專利名稱：鐵與麥芽糖酸的新型低分子量配合物、其在治療貧血癥狀中用于肌肉或皮下給藥的應(yīng)用 ...的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在由鐵缺乏引起的貧血癥狀的治療中能夠腸胃外給藥，優(yōu)選肌肉或皮下給藥的鐵與麥芽糖酸的新型低分子量配合物以及適于該用途的新型藥劑 組合物。
背景技術(shù)：
鐵是人體的生命機(jī)能生長、發(fā)育以及維持的基本元素之一。本質(zhì)上，鐵用于血紅素的合成且在紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和紅細(xì)胞壓積值上具有積極的影響。身體內(nèi)鐵缺乏會(huì)引起在所有年齡段的患者中經(jīng)常發(fā)生的貧血癥狀、失調(diào)。鐵缺乏也可口服治療，盡管由于三價(jià)鐵的適度吸收或嚴(yán)重的副作用使得該方法通常僅帶來部分成功(Blood, 1955,1035-45" Acute intestinal IronIntoxication I "和Blood, 1955,1046-51" Acute intestinal Iron Intoxication II");這些效果隨著例如硫酸亞鐵、硫酸亞鐵銨、葡萄糖酸鐵、琥珀酸亞鐵、富馬酸亞鐵、山梨醇-檸檬酸-鐵配合物、硫酸鐵、琥珀酸鐵、富馬酸鐵、草酸鐵銨等二價(jià)鐵鹽或三價(jià)鐵鹽的給藥而發(fā)生。鐵鹽口服給藥，尤其是對于持續(xù)期間或大劑量下的鐵鹽口服給藥是難以行得通的，這是由于與二價(jià)鐵鹽的胃部耐受性相關(guān)的風(fēng)險(xiǎn)以及由于所述鹽的高吸收量帶來的過量用藥的風(fēng)險(xiǎn)；代替地，對于三價(jià)鐵鹽，具有耐受性和低吸收的問題。因此，鐵的口服給藥是難以控制的，盡管相比于腸胃外給藥尤其是靜脈給藥，口服給藥在理論上是簡單且便宜的。因此，靜脈腸胃外方法盡管具有給藥問題且通常在醫(yī)院或日托醫(yī)院中使用，但由于吸收的確定性和證明的有效性，仍然是優(yōu)選的。目前，在實(shí)際應(yīng)用中，醫(yī)生考慮藥物制劑在化學(xué)、物理以及藥物性質(zhì)的不同，可自行使用市場上的眾多制劑。依照完全基于化學(xué)性質(zhì)(A. Muller, Arzneim. Forsch. ,24(6),880883(1974))的傳統(tǒng)分類，所有抗貧血療法被分為四個(gè)基本組鐵鹽、低分子量的鐵螯合物、低分子量的夾層配合物以及氫氧化鐵與糖類的多核配合物。在由鐵缺乏弓I起的貧血的治療中，后者即基于氫氧化鐵的多核配合物的腸胃外制劑被證實(shí)是最有效的。對于這些配合物的給藥，最普遍的腸胃外方式是靜脈方法(iv)。對于這種類型的給藥，制劑必須具有一些特定的化學(xué)-物理以及生物特性，例如與配合物的類型及其化學(xué)穩(wěn)定性相關(guān)的良好的鐵生物利用率。此外，必須保證沒有局部或全身的副作用，例如過敏性休克，或與源自糖分解的雜質(zhì)、配合物的分子量以及化合物中含有的游離鐵有關(guān)的肝臟毒性。相應(yīng)地，配合物的化學(xué)-物理特性與所使用的糖的類型、配合物中結(jié)合的鐵的含量以及分子量緊密相關(guān)。所有這些特性也直接影響配合物的穩(wěn)定性和生物利用率。在最廣泛的已授權(quán)用于靜脈給藥的鐵與糖類的配合物中，例如市售的商標(biāo)為Dexfemim 的高分子量(約265kD)的右旋糖酐鐵，市售的商標(biāo)為Cos mofer 知Pharmacosmos 的低分子量(約i65kD)的右旋糖酐鐵,分子量低于50kD的葡萄糖酸鐵并且市售的商標(biāo)為Ferleeft·，分子量包括在34 60kD之間的蔗糖鐵并且市售的商標(biāo)為Venofer 以及在歐洲已知的為Ferinject 和在美國為Injectafer 的分子量小于IOOkD的羧基麥芽糊精鐵，然而，其仍然在被FDA批準(zhǔn)的過程中ο W02007/081744中公開了Ferinject /InjectaferTM的活性成分即分子量在100000和350000道爾頓之間，尤其是150000道爾頓的三價(jià)鐵與活化的麥芽糊精(“VIT-45”)之間的多核配合物，及其靜脈給藥和肌肉給藥的應(yīng)用。需要注意的是，盡管事實(shí)上VIT-45被US AN理事會(huì)(為新藥物分配普通名字的美國國家機(jī)構(gòu)，類似于通過WHO發(fā)布的國際非專有名稱的“INN” )稱為“羧基麥芽糊精鐵”參見http://www. ama-assn. org/amal/pub/upload/mm/365/ferric_carboxymaltos. pdf,事實(shí)上，從化學(xué)觀點(diǎn)上看，該定義是不合適的，因?yàn)閂IT-45從5 20DE的純麥芽糊精得到，或從5 40DE的麥芽糊精的混合物得到，然而麥芽糖是二糖，因此從定義上說為50DE。因此VIT-45最適合的名稱將是鐵羧基麥芽糊精。盡管這從醫(yī)學(xué)角度來說，內(nèi)容非常廣泛，仍然需要改進(jìn)，這是由于根據(jù)Gasche等人的 Inflamm. Bowel Dis. 13 (12) 1545-1551 (12/2007)，在任何情況下，所有這些制劑具有特定的特色以及限制(也可參看Geisser等人Arzneimittelforschung 42,Nr. 12(1992) 1439-1452)。