專利名稱：西羅莫司粗晶的制備方法
西羅莫司粗晶的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物的制備方法，尤其涉及一種西羅莫司粗晶的制備方法。背景技術(shù)：
西羅莫司(sirolimus)又稱雷帕霉素(rapamycin)，1975年，由力口拿大Ayerst 實驗室的Vezina等人從太平洋fesler島土壤樣品中分離的吸水鏈霉菌(Str印tomyees hygroscopicus)發(fā)酵液中首次得到。西羅莫司是一種親脂性含氮36元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素， 分子式C51H79NO13,分子量914. 2，其結(jié)構(gòu)式如下1977年Morris等人首先發(fā)現(xiàn)西羅莫司具有免疫抑制作用，1989年開始把西羅莫司作為治療器官移植的排斥反應(yīng)的新藥進行使用。它是目前世界上最新的強效免疫抑制劑，它的免疫抑制活性比現(xiàn)行臨床廣泛使用的環(huán)孢素強數(shù)十倍，不但毒性低、用量小， 而且與環(huán)孢素有協(xié)同免疫抑制作用，在臨床上西羅莫司與環(huán)孢素聯(lián)合使用。與環(huán)孢素和 Π(506(他克莫司)相比，西羅莫司是一種療效好、低毒、無腎毒性的免疫抑制劑。1991年， 在酵母中發(fā)現(xiàn)了雷帕霉素的作用靶點并命名為“雷帕霉素靶點(TOR)”。其在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的唯一的同質(zhì)體后來被克隆，稱為“哺乳類動物雷帕霉素靶點(mTOR)”。現(xiàn)在雷帕霉素不但作為器官移植抗排斥藥物和治療冠狀動脈再狹窄的支架涂層在臨床上應(yīng)用，而且已經(jīng)在實驗室中被證實可抑制許多癌細胞的生長，包括橫紋肌肉瘤、神經(jīng)母細胞瘤、肺小細胞癌、 骨癌、胰臟癌、白血病癌細胞及B細胞淋巴癌等。西羅莫司具有異構(gòu)體B和異構(gòu)體C，其中異構(gòu)體B為主要活性成分，兩種異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.一種西羅莫司粗晶的制備方法，其特征在于將西羅莫司菌絲體的浸提液采用下述步驟進行操作(1)吸附將西羅莫司菌絲體的浸提液減壓濃縮成濃縮物，接著濃縮物中加入固體吸附劑，并攪拌、靜置，然后傾浙除去液體得到殘余物，其中，固體吸附劑加入量以所述浸提液的體積為標準，每升浸提液加入0. 001 0. 005kg固體吸附劑；(2)萃取加入浸提液體積的0.05 0. 5倍的有機溶劑至經(jīng)過(1)處理所得的殘余物中，并攪拌，然后過濾或離心除去固體，再將所得溶液靜置以使溶液分為水、有機溶液兩層， 并除去水層以獲得有機溶液；(3)洗滌濃縮加入飽和食鹽水至經(jīng)過( 處理所得有機溶液中，飽和食鹽水與有機溶液的體積比為0.1 1 1，對有機溶液進行洗滌，并除去水層，得到剩余物；再加無水硫酸鈉至上述剩余物中干燥3小時，然后過濾以獲得濾液，最后將濾液減壓濃縮，得黑褐色油狀物；(4)洗滌加非極性溶劑至經(jīng)過C3)處理所得的油狀物中，并攪拌、靜置，然后除去非極性溶劑以獲得殘留物，其中，非極性溶劑與油狀物的體積比為0. 5 3 1 ；(5)結(jié)晶加結(jié)晶溶劑至經(jīng)過(4)處理所得的殘留物中，并攪拌溶解，即獲得西羅莫司溶液，結(jié)晶溶劑與所述殘留物的體積比為0.5 3 1 ；接著將西羅莫司溶液在室溫下放置 2 10h，然后過濾除去液體，得到西羅莫司晶體；(6)洗晶干燥用所述結(jié)晶溶劑洗滌( 中獲得的西羅莫司晶體三次，然后將洗滌后的西羅莫司晶體置于45°C下減壓干燥4h，即得產(chǎn)品；(7)檢測采用高效液相色譜對(6)中獲得的產(chǎn)品的純度進行檢測。
2.如權(quán)利要求1所述的西羅莫司粗晶的制備方法，其特征在于所述固體吸附劑為硅藻土、硅膠中的一種或幾種；所述有機溶劑為乙酸乙酯、二氯甲烷、甲苯、乙酸丁酯、乙酸異丙酯中的一種或幾種；所述非極性溶劑為石油醚、己烷、庚烷、環(huán)己烷、戊烷中的一種或幾種；所述結(jié)晶溶劑為乙醚、甲基叔丁基醚、異丙醚、丙醚中的一種或幾種。
3.如權(quán)利要求1所述的西羅莫司粗晶的制備方法，其特征在于所述高效液相色譜的檢測條件為色譜柱為Kromasil C18柱；色譜柱規(guī)格是5 μ m、4. 6mmX 250mm ；流動相為甲醇、乙腈和水組成的混合溶液，且各組成成分的體積比為甲醇乙腈水=70 15 30 ； 檢測波長277nm ；柱溫40°C ；流速lml/min。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種西羅莫司粗晶的制備方法，包括吸附、萃取、洗滌濃縮、洗滌、結(jié)晶、洗晶干燥等步驟，即可得到西羅莫司粗晶，本發(fā)明不需要經(jīng)過柱層析等一系列繁雜工序，而是通過簡單常規(guī)的實驗操作就可得到西羅莫司粗晶，操作簡單，可進行工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明極大程度地提高了西羅莫司的純度和含量，并提高了西羅莫司中異構(gòu)體B與異構(gòu)體C的比值。目前市場上未見西羅莫司以粗晶形式存在的產(chǎn)品，采用本發(fā)明制得的西羅莫司粗晶具有方便儲存和運輸?shù)膬?yōu)點，大大便利了廣大研發(fā)人員或生產(chǎn)人員。
文檔編號C07D498/18GK102372726SQ201110350009
公開日2012年3月14日 申請日期2011年11月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月8日
發(fā)明者余輝, 楊國新, 程元榮, 金東偉, 陳夏琴, 陳有鐘, 黃捷 申請人:福建省微生物研究所