專利名稱：從馬纓丹中提取分離β-欖香烯的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于植物提取領(lǐng)域，具體涉及從植物馬纓丹中提取分離β-欖香烯的方法。馬纓丹(Lantana camara Lirm.)，別名五色梅、山大丹、臭牡丹、殺蟲花、毛神花、 臭草、五色花、穿墻風等，為馬鞭草科馬纓丹屬植物。該植物在我國云南、廣西、四川等地分布廣泛，資源極為豐富，屬于熱帶、亞熱帶入侵雜草植物，給當?shù)剞r(nóng)牧業(yè)生產(chǎn)造成極大危害， 對當?shù)厣鷳B(tài)安全造成極大威脅。β-欖香烯，拉丁名為β-Elemenum，英文名為β-elemene，化學名為(1S，2S， 4R) 1-甲基-1-乙烯基-2，4- 二異丙烯基環(huán)己烷。結(jié)構(gòu)式如下β-欖香烯為我國通過“七五”、“八五”、“九五”等一系列國家科技攻關(guān)計劃項目， 是從傳統(tǒng)中藥中自主研發(fā)出的抗腫瘤新藥，已應(yīng)用于臨床，并被列入國家基本藥物和全國醫(yī)保用藥目錄。臨床應(yīng)用表明，欖香烯不僅具有很強的殺滅腫瘤細胞和抑制腫瘤生長作用，還可以通過激活免疫系統(tǒng)使機體獲得明顯的免疫保護效應(yīng)，具有抗癌譜廣、高效、無肝腎損害、無骨髓抑制、副作用少等特點，是人類今后一個時期內(nèi)治療腫瘤的首選藥物，國內(nèi)外市場需求量大。目前，欖香烯主要依賴于從中藥莪術(shù)、沒藥、香茅、一枝黃花中提取， 尚未發(fā)現(xiàn)有從紫莖澤蘭中提取分離得到欖香烯的報道。由于中藥莪術(shù)、沒藥、香茅、一枝黃花均為中藥，成本相對較高，并且其中欖香烯的含量不高，提取純化的成本較高， 故造成該藥的價格極為昂貴，嚴重妨礙了該藥的推廣應(yīng)用。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)馬纓丹中欖香烯含量和中藥莪術(shù)、沒藥、香茅相當，而遠高于一枝黃花，但馬纓丹為入侵雜草植物，資源豐富，其原料成本遠比這些植物低。故本發(fā)明欲提供一種從馬纓丹中有效提取欖香烯的方法，為大幅度降低欖香烯的生產(chǎn)成本、以及開發(fā)、利用、治理馬纓丹這種世界性惡性雜草植物開辟了新的途徑。
權(quán)利要求
1.從馬纓丹中提取分離β-欖香烯的方法，其特征在于步驟如下Α、原料準備主要以馬纓丹的莖、葉中的至少一種或其混合為原料，鮮品打漿或干燥粉碎；B、揮發(fā)油提取從步驟A所得原料中提取得到揮發(fā)油；C、柱層析將步驟B得到的揮發(fā)油進行柱層析，收集洗脫液，除去洗脫液中的溶劑，得到β-欖香烯粗品。
2.從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于步驟如下Α、原料準備以馬纓丹的莖、葉中的至少一種或其混合為原料，鮮品打漿或干燥粉碎；B、揮發(fā)油提取從步驟A所得原料中提取得到揮發(fā)油；C、柱層析將步驟B得到的揮發(fā)油進行柱層析，收集洗脫液，除去洗脫液中的溶劑，得到β“欖香烯粗品；D、精制將步驟B得到的揮發(fā)油或步驟C得到的β-欖香烯粗品，采用分子蒸餾或制備型高效液相色譜系統(tǒng)進行精制獲得β“欖香烯精制品。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于 步驟B采用水蒸氣蒸餾提取揮發(fā)油時，方法如下(1)經(jīng)步驟A處理的原料進行常壓蒸餾，得到餾出液；(2)在餾出液中加入沸點小于60°C的沸點小于60°C的非極性有機溶劑，萃取，收集上層有機相，除去上層有機相中的有機溶劑，即得揮發(fā)油；蒸餾時優(yōu)選以水為主要溶劑，溶劑系統(tǒng)中加入提高溶劑系統(tǒng)沸點和防止皂化起泡，爆沸的材料。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于 步驟B采用浸漬法提取揮發(fā)油時，方法如下(1)經(jīng)步驟A處理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一種或其任意比例混合的有機溶劑浸提、過濾，得浸提液；(2)浸提液除去溶劑后加入濃度20-80%ν/ν的乙醇，加入沸點小于60°C的沸點小于 60°C的非極性有機溶劑萃取，收集上層有機相，除去上層有機相中的有機溶劑，即得揮發(fā)油。