作為wnt信號(hào)通路抑制劑的三唑衍生物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及式I的化合物、它們的制備方法、含這樣的化合物的藥物制劑以及它們?cè)谥委熒系挠猛尽＿@樣的化合物在治療和/或預(yù)防受Wnt通路中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過度活化及核β-連環(huán)蛋白的含量增加影響的病癥或疾病中具有特別的用途。例如，這些化合物可用于預(yù)防和/或延緩腫瘤細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移，例如癌如結(jié)腸癌。
【專利說明】作為WNT信號(hào)通路抑制劑的三唑衍生物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及化合物，含有這樣的化合物的藥物制劑及其在治療中的用途，特別是作為減少腫瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移的Wnt通路抑制劑的用途。本發(fā)明還涉及這樣的化合物的制備方法和在這些制備方法中形成的中間體。
【背景技術(shù)】
[0002]糖蛋白的Wnt家族控制著多種發(fā)育過程，包括細(xì)胞命運(yùn)特化、增殖、極性和遷移。因此，fct通路在確保合適的胚胎組織發(fā)育和成人組織維持中起作用。在Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中至少涉及三種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。經(jīng)典(或β_連環(huán)蛋白依賴性)fct通路最先發(fā)現(xiàn)且研究的最多。在缺乏fct信號(hào)時(shí)，轉(zhuǎn)錄激活因子β_連環(huán)蛋白是一種磷酸化的細(xì)胞內(nèi)多蛋白質(zhì)復(fù)合體，其接著被降解。在這種復(fù)合體中，AXIN和腺瘤性結(jié)腸息肉病(APC)蛋白形成構(gòu)架，其通過酪蛋白-激酶la (CKla )和糖原合成酶激酶3 β (GSK-3 β )促進(jìn)β -連環(huán)蛋白磷酸化。磷酸化的β -連環(huán)蛋白而后被泛素化(ubiquitinylated),導(dǎo)致其蛋白酶體降解。當(dāng)Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)為非活性的，且因此游離β -連環(huán)蛋白水平低，使得DNA結(jié)合的T細(xì)胞因子/淋巴增強(qiáng)因子(TCF/LEF)蛋白與轉(zhuǎn)錄阻抑物相互作用，以阻斷核內(nèi)的Wnt靶基因表達(dá)。Wnt分子與FZD-LRP受體復(fù)合物在膜上的結(jié)合引起β -連環(huán)蛋白破壞復(fù)合物(destructioncomplex)失活的級(jí)聯(lián)事件。這使得β _連環(huán)蛋白累積并進(jìn)入細(xì)胞核，其在細(xì)胞核內(nèi)與Tcf/Lef家族的膜相互作用,通過補(bǔ)充(recruiting)輔激活因子蛋白將Tcf蛋白轉(zhuǎn)化為蛋白轉(zhuǎn)錄激活因子，以確保fct靶基因的有效活化。
[0003]經(jīng)典Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)在多種腫瘤中被過度活化，在細(xì)胞生長(zhǎng)和腫瘤進(jìn)程中扮演了核心角色(Barker等人，Nat.Rev.Drug.Discov.(〈〈自然評(píng)論:藥物發(fā)現(xiàn)》)3:997-1014、2006; Grigoryan 等人，Genes Dev.(《基因與發(fā)育》)22:2308-2341, 2008;和 Shitashige 等人，Cancer Sc1.(《癌癥科學(xué)》)99:631637，2008)。大約90%的散發(fā)性結(jié)腸癌顯示了異常的Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)(Liu等人，Nat.Genet.(《自然.遺傳學(xué)》)26:146-147，2000;和Morin等人，Science (《科學(xué)》)275:1787-1790，1997)，而全部的胰腺癌均顯示了 Wnt/Notch信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的改變(Jones 等人，Science (《科學(xué)》)321:1801-1806，2008)。
[0004]Wnt活化突變存在于多種癌癥中，包括胃癌、肝細(xì)胞癌、腎的腎母細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、黑素瘤、非小細(xì)胞肺癌、卵巢子宮內(nèi)膜癌、甲狀腺未分化癌、胰腺癌和前列腺癌(Barker等人，同上)。腺瘤樣息肉基因(APC)、β -連環(huán)蛋白或Axin基因的突變導(dǎo)致核β_連環(huán)蛋白的累積，這樣的突變往往與結(jié)腸癌相關(guān)(Morin等人，同上)。此外，使Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)沉默的胞外蛋白質(zhì)的改變，也可以導(dǎo)致異常的通路活性(Polakis, Curro Opin.Genet.Dev.(《遺傳與發(fā)育新見》)11:45-51，2007)，所述蛋白質(zhì)包括分泌性卷曲相關(guān)蛋白(SERPs)(Suzuki 等人,Nat.Genet (〈〈自然?遺傳學(xué)》)36:417-422, 2004), Dickkopf (Dkk) (Aguilera等人，Oncogene(《癌基因》)翌:4116-4121，2006)和Wnt抑制因子(WIF)家族成員(Mazieres等人，Cancer Res.(《癌癥研究》)Μ: 4717-4720，2004)。