從臨床角度來說，已存的產(chǎn)品可分為下列種類I)鐵-葡萄糖酸鹽在一些國家的靜脈給藥和/或口服給藥。這是基于糖-鐵鍵的強(qiáng)度歸為類型III的配合物，該類型被定義為易分解并且較弱，且因此在4 6小時(shí)內(nèi)鐵完全釋放。2)鐵-糖酸鹽僅在10. 5 11的pH下靜脈給藥。由于該配合物比先前的配合物要更穩(wěn)定，該配合物被歸為類型II。給藥后的8 12小時(shí)內(nèi)鐵完全釋放。 3)鐵-多聚麥芽糖靜脈給藥或肌肉給藥。由于鐵-麥芽糊精鍵的特別穩(wěn)定性，該配合物被歸為類型I。因此，在給藥后36小時(shí)鐵釋放，且因此其不具有即時(shí)的生物利用率。4)鐵-右旋糖酐靜脈給藥。由于鐵-右旋糖酐鍵的顯著穩(wěn)定性被歸為類型I，其嚴(yán)重影響了鐵的釋放，使得在給藥后72 96小時(shí)內(nèi)發(fā)生鐵釋放。在任何情況下，記住上述的藥品中的之一是有用的，在目前的治療中，主要使用的制劑仍然是歷史上舊的種類，即鐵-糖酸鹽和鐵-右旋糖酐，即便兩者因?yàn)槎拘远哂邢喈?dāng)大的風(fēng)險(xiǎn)，該毒性主要由對右旋糖酐的過敏型的不良反應(yīng)引起(Hamstra等人 〃 Intravenous Iron Dextran in Clinical Medicine " JAMA,1980,243,171726-1732)，以及由于不穩(wěn)定的鐵和雜質(zhì)的存在而對于蔗糖鐵的急性毒性的不良反應(yīng)引起(Zager等人，"Parenteral iron formulations A comparativetoxicologic analysisand mechanisms of cell injury. " Am. J. Kid. Dis. ,2002,40,1,90-103)。應(yīng)當(dāng)注意的是，具有生理學(xué)可接受的pH值的溶液的產(chǎn)品的肌肉施藥(通過注入或注射)由于副作用所帶來的高風(fēng)險(xiǎn)而只適用于醫(yī)院使用。對于Fcrin.jc'dK: (VIT-45)，信息手冊(授權(quán)人Syner-Med出版并作為AIM(授權(quán)經(jīng)銷商)Vifor France SA所有者的標(biāo)志)指示僅可用靜脈注射的方式，并明確地規(guī)定不允許肌肉給藥的方式，這與在WO 2007/081744中所描述的情況相矛盾。因此，重要的是，注意到目前授權(quán)用于肌肉給藥的藥品非常少，且這些藥品通常由于配合物的本質(zhì)特性或由于肌肉給藥的類型例如注入或團(tuán)注(bolusinjection)而產(chǎn)生重大的副作用。此外，在申請人的知識(shí)范圍內(nèi)，至今為止市場上沒有授權(quán)用于皮下給藥的藥品。這就導(dǎo)致在由鐵缺乏引起的貧血癥狀的治療中，需要具有可用的允許簡單給藥，即肌肉給藥和/或也可選地皮下給藥并還允許家庭使用而不僅是醫(yī)院使用的新型活性成
分/產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
目前，本申請人驚奇地發(fā)現(xiàn)，通過鐵與麥芽糖酸的新型低分子量配合物可實(shí)現(xiàn)在 下文中將變得更明顯的本目的以及這些和其他目的，所述配合物的特征在于，分子量(MW)在10000和30000Da之間，多分散性為I. O I. 8以及鐵含量(w/w)在25wt%^P 40wt%^間。本發(fā)明的其他方面是包括適用于肌肉給藥，優(yōu)選皮下給藥的新型配合物的新型藥劑配方的開發(fā)。


圖I繪出了根據(jù)本發(fā)明的配合物(參見實(shí)例I. 5)的鐵還原動(dòng)力學(xué)；圖2繪出了FcrinjccUi:的鐵還原動(dòng)力學(xué)；圖3繪出了根據(jù)本發(fā)明的配合物(參見實(shí)例I. 5)的1H NMR譜圖；圖4 繪出了FcHnjecdil的 1H NMR 譜圖；圖5繪出了根據(jù)本發(fā)明的配合物(參見實(shí)例I. 5)的13C NMR譜圖；圖6 繪出了FerinjeetD的 13C NMR 譜圖；圖7為根據(jù)本發(fā)明的配合物(參見實(shí)例I. 5)的HPLC(GPC)層析圖；圖8 為Ferinject 的 HPLC (GPC)層析圖；圖9示出了通過肌肉團(tuán)注和皮下團(tuán)注對豬給藥的根據(jù)本發(fā)明的配合物(參見實(shí)例1.3)的吸收而產(chǎn)生在豬血漿中的總鐵含量；圖10示出了通過肌肉團(tuán)注和皮下團(tuán)注對豬給藥的根據(jù)本發(fā)明的配合物(參見實(shí)例I. 3)的吸收而產(chǎn)生在豬血漿中的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合的鐵含量。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明公開的鐵和麥芽糖酸的配合物用于貧血癥即鐵和/或血紅素的缺乏以及相關(guān)疾病的治療。在一些情況下，貧血癥由鐵缺乏所引起，例如與慢性或急性血液損失、懷孕、分娩、嬰兒發(fā)育、心理運(yùn)動(dòng)發(fā)育、嚴(yán)重子宮出血、月經(jīng)、慢性反復(fù)咳血、寄生蟲感染、慢性腎臟疾病和透析、外科手術(shù)或嚴(yán)重?fù)p傷、酒精或激素的長期攝取、NSA(非留體消炎藥)的長期攝取或刺激紅細(xì)胞生成的試劑的長期攝取相關(guān)的貧血。