專利名稱：龍眼花萃取物及用于免疫調(diào)節(jié)的應用與制備方法
技術領域：
本發(fā)明有關一種具有免疫調(diào)節(jié)功能的龍眼花萃取物。
背景技術：
根據(jù)文獻報導，未活化的T淋巴細胞在受到專一性抗原或抗-⑶3/⑶28抗體(Ab)刺激之后，T淋巴細胞開始進入活化階段，T淋巴細胞依序表現(xiàn)許多生化反應例如(I)透過TCR與Ag/MHC之間專一性的認知產(chǎn)生Signal 1，啟動了 PKC Θ的活化會啟動NF-κ B轉錄因子(transcription factor)的活化；(2)活化的NF-κ B進入細胞核中，鍵結于基因的啟動子(promoter)上,促使基因例如第二介白質(zhì)(interleukin-2 ;IL_2)進行基因表現(xiàn)；(3)此時細胞開始產(chǎn)生IL-2，并接受IL-2的刺激以促使細胞表現(xiàn)更多的IL-2 ； (4)活化的T淋巴細胞進入增生狀態(tài)[Kuby，1997 ；Podojil and Miller，2009]。在這一連串過程中，T淋巴細胞還必須接受另一股訊息傳導所調(diào)控，即來自B7/CD28的Signal 2, Signal I與Signal 2亦可調(diào)控發(fā)炎因子產(chǎn)生例如丙種干擾素(interferon-Y ；IFN- y )與甲種腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor- a ；TNF-a) [Rinc0net al. , 2000 ；Norton et al. , 1992 ；Kuby,1997]。而這些生化反應與不同時期所表現(xiàn)的細胞基因皆會影響活化的T淋巴細胞增生與后續(xù)的免疫反應發(fā)生，更是免疫調(diào)控劑開發(fā)的研究重點[Sospedra and Martin, 2005]。全世界約有5-7 %的人口摧患自體性免疫疾病(autoimmune diseases),例如全身性紅斑性狼瘡(system lupus erythematosus)、類風濕性關節(jié)炎(rheumatoidarthritis)與多發(fā)性硬化癥(multiple sclerosis)等，目前對于自體性免疫疾病的形成原因尚未完全清楚，但已知與基因或環(huán)境有關[Marrack et al. , 2001 ；Ermann andFathman, 2001 ;0，Shea et al. , 2002] 這些疾病通常可見到自體活化的(self-reactive)T和B淋巴細胞,而且產(chǎn)生細胞性免疫反應(cell-mediated immunity)及體液性免疫反應(humoral immunity)來對抗自體抗原。其中全身性紅斑性狼瘡患者體內(nèi)會產(chǎn)生過度活化增生的T淋巴細胞[Podojil and Millet, 2009]與大量的自體抗體(autoantibody),例如抗-Sm Ab 與抗-DNA Ab以攻擊細胞核，臨床癥狀主要表現(xiàn)全身性發(fā)炎反應、血管炎(vasculitis)、淋巴腺疾病(Iymphadenopathy)、免疫復合物沈積于組織以及威脅生命的腎絲球腎炎(glomerulonephritis) [Mok and Lau,2003]。在病理形成過程中，科學家發(fā)現(xiàn)過量且不受控制的T淋巴細胞產(chǎn)生大量細胞激素例如IL-2、IFN-Y與TNF-α等，會促進B淋巴細胞增生分化并進而產(chǎn)生大量自體性抗體[Horwitz et al. , 1994 ；Llorente et al., 1994],造成對自身的細胞與組織產(chǎn)生攻擊。因此，急需要能夠調(diào)節(jié)免疫的醫(yī)藥組合物，來解決上述的問題。中草藥是具有開發(fā)潛力的本土性科學研究材料，許多生物活性可由其中鑒定出來[Kuo et al. ,2003 ；Kuoetal. , 2002 ；Kuo et al. , 2000 ；Liu et al. ,2006]-。龍眼(Dimocarpus longan Lour.)花于傳統(tǒng)醫(yī)學上主要運用于治療腎炎與糖尿病[Hsieh et al.，2008]，藥材來自龍眼的雄花。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的，旨在提供一種含有一個免疫調(diào)控因子的龍眼花萃取物。在一方面，本發(fā)明有關于一種用于調(diào)節(jié)免疫的醫(yī)藥組合物，其包含一調(diào)節(jié)免疫有效量的經(jīng)分離或純化的龍眼花萃取物及一醫(yī)藥上可接受的載劑，所述龍眼花萃取物具有下列結構式
權利要求
1.一種用于調(diào)節(jié)免疫的醫(yī)藥組合物，其特征在于包含一調(diào)節(jié)免疫有效量的經(jīng)分離或純化的龍眼花萃取物及一醫(yī)藥上可接受的載劑，所述龍眼花萃取物具有下列結構式
2.根據(jù)權利要求I所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于所述龍眼花萃取物是來自龍眼花雄花。
3.根據(jù)權利要求I所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于其抑制抗-⑶3/⑶28抗體(Ab)所引起的人類T淋巴細胞活化增生。
4.根據(jù)權利要求I所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于其抑制由抗-⑶3/⑶28Ab所引起的人類T淋巴細胞中IL-2、IFN-y與TNF-α蛋白質(zhì)產(chǎn)生。
5.根據(jù)權利要求I所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于其抑制由抗-⑶3/⑶28Ab所引起的人類T淋巴細胞中IL-2、IFN-y與TNF-α基因表現(xiàn)產(chǎn)生。
6.根據(jù)權利要求I所述的醫(yī)藥組合物，其特征在于所述抑制由抗-⑶3/⑶28Ab所引起的人類T淋巴細胞中PKC Θ與NF-K B的活化。
7.一種制備包含免疫調(diào)控因子的龍眼花萃取物的方法，其特征在于包含以下步驟 (a)將龍眼花以乙醇萃取； (b)將由步驟(a)所得的萃取液以正己烷與水進行分配萃??； (C)將由步驟(b)所得的水層以乙酸乙酯及正丁醇進行分配萃取； (d)用層析管柱將由步驟(C)所得的萃取物進一步分離；以及 (e)以薄層層析檢知由步驟(d)所得的分液，并純化出M.W. 198. 17的化合物，其具有下列結構式
8.一種龍眼花萃取物在制造用于調(diào)節(jié)免疫的藥劑的用途，其特征在于所述龍眼花萃取物具有下列結構式
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于調(diào)節(jié)免疫的醫(yī)藥組合物，其包含一調(diào)節(jié)免疫有效量的經(jīng)分離或純化的龍眼花萃取物及一醫(yī)藥上可接受的載劑，所述龍眼花萃取物可抑制抗-CD3/CD28抗體(Ab)所引起的人類T淋巴細胞活化增生、由抗-CD3/CD28 Ab所引起的人類T淋巴細胞中IL-2、IFN-γ與TNF-α蛋白質(zhì)產(chǎn)生、由抗-CD3/CD28 Ab所引起的人類T淋巴細胞中IL-2、IFN-γ與TNF-α基因表現(xiàn)產(chǎn)生、及由抗-CD3/CD28 Ab所引起的人類T淋巴細胞中PKC θ與NF-κB的活化。
文檔編號C07C67/58GK102920693SQ20111022800
公開日2013年2月13日 申請日期2011年8月10日 優(yōu)先權日2011年8月10日
發(fā)明者李宗徽, 郭育綺, 吳岱锜 申請人:私立輔仁大學