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于 步驟B采用連續(xù)逆流提取法提取揮發(fā)油時，方法如下(1)經(jīng)步驟A處理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一種或其任意比例混合的有機溶劑連續(xù)逆流提取，得提取液；(2)去除提取液中的溶劑后加入濃度20-80% ν/ν的乙醇，加入沸點小于600C的沸點小于60°C的非極性有機溶劑萃取，收集上層有機相，除去上層有機相中的有機溶劑，即得揮發(fā)油。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于 步驟B采用微波萃取法提取揮發(fā)油時，方法如下(1)經(jīng)步驟A處理的原料加入丙酮、石油醚或甲醇中的至少一種或其任意比例混合的有機溶劑，在微波萃取裝置中，采用功率300-800W萃取300-800S，得提取液；(2)提取液去除溶劑后加入濃度20-80%ν/ν的乙醇，加入沸點小于60°C的非極性有機溶劑萃取，收集上層有機相，除去上層有機相中的有機溶劑，即得揮發(fā)油。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于 步驟B采用超臨界萃取法提取揮發(fā)油時，方法如下(1)經(jīng)步驟A處理的原料，用超臨界C02流體萃取器進行萃取，萃取壓力20-30MPa，萃取溫度30-50°C，萃取時間1. 5-3h，得萃取產(chǎn)物；(2)萃取產(chǎn)物中加入濃度20-80%ν/ν的乙醇，加入沸點小于60°C的非極性有機溶劑萃取，收集上層有機相，除去上層有機相中的有機溶劑，即得揮發(fā)油。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于 步驟C中柱層析采用如下方法分離純化方法1 將步驟B得到的揮發(fā)油上大孔樹脂層析柱，用水、甲醇、乙醇、丙酮中的至少一種或其任意比例混合的溶劑洗脫，流速為1-4%柱體積/min，收集含欖香烯的洗脫液， 去除溶劑，加入濃度20-80% ν/ν的乙醇后，用沸點小于60°C的非極性有機溶劑萃取，收集上層有機相，除去上層有機相中的有機溶劑，即得欖香烯粗品；或采用方法2 將步驟B得到的揮發(fā)油上硅膠層析柱或銀離子硅膠層析柱，用石油醚洗脫，流速為1-4%柱體積/min，收集含欖香烯的洗脫液，除去溶劑，得到欖香烯粗品。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從馬纓丹中提取分離欖香烯的方法，其特征在于當步驟D采用分子蒸餾法時，方法如下將步驟B得到的揮發(fā)油或步驟C得到的欖香烯粗品進行分子蒸餾，收集欖香烯達到目標含量的餾出液，即得欖香烯精制品。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的β-欖香烯精制方法，其特征在于當步驟D采用高效液相色譜系統(tǒng)制備法時，方法如下將步驟B得到的揮發(fā)油或步驟C得到的β-欖香烯粗品通過制備型高效液相色譜系統(tǒng)進行分離，收集β _欖香烯達到目標含量的流出液，除去流出液中的溶劑即得欖香烯精制品。
全文摘要
本發(fā)明屬于植物提取領(lǐng)域，目的是提供一種利用惡性雜草植物馬纓丹為原料，從中提取分離β-欖香烯的方法。本發(fā)明方法如下A、原料準備以馬纓丹的莖、葉為原料，鮮品打漿或干燥粉碎；B、揮發(fā)油提取從步驟A所得原料中得到揮發(fā)油；C、柱層析將步驟B得到的揮發(fā)油進行柱層析，收集洗脫液，除去洗脫液中的溶劑，得到β-欖香烯粗品；D、精制將步驟B得到的揮發(fā)油或步驟C得到的粗品，采用分子蒸餾或制備型高效液相色譜系統(tǒng)進行精制獲得高純度的β-欖香烯。本發(fā)明提取所得β-欖香烯產(chǎn)品純度高，產(chǎn)率高，成本低，為馬纓丹開發(fā)利用和治理以及獲得β-欖香烯提供一種全新的、廉價的、有效的途徑。
文檔編號C07C7/10GK102432420SQ20111045753
公開日2012年5月2日 申請日期2011年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月31日
發(fā)明者任一兵, 劉文權(quán), 李勇, 趙牧, 閻妍, 韋會平 申請人:攀枝花學院