在其他情況下，貧血癥可為與其他疾病有關(guān)的貧血癥，其他疾病例如為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、癌癥、霍奇金白血病、非霍奇金白血病、抗癌化療、炎性腸病(IBD)、潰瘍性結(jié)腸炎、甲狀腺炎、肝炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、風(fēng)濕性多肌痛、硬皮病、結(jié)締組織病、Sojgren綜合癥、充血性心力衰竭/心肌病，或特發(fā)性老年性貧血。在其他情況下，貧血癥可由于鐵吸收的失調(diào)、營養(yǎng)不足或營養(yǎng)不良引起，例如與克羅恩病、胃手術(shù)、抑制鐵吸收的藥物攝取或鈣的長期攝取相關(guān)的貧血癥。除此之外，可導(dǎo)致貧血癥狀的病理狀態(tài)例如列舉包括不寧腿綜合癥(RLS)、獻(xiàn)血、帕金森氏癥、脫發(fā)、或?qū)е伦⒁饬?專注力不足的失調(diào)等等。本文中描述的新型藥劑配方允許通過肌肉或皮下給藥，尤其通過肌肉注射或皮下注射治療上述失調(diào)，在這兩種情況下均不會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)。事實(shí)上，本申請人驚奇地發(fā)現(xiàn)，分子量(MW)在10000和30000Da之間、多分散性為I. O I. 8以及按重量計(jì),鐵含量(w/w)在25 1:%和40wt%2間的鐵與麥芽糖酸的新型低分子量配合物，尤其是三價(jià)鐵，優(yōu)選氫氧化氧鐵與麥芽糖酸的配合物適于上述目的。該結(jié)果是出乎意料的，因?yàn)樵贕asche等人提供的概括性描述中示出，背景技術(shù)的現(xiàn)狀是陷入困境的，其似乎排除了得到能夠肌肉給藥或甚至皮下給藥的在濃縮的膠體溶液中可用于替代療法的氫氧化氧鐵與糖配合的腸胃外制劑的可能性。再者，事實(shí)上與至今已知在治療中所使用的鐵配合物相比，這個(gè)結(jié)果似乎表示出低分子量和較高的毒性相關(guān)，較高的毒性可認(rèn)為是由于較多不穩(wěn)定鐵的存在，即鐵易于釋放到血液中而沒有特定蛋白例如鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的結(jié)合的介入，甚至，在另一方面，低分子量的配合物應(yīng)該是較少引起過敏的。從化學(xué)-物理學(xué)角度看，通常低分子量的配合物是不穩(wěn)定的，使得它在溶液中需要高PH條 件即高于10.5以確保分子量在初始值內(nèi)。該事實(shí)在生理學(xué)水平上是非常重要的，因?yàn)檫@就限制這些化合物專用于靜脈療法。這是在氫氧化氧鐵鹿糖鹽(ironoxide-hydroxidesaccharate)和氫氧化氧鐵葡糖酸鹽(iron oxide-hydroxidegluconate)的情況下。另一方面，更穩(wěn)定的較高分子量的配合物可在生理學(xué)的PH下形成配方，理論上也可肌肉給藥且認(rèn)為具有低毒性，盡管它們可引起過敏型的嚴(yán)重副作用。在實(shí)際中，它們可幾乎專用于靜脈使用，因?yàn)殍F-糖鍵非常強(qiáng)，鐵本身釋放非常緩慢，因而鐵的生物利用率低，且如果肌肉給藥，配合物易于長時(shí)間保留在組織中而引起除過敏反應(yīng)之外的組織損傷。因此，本發(fā)明涉及三價(jià)鐵，優(yōu)選氫氧化氧鐵與麥芽糖酸的低分子量配合物，在生理學(xué)pH條件下,優(yōu)選在6. O和8. O之間的pH下,可出人意料以高濃度(高達(dá)200mg/ml的Fe)結(jié)合形成配方，在帶有低變應(yīng)原性和低毒性的同時(shí)，使得它們易于以治療量進(jìn)行肌肉給藥或皮下給藥，優(yōu)選團(tuán)注。表述“鐵，優(yōu)選氫氧化氧鐵與麥芽糖酸的低分子量配合物”用于表示優(yōu)選三價(jià)鐵和麥芽糖酸的配合物，該配合物的分子量包含在10000和30000道爾頓之間，多分散性在I. O和I. 8之間，優(yōu)選在I. O和I. 6之間，以及鐵滴定度包含在25wt%^P 40wt%之間。優(yōu)選地，表述“三價(jià)氫氧化氧鐵與麥芽糖酸的配合物”用于表示氫氧化氧鐵(III)與麥芽糖的配合物，其中麥芽糖的末端醛基被氧化至羧基基團(tuán)即氫氧化鐵(III)或羥基氧化鐵(III)與
4(R)-(1-4) Ο-a-吡喃葡萄糖)-氧-2 (R)，3 (S)，5 (R)，6-四羥基-己酸的多核配合物。優(yōu)選地，這些配合物被配制為溶液或水性膠體溶液。按照右旋糖酐標(biāo)準(zhǔn)的USP32利用GPC來確定這些配合物的平均分子量(MW)為10000至30000道爾頓，優(yōu)選12000至27000道爾頓，更優(yōu)選13000至18000道爾頓。根據(jù)本發(fā)明的配合物優(yōu)選地顯示出高均勻性的平均分子量(MW);事實(shí)上，以MW/Mn (通過專著USP 32，與分子量的相同方法提供的參數(shù))之間的比計(jì)算的多分散性包含在I. O和I. 8之間，更優(yōu)選在I. O和I. 6，更優(yōu)選I. I I. 5以及甚至優(yōu)選在I. 2和I. 4之間。