專利名稱：一種采用d150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥生產(chǎn)中分離純化羥鈷胺素的方法，尤其涉及一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法。
背景技術：
醫(yī)藥生產(chǎn)中，羥鈷胺素主要用于治療維生素B12缺乏癥；與氰鈷胺素相比，羥鈷胺素在人體中作用長效。因為羥鈷胺素分子中的羥基易與氰離子置換，羥鈷胺素也可用來治療氰化物中毒。羥鈷胺素的傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法是化學合成法，也可用氰鈷胺素溶液在光反應器中反應，其氰基被羥基取代而成。但氰鈷胺素性質較穩(wěn)定，反應轉化率較低，一般只有50 -70 %， 產(chǎn)物分離難度大，提純困難，而且若產(chǎn)物分離不及時，還會發(fā)生逆反應及衍生化反應。目前，用大孔樹脂作為吸附劑的研究已經(jīng)有了較深入的發(fā)展，采用大孔樹脂吸附的方法來提取和精制有機化合物已經(jīng)成為近年來研究的熱點。與傳統(tǒng)的純化分離方法相比，大孔樹脂吸附的方法操作簡單，產(chǎn)品質量較穩(wěn)定；樹脂可以再生重復利用。大孔樹脂的吸附作用不僅同樹脂的物理與化學結構有關，而且與吸附質的性質、介質的性質和操作條件等諸多因素有關。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是針對上述存在問題，提供一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，該方法操作簡便安全，分離純化過程可實現(xiàn)連續(xù)運轉，且能低耗、選擇性好、產(chǎn)品純度高，可降低羥鈷胺素的生產(chǎn)成本；大孔樹脂選擇性好，性能穩(wěn)定，可重復利用。本發(fā)明的技術方案
一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，從含有羥鈷胺素和氰鈷胺素的反應液中分離純化羥鈷胺素，包括如下步驟
1)通過氰鈷胺素反應制備含有羥鈷胺素的反應液，在得到的反應液中加入丙酮，得到丙酮-反應液混合溶液；
2)將上述丙酮-反應液混合溶液，連續(xù)通過大孔樹脂柱進行吸附分離，使目標成分吸附在大孔樹脂柱中，直至流出液中開始檢測出羥鈷胺素為止；
3)用丙酮水溶液連續(xù)通入大孔樹脂柱進行淋洗；
4)用洗脫劑連續(xù)通入大孔樹脂柱進行洗脫，收集流出液，含有羥鈷胺素的流出液可直接進行結晶工序。所述含有羥鈷胺素的反應液中羥鈷胺素的質量濃度為500-2000 mg·!/1，丙酮-反應液混合溶液中丙酮的體積百分比為30-80 %。所述大孔樹脂為H型D150大孔吸附樹脂，大孔樹脂柱的容積為2-1000mL。所述丙酮-反應液混合溶液在大孔樹脂柱中的流速為1. 0 -5. 0 BV · h—1，吸附過程在5-45 ！下進行。
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所述丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為30-80%，淋洗大孔樹脂柱的流速為 0. 5 BV · IT1 3. 0 BV · 1Γ1，用量為 2 BV 5 BV0所述洗脫劑為含無水醋酸鈉和碳酸氫鈉的丙酮水溶液，丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為30-80%，每100 mL丙酮水溶液中含有無水醋酸鈉2.0 -6.0 g或碳酸氫鈉1. 0-6. 0 g，洗脫劑在樹脂柱中的流速為0. 5 -3. 0 BV · h—1，用量為1_5 BV，洗脫過程在 5 0C、5 ！下進行。本發(fā)明的優(yōu)點是操作簡便安全，分離純化過程可實現(xiàn)連續(xù)運轉，且能低耗、選擇性好、產(chǎn)品純度高，洗脫后的流出液中含羥鈷胺素的濃度大于5. OX IO4 mg化―1，羥鈷胺素相對含量大于95%，且無需濃縮，即可直接進行結晶工序，可明顯地降低羥鈷胺素的生產(chǎn)成本； 大孔樹脂選擇性好，性能穩(wěn)定，可重復利用。
具體實施例方式下面結合實施例說明本發(fā)明。實施例1
一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，從含有羥鈷胺素和氰鈷胺素的反應液中分離純化羥鈷胺素，包括如下步驟
