專利名稱：一種提取純化柯里拉京的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于中藥化學領域，涉及一種提取純化柯里拉京的方法，具體地說，涉及一種采用大孔樹脂、超臨界二氧化碳流體萃取和凝膠柱層析等技術結合從葉下珠中提取純化柯里拉京的方法。
背景技術：
柯里拉京是一種逆沒食子酸鞣質，主要存在于密柑草、葉下珠、老鸛草等植物中， 分子式=C27H22Ow ；分子量634. 453，白色針晶粉末，易溶于甲醇、乙醇、AcetoruDMSO，在冷水中溶解度小。傳統(tǒng)的天然藥物應用史提示柯里拉京對慢性心血管疾病有較好的防治作用， 近年來的研究表明，柯里拉京在防治血液凝固、血栓形成、高血壓和動脈粥樣硬化等方面有一定作用，另外，柯里拉京對某些腫瘤和病毒有抑制作用，毒性也很低。葉下珠又名珍珠草，為大戟科植物葉下珠Urinaria L.干燥全草，具有清熱平肝、收斂利水、解毒消腫之功效，民間常用于治療腹瀉、下痢、尿路感染、腎炎水腫和黃疸性肝炎等疾病，其化學成分主要為黃酮類、多酚類、木脂素類、生物堿類等多種化合物。其多酚類成分是其主要活性成分，如柯里拉京corilagin、沒食子酸、鞣花酸等多酚類成分具有溶栓，抑制血栓形成，抗高血壓和抗動脈粥樣硬化的作用，解痙鎮(zhèn)痛作用，抗菌抗病毒等作用。柯里拉京的提取方法主要采用醇提或丙酮提取，純化方法主要采用ZTC樹脂柱層析、有機溶劑萃取等方法。中國專利(申請?zhí)?01010535378. 3)“一種柯里拉京的制備方法” 公開的方法是采用超臨界(X)2萃取、大孔樹脂吸附和逆流萃取等技術結合得到柯里拉京，該方法成本高、選擇性高、提率低。
發(fā)明內容
本發(fā)明的目的在于提供一種以葉下珠為原料，通過水提、大孔樹脂吸附技術、超臨界流體萃取技術、凝膠柱層析技術以及重結晶技術相結合，快速獲得高純度柯里拉京的工藝方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案實現(xiàn)的
取葉下珠藥材粉碎，用8-15倍的純水在80-100°C條件下提取，將提取液經(jīng)大孔樹脂吸附后65%-80%甲醇水溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮至小體積，濃縮液用正丁醇萃取，萃取液濃縮后用超臨界CO2萃取柯里拉京，再通過凝膠柱層析分離，用45%-60%丙酮溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，靜置析晶，重結晶即得。大孔吸附樹脂采用D101、ADS-5、H1020、LAS-7或D130型大孔吸附樹脂。超臨界(X)2萃取條件為萃取壓力20_28MPa，萃取溫度30_55°C，萃取時間2_他，解析壓力5-8MPa，溫度^-40°C，CO2流速為20_25L/h，夾帶劑可選丙酮、乙醇溶液，優(yōu)選丙酮溶液，體積百分比為50-70%，加入量為藥材量的10-20%。重結晶溶劑為異丙醇、丙二醇、乙醚、乙醇、二氯甲烷中的一種或幾種溶液混合。
本發(fā)明的優(yōu)勢在于
本發(fā)明先提取再用大孔吸附樹脂富集柯里拉京成分，再進行超臨界萃取，提取率高，雜質少，凝膠柱層析分離純化，產(chǎn)品質量好，純度高。
具體實施例方式實施例1:
稱取葉下珠藥材2kg投入提取設備中，用18kg純水，加熱至90°C，攪拌提取1小時，過濾后，再加入15kg純水加熱至90°C，攪拌提取1小時，過濾，兩次濾液合并通過預處理好的 D130大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫至無色，再用70%甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至小體積，將濃縮液用等體積量的正丁醇萃取，萃取液濃縮后輸入超臨界二氧化碳萃取釜中，在萃取溫度38°C和萃取壓力^MPa的條件下動態(tài)連續(xù)萃取3小時，解析壓力6MPa，溫度 300C，CO2流速為22L/h，夾帶劑為60%的丙酮溶液，加入量為藥材量的15%，收集淡黃色膏狀柯里拉京，將所得浸膏水溶解后上Toyopearl冊_40柱，用55%丙酮溶液洗脫，洗脫液回收丙酮，濃縮，靜置析晶，乙醚重結晶得2. 39g柯里拉京，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 3%。實施例2:
稱取葉下珠藥材2kg投入提取設備中，用^kg純水，加熱至85°C，攪拌提取1. 5小時， 過濾后，再加入20kg純水加熱至85°C，攪拌提取1小時，過濾，兩次濾液合并通過預處理好的ADS-5大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫至無色，再用80%甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至小體積，將濃縮液用等體積量的正丁醇萃取，萃取液濃縮后輸入超臨界二氧化碳萃取釜中，在萃取溫度42°C和萃取壓力21. 5MPa的條件下動態(tài)連續(xù)萃取5小時，解析壓力7MPa， 溫度36°C，CO2流速為20L/h，夾帶劑為50%的乙醇溶液，加入量為藥材量的20%，收集淡黃色膏狀柯里拉京，將所得浸膏水溶解后上MCl-gel CHP-20P柱，用50%丙酮溶液洗脫，洗脫液回收丙酮，濃縮，靜置析晶，乙醇重結晶得2. 46g柯里拉京，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 6%。實施例3:
稱取葉下珠藥材2kg投入提取設備中，用30kg純水，加熱至100°C，攪拌提取2小時，過濾后，再加入25kg純水加熱至100°C，攪拌提取2小時，過濾，兩次濾液合并通過預處理好的 DlOl大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫至無色，再用65%甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至小體積，將濃縮液用等體積量的正丁醇萃取，萃取液濃縮后輸入超臨界二氧化碳萃取釜中，在萃取溫度31°C和萃取壓力23MPa的條件下動態(tài)連續(xù)萃取2小時，解析壓力5MPa，溫度 280C，CO2流速為25L/h，夾帶劑為70%的丙酮溶液，加入量為藥材量的13%，收集淡黃色膏狀柯里拉京，將所得浸膏水溶解后上Toyopearl冊_40柱，用45%丙酮溶液洗脫，洗脫液回收丙酮，濃縮，靜置析晶，丙二醇重結晶得2. 38g柯里拉京，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 5%。實施例4:
稱取葉下珠藥材2kg投入提取設備中，用20kg純水，加熱至80°C，攪拌提取1小時，過濾后，再加入15kg純水加熱至80°C，攪拌提取0. 5小時，過濾，兩次濾液合并通過預處理好的LAS-7大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫至無色，再用75%甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至小體積，將濃縮液用等體積量的正丁醇萃取，萃取液濃縮后輸入超臨界二氧化碳萃取釜中，在萃取溫度50°C和萃取壓力24. 8MPa的條件下動態(tài)連續(xù)萃取6小時，解析壓力8MPa， 溫度35°C，CO2流速為23L/h，夾帶劑為65%的乙醇溶液，加入量為藥材量的10%，收集淡黃色膏狀柯里拉京，將所得浸膏水溶解后上MCl-gel CHP-20P柱，用60%丙酮溶液洗脫，洗脫液回收丙酮，濃縮，靜置析晶，二氯甲烷-異丙醇重結晶得2. 49g柯里拉京，經(jīng)HPLC檢測，其含量為98. 0%。
實施例5:
稱取葉下珠藥材2kg投入提取設備中，用16kg純水，加熱至95°C，攪拌提取2. 5小時， 過濾后，再加入13kg純水加熱至95°C，攪拌提取2小時，過濾，兩次濾液合并通過預處理好的H1020大孔吸附樹脂柱吸附，先用水洗脫至無色，再用80%甲醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至小體積，將濃縮液用等體積量的正丁醇萃取，萃取液濃縮后輸入超臨界二氧化碳萃取釜中，在萃取溫度53°C和萃取壓力20. 5MPa的條件下動態(tài)連續(xù)萃取4小時，解析壓力 5. 5MPa，溫度40°C，0)2流速為ML/h，夾帶劑為55%的丙酮溶液，加入量為藥材量的17%，收集淡黃色膏狀柯里拉京，將所得浸膏水溶解后上kphadex LH-20柱，用50%丙酮溶液洗脫， 洗脫液回收丙酮，濃縮，靜置析晶，二氯甲烷重結晶得2. 17g柯里拉京，經(jīng)HPLC檢測，其含量為 98. 8%ο
權利要求
1.一種提取純化柯里拉京的方法，其特征在于包括以下步驟取葉下珠藥材粉碎，用 8-15倍的純水在80-100°C條件下提取，將提取液經(jīng)大孔樹脂吸附后65%-80%甲醇水溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮至小體積，濃縮液用正丁醇萃取，萃取液濃縮后用超臨界CO2萃取柯里拉京，再通過凝膠柱層析分離，用45%-60%丙酮溶液洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮，靜置析晶，重結晶即得。
2.如權利要求1所述的一種提取純化柯里拉京的方法，其特征在于大孔吸附樹脂采用 D101、ADS-5、H1020、LAS-7 或 D130 型大孔吸附樹脂。
3.如權利要求1所述的一種提取純化柯里拉京的方法，其特征在于超臨界CO2萃取條件為萃取壓力2048MPa，萃取溫度30-55°C，萃取時間2_6h，解析壓力5_8MPa，溫度 28-40CO2流速為20-25L/h，夾帶劑可選丙酮、乙醇溶液，優(yōu)選丙酮溶液，體積百分比為 50-70%，加入量為藥材量的10-20%。
4.如權利要求1所述的一種提取純化柯里拉京的方法，其特征在于重結晶溶劑為異丙醇、丙二醇、乙醚、乙醇、二氯甲烷中的一種或幾種溶液混合。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種提取純化柯里拉京的方法，它包括葉下珠提取液經(jīng)大孔樹脂吸附、解析，解吸液濃縮經(jīng)正丁醇萃取，萃取液濃縮后用超臨界二氧化碳流體萃取得柯里拉京萃取液，萃取液再通過凝膠柱層析進一步純化，重結晶得到柯里拉京。與現(xiàn)有技術相比，該制備方法操作簡單、成本低廉、適于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H1/08GK102286031SQ20111018790
公開日2011年12月21日 申請日期2011年7月6日 優(yōu)先權日2011年7月6日
發(fā)明者劉東鋒, 郭琴 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司