這個(gè)較窄范圍的多分散性不僅僅確保了分子量的均勻性，并且本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)其有助于保證且確保了在鐵的釋放中的均勻性并且排除了不穩(wěn)定鐵的存在。本發(fā)明的申請人還發(fā)現(xiàn)上述配合物可含有高達(dá)50wt%的鐵(w/w);然而，為了本文所述的實(shí)踐目的并實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的優(yōu)勢，必須選擇的鐵值包含在25 丨％和40wt%之間，優(yōu)選在25wt%和35wt%之間，更優(yōu)選在26wt%和32wt%之間，甚至更優(yōu)選在26wt%和28. 5wt%之間，最優(yōu)選在 26. 5wt%^P 28. 5wt%之間。在上述配合物的范圍內(nèi)，優(yōu)選給出的配合物的特征是分子量Mw在12000和27000Da之間，多分散性為I. O I. 8，優(yōu)選為I. O I. 6，更優(yōu)選I. I I. 5，以及鐵含量在25界七％和40wt%之間；甚至更優(yōu)選分子量Mw在13000和18000Da之間，多分散性為I. 2 I. 4，以及鐵含量在25 丨％和40wt%之間。進(jìn)一步優(yōu)選的配合物的特征是分子量Mw在13000和18000Da之間，多分散性為I. 2 I. 4，以及鐵含量在25 丨％和35wt%之間。進(jìn)一步優(yōu)選的配合物的特征是分子量Mw在12000和27000Da之間，多分散性為I. I I. 5，以及鐵含量在26 丨％和32wt%之間，甚至更優(yōu)選分子量Mw在13000和18000Da之間，多分散性為I. 2 I. 4，以及鐵含量在26wt%^P 28. 5wt%之間，優(yōu)選在26. 5wt%^P 28. 5wt%之間。本文所述的麥芽糖的氧化步驟可通過在同一申請人的W02006/111802所描述的方法中獲得，但不是其他公開方法的重復(fù)方法。因此，優(yōu)選根據(jù)W02006/111802的方法，因?yàn)槿缟纤?，其提供了麥芽糖的醛基定量和選擇性氧化，以得到完全均質(zhì)且穩(wěn)定的產(chǎn)品，且該產(chǎn)品易于純化，因此適于在藥學(xué)領(lǐng)域中應(yīng)用。在根據(jù)W02006/111802的方法中，進(jìn)行麥芽糖的氧化，以使得所得的羧基麥芽糖的剩余還原能力低于lwt%，通過13Cy1HNMR或HPLC可很容易地證實(shí)。在本文描述的配合物中，通過準(zhǔn)確、特定并定量氧化在麥芽糖的Cl位置的醛基進(jìn)行的活化的麥芽糖的合成提供了具體能夠配合氫氧化氧鐵的糖，且能夠得到申請人發(fā)現(xiàn)的所需特性的所述配合物。事實(shí)上，麥芽糖酸的均質(zhì)性，即作為化學(xué)試劑的高純度能夠確保配合物的均質(zhì)性和均勻性，這可通過非常接近1，尤其是優(yōu)異的化學(xué)物理穩(wěn)定性上的多分散性很容易地被證實(shí)。事實(shí)上，從不傾向于如信息手冊中所述與二糖所得到的其他配合物如Venofer 發(fā)生的沉淀的包括配合物本身的水性溶液的完美均質(zhì)性總是得到證實(shí)?，F(xiàn)在，本申請人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過改變活化的麥芽糖(優(yōu)選使用上述方法)與氫氧化氧鐵的比例，得到在生理pH下穩(wěn)定的低分子量配合物。因此，根據(jù)本發(fā)明的非排除性一般合成方法依照呈現(xiàn)的四個(gè)步驟方式(i) “活化”，即麥芽糖的特定氧化以提供麥芽糖酸； (ii)在溶液中產(chǎn)生麥芽糖酸與氫氧化氧鐵的配合作用；(iii)使尚未穩(wěn)定的麥芽糖酸與氫氧化氧鐵的配合物純化；(iv)使麥芽糖酸與氫氧化氧鐵的配合物穩(wěn)定化。由穩(wěn)定化(iv)，冷卻之后得到含有氫氧化氧鐵形式的活性成分和麥芽糖酸的堿性溶液(pH 9 12，例如11 ±0. 5)。該溶液可被用于制備本發(fā)明涉及的藥劑溶液，中和/緩沖溶液至生理pH，然后可選地加入合適的賦形劑，隨后均進(jìn)行合適的殺菌處理(例如，O. 22微米過濾)。作為替代，由上述從步驟(iv)得到的溶液可分離出干燥固體粉末形式的配合物，例如在W02006/111802(通過冷凍干燥或噴霧干燥機(jī))中所描述的。相應(yīng)地，所得到的粉末可接著用于制備適用于肌肉或皮下或靜脈給藥的各種藥劑形式。它們之中，首先，生理溶液與在(iv)中直接由溶液得到的那些相似，但是也可以是其他形式的溶液。干燥固體形式的本發(fā)明的配合物也未修飾或添加合適的固體賦形劑進(jìn)行配制以通過添加合適的稀釋劑(重)構(gòu)成在使用時(shí)可注射的生理溶液。從所述可注射的配方中也可得到重新構(gòu)成的配方，例如通過在包裝前進(jìn)行冷凍干燥。