1)通過氰鈷胺素反應制備含有羥鈷胺素的反應液，含有羥鈷胺素的反應液中羥鈷胺素的質量濃度為1000 mg · L—1，在得到的反應液中加入丙酮，得到丙酮-反應液混合溶液，其中丙酮的體積百分比為50 %；
2)將上述丙酮-反應液混合溶液，連續(xù)通過H型D150大孔樹脂柱進行吸附分離，使目標成分吸附在大孔樹脂柱中，丙酮-反應液混合溶液在大孔樹脂柱中的流速為3. 0 BV -r1, 吸附過程在25 °C下進行，直至流出液中開始檢測出羥鈷胺素為止；
3)用丙酮水溶液連續(xù)通入大孔樹脂柱進行淋洗，在25°C下，用體積百分比濃度為50 % 的丙酮-水溶液淋洗大孔樹脂柱，流速為2. 0 BV · h—1，用量為3 BV ；
4)用洗脫劑連續(xù)通過樹脂柱進行洗脫，洗脫劑為含無水醋酸鈉和碳酸氫鈉的丙酮水溶液，丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為60%，每100 mL丙酮水溶液中含有無水醋酸鈉 3.0 g，洗脫劑在樹脂柱中的流速為1.0 BV化―1，用量為2 BV，收集流出液，含有羥鈷胺素的該流出液可直接進行結晶工序。將氰鈷胺素反應液與該實施例收集的流出液分別做高效液相色譜檢測，液相色譜檢測條件采用2000年版中華人民共和國藥典中規(guī)定的氰鈷胺素的檢測條件。用氰鈷胺素和羥鈷胺素標準品做出氰鈷胺素和羥鈷胺素的標準曲線，根據(jù)標準曲線與液相譜圖分析數(shù)據(jù)計算氰鈷胺素反應液與該實施例收集的流出液中氰鈷胺素和羥鈷胺素的相對含量。羥鈷胺素含量從原反應液的72. 1 %提高到流出液的98. 9 %，而氰鈷胺素含量從原反應液的 27. 9%降低到流出液的1. 1%。實施例2:
一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，從含有羥鈷胺素和氰鈷胺素的反應液中分離純化羥鈷胺素，包括如下步驟
1)通過氰鈷胺素反應制備含有羥鈷胺素的反應液，含有羥鈷胺素的反應液中羥鈷胺素的質量濃度為500 mg · L—1，在得到的反應液中加入丙酮，得到丙酮-反應液混合溶液，其中丙酮的體積百分比為50 %；
2)將上述丙酮-反應液混合溶液，連續(xù)通過H型D150大孔樹脂柱進行吸附分離，使目標成分吸附在大孔樹脂柱中，丙酮-反應液混合溶液在大孔樹脂柱中的流速為5. 0 BV -r1, 吸附過程在25 °C下進行，直至流出液中開始檢測出羥鈷胺素為止；
3)用丙酮水溶液連續(xù)通入大孔樹脂柱進行淋洗，在25°C下，用體積百分比濃度為50 % 的丙酮-水溶液淋洗大孔樹脂柱，流速為2. 0 BV · h—1，用量為3 BV ；
4)用洗脫劑連續(xù)通過樹脂柱進行洗脫，洗脫劑為含無水醋酸鈉和碳酸氫鈉的丙酮水溶液，丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為60%，每100 mL丙酮水溶液中含有碳酸氫鈉3. 0 g，洗脫劑在樹脂柱中的流速為0.5 8￥化_1，用量為1 BV，收集流出液，含有羥鈷胺素的該流出液可直接進行結晶工序。氰鈷胺素反應液與該實施例收集的流出液分別做高效液相色譜檢測，檢測方法同實施例1，根據(jù)標準曲線與液相譜圖分析數(shù)據(jù)計算氰鈷胺素反應液與該實施例收集的流出液中氰鈷胺素和羥鈷胺素的相對含量，羥鈷胺素含量從原來的71. 5 %提高到96. 1 %，而氰鈷胺素含量從原來的28. 5%降低到3. 9%。實施例3:
一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，從含有羥鈷胺素和氰鈷胺素的反應液中分離純化羥鈷胺素，包括如下步驟
1)通過氰鈷胺素反應制備含有羥鈷胺素的反應液，含有羥鈷胺素的反應液中羥鈷胺素的質量濃度為2000 mg · L—1，在得到的反應液中加入丙酮，得到丙酮-反應液混合溶液，其中丙酮的體積百分比為50 %；
2)將上述丙酮-反應液混合溶液，連續(xù)通過H型D150大孔樹脂柱進行吸附分離，使目標成分吸附在大孔樹脂柱中，丙酮-反應液混合溶液在大孔樹脂柱中的流速為1. 0 BV -r1, 吸附過程在25 °C下進行，直至流出液中開始檢測出羥鈷胺素為止；
3)用丙酮水溶液連續(xù)通入大孔樹脂柱進行淋洗，在25°C下，用體積百分比濃度為50 % 的丙酮-水溶液淋洗大孔樹脂柱，流速為2. 0 BV · h—1，用量為3 BV ；
