IR、MSjHNMR^CMffi分析為香葉木素，HPLC法檢測(cè)，其純度為94. 5%。實(shí)施例5:
取提取過揮發(fā)油的薄荷全草20kg，投入超臨界(X)2萃取釜中，萃取壓力30MPa，溫度 36 0C，CO2流量2mg/g生藥·π η，萃取時(shí)間120min，得到萃取物，加水溶解，通過XAD-7HP大孔吸附樹脂柱吸附，用60%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積的洗脫液，減壓回收，得到濃縮液，加草酸調(diào)PH至4. 0，用比例為10:1的乙酸乙酯-甲醇混合溶劑進(jìn)行15級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得黃色結(jié)晶4. 47g，經(jīng)IR、MSjHNMR^CMffi分析為香葉木素，HPLC法檢測(cè)，其純度為93. 6%。
實(shí)施例6:
取提取過揮發(fā)油的薄荷全草20kg，投入超臨界(X)2萃取釜中，萃取壓力27MPa，溫度 450C，CO2流量lmg/g生藥· min,萃取時(shí)間60min，得到萃取物，加水溶解，通過ADS-17大孔吸附樹脂柱吸附，用65%乙醇洗脫，收集6倍量柱體積的洗脫液，減壓回收，得到濃縮液，加稀磷酸調(diào)PH至4. 5，用比例為10:2的乙酸乙酯-水混合溶劑進(jìn)行12級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得黃色結(jié)晶4. 39g， 經(jīng)IKMSjHNMR^CMffi分析為香葉木素，HPLC法檢測(cè)，其純度為95. H
權(quán)利要求
1.一種香葉木素的分離純化方法，其特征在于所述的方法由下列步驟組成(1)超臨界萃取將提取過揮發(fā)油的薄荷全草投入超臨界CO2萃取釜中，萃取壓力為 20-30MPa，溫度;M-45°C，0)2流量為l_3ml/g生藥·π η，萃取時(shí)間60_180min，得到萃取物；(2)大孔樹脂吸附將萃取物用水溶解，通過大孔吸附樹脂吸附，50-65%乙醇洗脫，收集3-6倍柱體積的洗脫液，減壓回收乙醇，得到濃縮液；(3)逆流萃取將濃縮液加酸調(diào)節(jié)pH至4-6，然后用混合溶劑進(jìn)行多級(jí)逆流萃取，混合溶劑包括第一組分和第二組分，第一組分為乙酸乙酯，第二組分為甲醇、乙醇、丙酮或水中的任何一種；(4)結(jié)晶干燥將分段收集到的萃取液合并，減壓回收溶劑，冷藏析晶，加入甲醇重結(jié)晶，分離結(jié)晶，洗滌、干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香葉木素的分離純化方法，其特征在于步驟(2)中大孔吸附樹脂選自D130、NKA-2、NKA-9、XAD-7HP、ADS-17, HPD600型大孔吸附樹脂中的一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香葉木素的分離純化方法，其特征在于步驟(3)中調(diào)節(jié)pH 所采用的酸為鹽酸、磷酸、草酸、硫酸中的任何一種，多級(jí)逆流萃取級(jí)數(shù)為5-15級(jí)，第一組分和第二組分的混合比為10: (1-5)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種香葉木素的分離純化方法，包括以下步驟以提取過揮發(fā)油的薄荷全草為原料，加入到CO2超臨界萃取罐中萃取，得到萃取物，將萃取物用水溶液，通過大孔吸附樹脂吸附，醇水溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液用比例為的混合溶劑進(jìn)行級(jí)逆流萃取，合并萃取液，減壓回收溶劑，加入結(jié)晶，干燥即得。采用本方法分離純化香葉木素，易于產(chǎn)業(yè)規(guī)?；a(chǎn)品含量高。
文檔編號(hào)C07D311/30GK102304113SQ201110187720
公開日2012年1月4日 申請(qǐng)日期2011年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2011年7月6日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司