如上所述的配合物的配方是可行的，這是由于本發(fā)明的申請人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)這些配合物在生理pH值的水性環(huán)境中是可溶且穩(wěn)定的，而不需要加入糖或其他穩(wěn)定劑進(jìn)行進(jìn)一步穩(wěn)定，這就改進(jìn)了例如克分子滲透壓濃度(osmolality)、粘度、溶解度的一些化學(xué)物理特性。實(shí)施例實(shí)例(I. I)-對比例將O. 5g的溴化鈉加入至溶解有50. Og的麥芽糖的167ml的純凈水中，且用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所得到的溶液的PH值至7. 5和8. 5之間。然后將88. 21g的具有11. 74%的活性氯的次氯酸鈉加入到混合物中。該加入必須緩慢進(jìn)行(經(jīng)過2小時(shí))，用氫氧化鈉將pH值維持在7. O和9. O之間。加入的次氯酸鹽相當(dāng)于麥芽糖的末端醛基完全氧化至羧酸的化學(xué)當(dāng) 量。在加入結(jié)束時(shí)，保持?jǐn)嚢枞芤?0分鐘，在這期間，通過HPLC方法證實(shí)末端醛基的
完全氧化。將188. IOg的38. 60% w/w的氯化鐵溶液加入至活化的麥芽糖溶液中，并將該混合物冷卻至 17. (TC ±0. 5°C。一旦達(dá)到所指示的溫度，在不少于3小時(shí)內(nèi)通過滴入14% w/w的碳酸鈉溶液使溶液的pH值達(dá)到2. 5±0. 5。一旦達(dá)到該pH值，于17. (TC ±0. 5°C的溫度下保持?jǐn)嚢柙撊芤?0分鐘，需要時(shí)，總是通過14% w/w的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至2. 5±0. 5。因此，在不少于I小時(shí)內(nèi)通過加入15% w/w的氫氧化鈉使pH值達(dá)到10. 5±0. 5。因此，通過使用設(shè)置有截留5000Da的膜的過濾系統(tǒng)的超濾作用純化所得到的溶液。使得該鹽純化的溶液的pH值達(dá)到11. 0±0. 5并且在達(dá)到75°C的溫度后持續(xù)2. 5小時(shí)。一旦結(jié)束了該熱處理，冷卻溶液并在用乙酸調(diào)節(jié)pH值至7. O ± I. O后，以無菌方式過濾該溶液。通過冷凍干燥分離該配合物。通過美國藥典(USP) 32nd的描述中，其提供了串聯(lián)的雙柱(T0S0 HAASTSK-GELG5000PWXL 30cm x 7. 8cm ID+T0S0 HAAS TSK-GEL 2500PWXL30cm x 7. 8cm ID)以及出現(xiàn)在峰頂?shù)闹?Mp)的已知分子量4440、9890、21400、43500、66700、123500、196300、276500Da作為標(biāo)準(zhǔn)的右旋糖酐，使用凝膠滲透色譜方法測定產(chǎn)物的平均分子量和多分散性。配合物的化學(xué)物理特性如下平均分子量(Mw)= 33012多分散性=1.54Fe3+ = 30. 4% w/w。實(shí)例(I. 2)_本發(fā)明將O. 5g的溴化鈉加入至溶解有50. Og的麥芽糖的167ml的純凈水中，且用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所得到的溶液的PH值至7. 5和8. 5之間。然后將88. 21g的具有11. 74%的活性氯的次氯酸鈉加入到混合物中。該加入必須緩慢進(jìn)行(經(jīng)過2小時(shí))，用氫氧化鈉將pH值維持在7. O和9. O之間。加入的次氯酸鹽相當(dāng)于麥芽糖的末端醛基完全氧化至羧酸的化學(xué)當(dāng)量。在加入結(jié)束時(shí)，保持?jǐn)嚢枞芤?0分鐘，在這期間，通過HPLC方法證實(shí)末端醛基的
完全氧化。將171. OOg的38. 60% w/w的氯化鐵溶液加入至活化的麥芽糖溶液中，并將混合物冷卻至 17. (TC ±0. 5°C。一旦達(dá)到所指示的溫度，在不少于3小時(shí)內(nèi)通過滴入14% w/w的碳酸鈉溶液使溶液的pH值達(dá)到2. 5±0. 5。一旦達(dá)到該pH值，于17. (TC ±0. 5°C的溫度下保持?jǐn)嚢柙撊芤?0分鐘，需要時(shí)，總是通過14% w/w的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至2. 5±0. 5。因此，在不小于I小時(shí)內(nèi)通過加入15% w/w的氫氧化鈉使pH值達(dá)到10. 5±0. 5。因此，通過使用設(shè)置有截留5000Da的膜的過濾系統(tǒng)的超濾作用純化所得到的溶液。
使得該鹽純化的溶液的pH值達(dá)到11. 0±0. 5并且在達(dá)到75°C的溫度后持續(xù)2. 5小時(shí)?！┙Y(jié)束了該熱處理，冷卻溶液并在用乙酸調(diào)節(jié)pH值至7. O ± I. O后，以無菌方式過濾該溶液。通過冷凍干燥分離該配合物。通過美國藥典(USP) 32nd的描述中，其提供了串聯(lián)的雙柱(T0S0 HAASTSK-GELG5000PWXL 30cm x 7. 8cm ID+T0S0 HAAS TSK-GEL 2500PWXL30cm x 7. 8cm ID)以及出現(xiàn)在峰頂?shù)闹?Mp)的已知分子量4440、9890、21400、43500、66700、123500、196300、276500Da作為標(biāo)準(zhǔn)的右旋糖酐，使用凝膠滲透色譜方法測定產(chǎn)物的平均分子量和多分散性。配合物的化學(xué)物理特性如下平均分子量(Mw)= 25441多分散性=1.53Fe3+ = 30. 5% w/w。實(shí)例(I. 3)_本發(fā)明將O. 5g的溴化鈉加入至溶解有50. Og的麥芽糖的167ml的純凈水中，且用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所得到的溶液的PH值至7. 5和8. 5之間。然后將91. 03g的具有11. 38%的活性氯的次氯酸鈉加入到混合物中。該加入必須緩慢進(jìn)行(經(jīng)過2小時(shí))，用氫氧化鈉將pH值維持在7. O和9. O之間。加入的次氯酸鹽相當(dāng)于麥芽糖的末端醛基完全氧化至羧酸的化學(xué)當(dāng)量。在加入結(jié)束時(shí)，保持?jǐn)嚢枞芤?0分鐘，在這期間，通過HPLC方法證實(shí)末端醛基的