4)用洗脫劑連續(xù)通過樹脂柱進行洗脫，洗脫劑為含無水醋酸鈉和碳酸氫鈉的丙酮水溶液，丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為60%，每100 mL丙酮水溶液中含有無水醋酸鈉 5.0 g，洗脫劑在樹脂柱中的流速為3.0 BV化―1，用量為5 BV，收集流出液，含有羥鈷胺素的該流出液可直接進行結晶工序。氰鈷胺素反應液與該實施例收集的流出液分別做高效液相色譜檢測，檢測方法同實施例1，根據(jù)標準曲線與液相譜圖分析數(shù)據(jù)計算氰鈷胺素反應液與該實施例收集的流出液中氰鈷胺素和羥鈷胺素的相對含量，羥鈷胺素含量從原來的70. 5 %提高到96.0 %，而氰鈷胺素含量從原來的29. 5%降低到4. 0%。
權利要求
1.一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，其特征在于從含有羥鈷胺素和氰鈷胺素的反應液中分離純化羥鈷胺素，包括如下步驟1)通過氰鈷胺素反應制備含有羥鈷胺素的反應液，在得到的反應液中加入丙酮，得到丙酮-反應液混合溶液；2)將上述丙酮-反應液混合溶液，連續(xù)通過大孔樹脂柱進行吸附分離，使目標成分吸附在大孔樹脂柱中，直至流出液中開始檢測出羥鈷胺素為止；3)用丙酮水溶液連續(xù)通入大孔樹脂柱進行淋洗；4)用洗脫劑連續(xù)通入大孔樹脂柱進行洗脫，收集流出液，含有羥鈷胺素的流出液可直接進行結晶工序。
2.根據(jù)權利要求1所述采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，其特征在于所述含有羥鈷胺素的反應液中羥鈷胺素的質量濃度為500-2000 mg · L—1，丙酮-反應液混合溶液中丙酮的體積百分比為30-80 %。
3.根據(jù)權利要求1所述采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，其特征在于所述大孔樹脂為H型D150大孔吸附樹脂，大孔樹脂柱的容積為2-1000mL。
4.根據(jù)權利要求1所述采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，其特征在于所述丙酮-反應液混合溶液在大孔樹脂柱中的流速為1. 0 -5. 0 BV -^1,吸附過程在5-45 °C 下進行。
5.根據(jù)權利要求1所述采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，其特征在于所述丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為30-80%，淋洗大孔樹脂柱的流速為0. 5 BV · IT1 3. 0 BV · h—1，用量為 2 BV 5 BV0
6.根據(jù)權利要求1所述采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，其特征在于所述洗脫劑為含無水醋酸鈉和碳酸氫鈉的丙酮水溶液，丙酮水溶液中丙酮的體積體積百分比為30-80%，每100 mL丙酮水溶液中含有無水醋酸鈉2. 0 -6. 0 g或碳酸氫鈉1. 0-6. 0 g，洗脫劑在樹脂柱中的流速為0.5 -3.0 BV.tT1，用量為1-5 BV，洗脫過程在5°C、5 °C下進行。
全文摘要
一種采用D150大孔樹脂分離純化羥鈷胺素的方法，步驟如下1)通過氰鈷胺素反應制備含有羥鈷胺素的反應液，加入丙酮；2)將上述混合溶液，連續(xù)通過大孔樹脂柱進行吸附分離，使目標成分吸附在大孔樹脂柱中，直至流出液中開始檢測出羥鈷胺素為止；3)依次用丙酮水溶液和洗脫劑分別連續(xù)通入大孔樹脂柱進行淋洗和洗脫，收集流出液，含有羥鈷胺素的流出液可直接進行結晶工序。本發(fā)明的優(yōu)點是操作簡便安全，分離純化過程可實現(xiàn)連續(xù)運轉，且能低耗、選擇性好、產(chǎn)品純度高，洗脫后的流出液中羥鈷胺素相對含量大于95%，且無需濃縮，即可直接進行結晶工序，可明顯地降低羥鈷胺素的生產(chǎn)成本；大孔樹脂選擇性好，性能穩(wěn)定，可重復利用。
文檔編號C07H1/06GK102516340SQ20111035911
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月14日 優(yōu)先權日2011年11月14日
發(fā)明者張存存, 梁寶臣, 陳慧 申請人:天津理工大學