完全氧化。將149. 16g的38. 94% w/w的氯化鐵溶液加入至活化的麥芽糖溶液中，并將混合物冷卻至 17. (TC ±0. 5°C。一旦達(dá)到所指示的溫度，在不少于3小時(shí)內(nèi)通過滴入14% w/w的碳酸鈉溶液使溶液的pH值達(dá)到2. 5±0. 5。一旦達(dá)到該pH值，于17. (TC ±0. 5°C的溫度下保持?jǐn)嚢柙撊芤?0分鐘，需要時(shí)，總是通過14% w/w的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至2. 5±0. 5。因此，在不小于I小時(shí)內(nèi)通過加入15% w/w的氫氧化鈉使pH值達(dá)到10. 5±0. 5。因此，通過使用設(shè)置有截留5000Da的膜的過濾系統(tǒng)的超濾作用純化所得到的溶液。使得該鹽純化的溶液的pH值達(dá)到11. 0±0. 5并且在達(dá)到75°C的溫度后持續(xù)2. 5小時(shí)。一旦結(jié)束了該熱處理，冷卻溶液并在用乙酸調(diào)節(jié)pH值至7. O ± I. O后，以無菌方式過濾該溶液。通過冷凍干燥分離該配合物。通過美國藥典(USP) 32nd的描述中，其提供了串聯(lián)的雙柱(T0S0 HAASTSK-GELG5000PWXL 30cm x 7. 8cm ID+T0S0 HAAS TSK-GEL 2500PWXL30cm x 7. 8cm ID)以及出現(xiàn)在峰頂?shù)闹?Mp)的已知分子量4440、9890、21400、43500、66700、123500、196300、276500Da作為標(biāo)準(zhǔn)的右旋糖酐，使用凝膠滲透色譜方法測定產(chǎn)物的平均分子量和多分散性。配合物的化學(xué)物理特性如下平均分子量(Mw)= 14479多分散性=1.37Fe3+ = 26. I % w/w。實(shí)例(I. 4)_本發(fā)明將O. 5g的溴化鈉加入至溶解有50. Og的麥芽糖的167ml的純凈水中，且用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所得到的溶液的PH值至7. 5和8. 5之間。然后將75. 81g的具有13. 66%的活性氯的次氯酸鈉加入到混合物中。該加入必須緩慢進(jìn)行(經(jīng)過2小時(shí))，用氫氧化鈉將pH值維持在7. O和9. O之間。加入的次氯酸鹽相當(dāng)于麥芽糖的末端醛基的完全氧化至羧酸的化學(xué)當(dāng)量。在加入結(jié)束時(shí)，保持?jǐn)嚢枞芤?0分鐘，在這期間，通過HPLC方法證實(shí)末端醛基的完全氧化。將123. 13g的39. 31 % w/w的氯化鐵溶液加入至活化的麥芽糖溶液中，并將混合物冷卻至 17. (TC ±0. 5°C。一旦達(dá)到所指示的溫度，在不少于3小時(shí)內(nèi)通過滴入14% w/w的碳酸鈉溶液使溶液的pH值達(dá)到2. 5±0. 5。一旦達(dá)到該pH值，于17. (TC ±0. 5°C的溫度下保持?jǐn)嚢柙撊芤?0分鐘，需要時(shí)，總是通過14% w/w的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至2. 5±0. 5。因此，在不小于I小時(shí)內(nèi)通過加入15% w/w的氫氧化鈉使pH值達(dá)到10. 5±0. 5。因此，通過使用設(shè)置有截留5000Da的膜的過濾系統(tǒng)的超濾作用純化所得到的溶液。使得該鹽純化的溶液的pH值達(dá)到11. 0±0. 5并且在達(dá)到75°C的溫度后持續(xù)2. 5小時(shí)。一旦結(jié)束了該熱處理，冷卻溶液并在用乙酸調(diào)節(jié)pH值至7. O ± I. O后，以無菌方式過濾該溶液。通過冷凍干燥分離該配合物。通過美國藥典(USP) 32nd的描述中，其提供了串聯(lián)的雙柱(T0S0 HAASTSK-GELG5000PWXL 30cm x 7. 8cm ID+T0S0 HAAS TSK-GEL 2500PWXL30cm x 7. 8cm ID)以及出現(xiàn)在峰頂?shù)闹?Mp)的已知分子量4440、9890、21400、43500、66700、123500、196300、276500Da作為標(biāo)準(zhǔn)的右旋糖酐，使用凝膠滲透色譜方法測定產(chǎn)物的平均分子量和多分散性。配合物的化學(xué)物理特性如下平均分子量(Mw)= 12272多分散性=1.27Fe3+ = 25. 4% w/w。實(shí)例(I. 5)-本發(fā)明(工業(yè)規(guī)模)
將O. 14kg的溴化鈉加入至溶解有14. Okg的麥芽糖的47升的純凈水中，且用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所得到的溶液的pH值至7. 5和8. 5之間。然后將22. 25kg的具有13. 03% w/w的活性氯的次氯酸鈉加入到混合物中。該加入必須緩慢進(jìn)行(經(jīng)過2小時(shí))，用氫氧化鈉將PH值維持在7. O和9. O之間。加入的次氯酸鹽相當(dāng)于麥芽糖的末端醛基完全氧化至羧酸的
化學(xué)當(dāng)量。在加入結(jié)束時(shí)，保持?jǐn)嚢枞芤?0分鐘，在這期間，通過HPLC方法證實(shí)末端醛基的
完全氧化。將37. 87kg的42. 95% w/w的氯化鐵溶液加入至活化的麥芽糖溶液中，并將混合物冷卻至 17. (TC ±0. 5°C。一旦達(dá)到所指示的溫度，在不少于3小時(shí)內(nèi)通過滴入14% w/w的碳酸鈉溶液使溶液的pH值達(dá)到2. 5±0. 5。一旦達(dá)到該pH值，于17. (TC ±0. 5°C的溫度下保持?jǐn)嚢柙撊芤?30分鐘，需要時(shí)，總是通過14% w/w的碳酸鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至2. 5±0. 5。因此，在不小于I小時(shí)內(nèi)通過加入15% w/w的氫氧化鈉使pH值達(dá)到10. 5±0. 5。因此，通過使用設(shè)置有截留5000Da的膜的過濾系統(tǒng)的超濾作用純化所得到的溶液。使得該鹽純化的溶液的pH值達(dá)到11. 0±0. 5并且在達(dá)到75°C的溫度后持續(xù)2. 5小時(shí)。一旦結(jié)束了該熱處理，冷卻溶液并在用乙酸調(diào)節(jié)pH值至7. O ± I. O后，以無菌方式過濾該溶液。通過冷凍干燥分離該配合物。通過美國藥典(USP) 32nd的描述中，其提供了串聯(lián)的雙柱(T0S0 HAASTSK-GELG5000PWXL 30cm x 7. 8cm ID+T0S0 HAAS TSK-GEL 2500PWXL30cm x 7. 8cm ID)以及在峰頂?shù)闹?Mp)的已知分子量 4440，9890，21400，43500，66700，123500，196300，276500Da 作為標(biāo)準(zhǔn)的右旋糖酐，使用凝膠滲透色譜方法測定產(chǎn)物的平均分子量和多分散性。配合物的化學(xué)物理特性如下平均分子量(Mw)= 14683多分散性=1.38Fe3+ = 27. 4% w/w。實(shí)例(I. 6)-對比例(按照WO 2006/111802的實(shí)例3)將60g的麥芽糖溶解在200ml的純凈水中，然后加入O. 6g的溴化鈉，用氫氧化鈉調(diào)節(jié)所得到的溶液的PH值至7. O和9. O之間。以兩小時(shí)加入相當(dāng)于末端醛基完全氧化至羧酸的化學(xué)當(dāng)量的98. 5g的12%的活性次氯酸鈉，維持pH值在7. O和9. O之間。在加入結(jié)束時(shí)，保持?jǐn)嚢枞芤?0分鐘，在這期間，通過HPLC方法證實(shí)末端醛基的完全氧化，確定剩余麥芽糖和活化的麥芽糖之間的比例。將257g的40wt %的FeCl 3的溶液(鐵/糖比例=1:1. 7w/w)加入至活化的麥芽糖溶液中，并使溶液的溫度達(dá)到16°C和20°C之間，繼續(xù)攪拌直至反應(yīng)混合物發(fā)生完全均質(zhì)化。然后以3小時(shí)將15% w/v的Na2CO3溶液緩慢加入至所得到的溶液中，以使得pH值達(dá)到2. 3和2. 7的值之間。一旦達(dá)到該值，攪拌該溶液且在這些條件下維持15分鐘，檢驗(yàn)pH值維持在2. 3和2. 7之間，且然后通過以I小時(shí)加入15% w/v的氫氧化鈉溶液使pH值達(dá)到10. 5±0. 5。不需要?dú)溲趸F沉淀，甚至配合物形式的沉淀。
因此，通過使用設(shè)置有截留3000Da的膜的過濾系統(tǒng)的超濾作用純化所得到的溶液。使得該鹽純化的溶液的pH值達(dá)到11. 5±0. 5并且在達(dá)到75°C ±2°C的溫度后持續(xù)2小時(shí)。在加熱結(jié)束時(shí)，冷卻配合物并通過冷凍干燥分離配合物。配合物的物理化學(xué)特性如下平均分子量(Mw) = 53655道爾頓*數(shù)值分子量(Mn) = 35988道爾頓* 多分散性=1.5Fe3+的含量=4L 4%。*根據(jù)美國藥典(USP)，28th的1065頁的方法確定分子量。實(shí)例(II. I) 50mg/ml的鐵的配方將4500ml的注射用水(溶液的最終容積的90% )裝到5升的瓶中。將930. 7g的具有等于27. 4% w/w的ο. d. b.的Fe滴定度和等于98. 03% (實(shí)例I. 5)的R. S.的鐵配合物粉末在攪拌下以少量加入水中。繼續(xù)攪拌該混合物直至固體完全溶解。攪拌15分鐘后，然后加入40% w/w的乙酸調(diào)節(jié)溶液的pH值至7. O。然后，將所得到的溶液轉(zhuǎn)移至5升的標(biāo)有刻度的平底燒瓶中，用注射用水沖洗溶解用燒瓶直至徹底清除紅色溶液，然后將沖洗物加入剩余溶液中。通過注射用水使平底燒瓶內(nèi)的溶液體積準(zhǔn)確地達(dá)到5升?？蛇x地,在使溶液達(dá)到容積之前，也可加入適用于腸胃外配方的合適賦形劑。由此得到的溶液可在鐵滴定度(50mg/ml即5% w/v的鐵)的分析控制之后使用,在消毒過濾后,用于制備下列藥劑劑型藥水瓶；帶有環(huán)蓋的藥水瓶；預(yù)充滿的注射瓶。實(shí)例(In.I)與TFerinject 的對比表I
權(quán)利要求
1.一種優(yōu)選三價(jià)鐵與麥芽糖酸的配合物，其特征在于，分子量Mw在10000和30000Da之間，多分散性為1.0-1. 8，且鐵含量在25wt%^P 40wt%之間。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的配合物，其特征在于，多分散性為I.O I. 6。
3.根據(jù)權(quán)利要求I和/或2所述的配合物，其特征在于，分子量Mw在12000和27000Da之間，多分散性為I. I I. 5，且鐵含量在25wt%^P 40wt%之間。
4.根據(jù)權(quán)利要求I至3中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物，其特征在于，分子量Mw在13000和18000Da之間，多分散性為I. 2 I. 4，且鐵含量在25wt%^P 40wt%之間。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至3中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物，其特征在于，分子量Mw在13000和18000Da之間，多分散性為I. 2 I. 4，且鐵含量在25wt%^P 35wt%之間。
6.根據(jù)權(quán)利要求I至3中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物，其特征在于，分子量Mw在12000和27000Da之間，多分散性為I. I I. 5，且鐵含量在26wt%^P 32wt%之間。
7.根據(jù)權(quán)利要求I至6中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物，其特征在于，分子量Mw在13000和18000Da之間，多分散性為I. 2 I. 4，且鐵含量在26. 5wt%^P 28. 5wt%之間。
8.根據(jù)前述權(quán)利要求中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物，其中，所述三價(jià)鐵為氫氧化氧鐵的形式。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物，所述配合物在哺乳動(dòng)物的貧血癥狀治療中的肌肉給藥或皮下給藥中用作藥物。
10.一種根據(jù)前述權(quán)利要求中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物在制備用于治療貧血癥狀的藥劑溶液中的應(yīng)用，所述藥劑溶液肌肉注射或皮下注射到哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人類。
11.一種用于哺乳動(dòng)物的肌肉給藥或皮下給藥的藥物制劑，所述藥物制劑包括根據(jù)權(quán)利要求I至9中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的配合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的藥物制劑，所述藥物制劑肌肉團(tuán)注或皮下團(tuán)注至哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人類。
13.根據(jù)權(quán)利要求11至12中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的藥物制劑，所述藥物制劑包括至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求11至13中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的藥物制劑，所述藥物制劑包含至多200mg/ml,優(yōu)選80 120mg/ml的三價(jià)鐵。
15.根據(jù)權(quán)利要求11至14中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的藥物制劑，所述藥物制劑具有在6.O和·8. O之間的pH。
全文摘要
在由鐵缺乏引起的貧血癥狀的治療中能夠腸胃外給藥，優(yōu)選肌肉給藥或皮下給藥的鐵與麥芽糖酸的新型低分子量配合物以及適于該用途的新型藥劑組合物。具體來說，本發(fā)明提供一種優(yōu)選三價(jià)鐵和麥芽糖酸的新型配合物，其特征在于，分子量Mw在10000和30000Da之間，多分散性為1.0～1.8，且鐵含量在25wt％和40wt％之間。
文檔編號(hào)C07H15/04GK102947321SQ201180028572
公開日2013年2月27日 申請日期2011年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2010年6月9日
發(fā)明者M·奧托里, D·博斯, A·拉皮尼·薩徹蒂, E·馬齊 申請人:倍爾福股份公司