[0005]在結(jié)腸直腸及其他Wnt失控的癌癥中，阻斷經(jīng)典Wnt活性顯示引發(fā)細(xì)胞周期在Gl停滯,而這是抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的關(guān)鍵步驟(van de Wetering等人，Cell (《細(xì)胞》)111:241-250.2002;和 Sukhdeo 等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA (《美國(guó)科學(xué)院自然科學(xué)進(jìn)展》)1M:7516-7521，2007)。近年來，若干類小分子已證明具有Wnt抑制劑的作用。這些藥物在Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的不同水平上發(fā)揮各自的抑制作用。干擾細(xì)胞核TCF/ β -連環(huán)蛋白的結(jié)合和環(huán)AMP反應(yīng)單元結(jié)合蛋白(CBP)的小分子，已被鑒定和描述(Emami等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA (《美國(guó)科學(xué)院自然科學(xué)進(jìn)展》)101:12682-12687，2004;和Lepourcelet M 等人，Cancer Cell (《癌細(xì)胞》)91-102, 2004)。已提出 Topo II α 和PARP-l(Shitashige 等人，Cancer Sc1.(《癌癥科學(xué)》)盟:631-637，2008)或 TBP、BRG1、BCL9、pygopus和Hyrax(Barker等人，同上)為用于抑制經(jīng)典Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的潛在祀點(diǎn)。近來，已確定兩組化學(xué)物質(zhì)(IWR-1和XAV939)穩(wěn)定所述破壞復(fù)合物(Chen等人，Nat.Chem.Biol.5:100-107，2009;和 Huang 等人，Nature:461:614-620.2009)。通過阻斷端錨聚合酶(Tankyrase)的PAPR域，XAV939和IWR-1被認(rèn)為改變AXIN2的PAR化和泛素化，這導(dǎo)致穩(wěn)定性增加和抑制經(jīng)典的fct信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。由于β_連環(huán)蛋白在細(xì)胞核中水平升高是經(jīng)典Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常的普遍特征，因此通過減少β -連環(huán)蛋白的存在來下調(diào)經(jīng)典fct活性代表了有效的治療策略。
[0006]現(xiàn)在我們已發(fā)現(xiàn)了一類篩選出的化合物，其顯示了阻斷經(jīng)典Wnt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活性，特別是能夠降低細(xì)胞核連環(huán)蛋白的水平。從這些化合物能夠影響APC和GSK-3 3的下游的活化β -連環(huán)蛋白穩(wěn)定性的程度來看，與已知的在經(jīng)典fct信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中作用于更上游的其他化合物相比，這些化合物具有更廣闊的前景。這些化合物通常適用于抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，特別是與結(jié)腸直腸癌、乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌和胰腺癌相關(guān)的腫瘤細(xì)胞。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明提供了通式I的化合物、其異構(gòu)體(例如立體異構(gòu)體)、可藥用的鹽和前藥:
[0008]
【權(quán)利要求】
1.通式I的化合物、或其異構(gòu)體(如:立體異構(gòu)體)、可藥用的鹽或前藥:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，其異構(gòu)體(如:立體異構(gòu)體)、可藥用的鹽或前藥，所述化合物具有通式II:
3.根據(jù)權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于，在式I或II中，L1為任選地被一個(gè)或多個(gè)(例如I或2)Rd基團(tuán)取代的Cy亞烷基基團(tuán)(優(yōu)選為Q_2亞烷基)，其中一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè))亞甲基基團(tuán)各自被-CRe=CRf-,或被基團(tuán)-C = C-所替代； 其中每個(gè)Rd可以為相同的或不同的，且可以選自C^6烷基(優(yōu)選為Cm烷基)、羥基、CV6烷氧基(例如CV3烷氧基)和鹵素(即:F、Cl、Br和I，優(yōu)選為F);和其中Re和Rf獨(dú)立地選自H、C1^3烷基、鹵素(例如F或Cl)及-CN。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的化合物、或其異構(gòu)體(如:立體異構(gòu)體)、可藥用鹽或前藥，其中在式I或式II中: Z1代表含有兩個(gè)或三個(gè)選自N、O和S的雜原子的五元雜環(huán)； Z2代表任選地被一個(gè)或多個(gè)(例如1、2、3或4個(gè))Ra基團(tuán)取代的苯基、吡啶基、嘧啶基或噁二唑基； 其中各Ra可相同或不同，且可選自鹵素(即KCUBinDXh烷基(優(yōu)選為Cm烷基)、C2_4 烯基、C2_4 炔基、Ch 鹵代烷基(例如 CF3)、-CN、-NO2、-0R、-SR、-C (O) R、-C (O) OR、-OC (O)R、-OC (O) NR2, -NR2, -NR-C (O) R、-NR-C (0) OR、-S (0) R、-S (0) 2R、-S (0) OR 或-S (0) 2NR2 基團(tuán)(其中每個(gè)R獨(dú)立地為H、C1^6烷基、CV6鹵代烷基、C2_6烯基或C2_6炔基)； R1代表任選地被一個(gè)或多個(gè)(例如1、2、3或4個(gè))Rb基團(tuán)取代的芳基或雜芳基；其中各Rb可相同或不同，且可選自鹵素(即KCUBinDXh烷基(優(yōu)選為Cm烷基)、C2_4 烯基、C2_4 炔基、Ch 鹵代烷基(例如 CF3)、-CN、-NO2、-0R、-SR、-C (0) R、-C (0) OR、-OC (0)R、-OC (0) NR2、-NR2、-N R-C (0) R、-NR-C (0) OR、-S (0) R、-S (0) 2R 或-S (0) OR 基團(tuán)(其中每個(gè) R獨(dú)立地為H、CV6烷基、Cu鹵代烷基、C2_6烯基或C2_6炔基)； R2代表任選地被一個(gè)或多個(gè)(例如1、2、3或4個(gè))R。基團(tuán)取代的芳基； 其中每個(gè)R。可相同或不同，且可選自鹵素(即:F、Cl、Br、I)、Cp6烷基(優(yōu)選為CV3 烷基)、C2_4 烯基、C2_4 炔基、Ch 鹵代烷基(例如 CF3)、-CN、-NO2、-0R、-SR、-C (0)R、-C (0) OR、-OC (0) R、-OC (0) NR2、-NR2、-NR-C (0) R、-NR-C (0) OR、-S (0) R、-S (0) 2R、-S (0) OR或-S(O)2NR2基團(tuán)(其中每個(gè)R獨(dú)立地為HXp6烷基、Cp6鹵代烷基、C2_6烯基或C2_6炔基); L1代表任選地被一個(gè)或多個(gè)(例如I或2個(gè))Rd基團(tuán)取代的Cy亞烷基(優(yōu)選為Cm亞烷基)，其中一個(gè)或兩個(gè)亞甲基基團(tuán)(如:一個(gè)亞甲基)各自被-CRe=CRf-或-C = C-基團(tuán)代替； 其中每個(gè)Rd可以為相同的或不同的，且可以選自CV6烷基(優(yōu)選為Ci_3烷基)、羥基和C1-S燒氧基(例如C1-S燒氧基); 其中R6和Rf獨(dú)立地選自H、C1^3烷基(例如甲基)、鹵素(例如F或Cl)和-CN ;和 L2代表鍵，或者任選取代的CV4亞烷基基團(tuán)，優(yōu)選為鍵。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的化合物或其異構(gòu)體(例如立體異構(gòu)體)、可藥用的鹽或前藥，其特征在于，在式I或II中: Z1代表含有兩個(gè)氮原子和一個(gè)氧原子的五元雜環(huán)； Z2代表任選地被Ra基團(tuán)單取代或雙取代的苯基、吡啶基或嘧啶基； 其中Ra可選自鹵素(即:F、Cl、Br、I)、羥基，C1^6烷氧基(例如C^3烷氧基)和-S(O)2R(其中R為H或烷基)；R1代表任選地被Rb基團(tuán)單取代的芳基或雜芳基基團(tuán)； 其中Rb選自鹵素(即:F、Cl、Br、I)、C1^6烷基(優(yōu)選為C1^烷基)，(^_6烷氧基(例如CV3烷氧基)、羥基和-CN ； R2代表任選地被基團(tuán)R。單取代或雙取代的芳基基團(tuán)； 其中每個(gè)R?？梢詾橄嗤幕虿煌?，且可以選自鹵素(即烷基(優(yōu)選為Cp3烷基)和Cp6烷氧基(例如CV3烷氧基)； L1代表任選地被一個(gè)或多個(gè)(例如I或2個(gè))Rd基團(tuán)取代的Cy亞烷基基團(tuán)(優(yōu)選為CV2亞烷基)，其中一個(gè)或兩個(gè)亞甲基基團(tuán)(例如一個(gè)亞甲基基團(tuán))各自被基團(tuán)-CRe=CRf-或基團(tuán)-C = C-所替代； 其中每個(gè)Rd可以為相同的或不同的，且可以選自CV6烷基(優(yōu)選為Ci_3烷基)、羥基和C1-S燒氧基(例如C1-S燒氧基); 其中Re和Rf獨(dú)立地選自H、C1^3烷基和鹵素(例如F或Cl);且 L2代表鍵或CV2亞烷基基團(tuán)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的化合物，其中基團(tuán)Z1選自下述基團(tuán):
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物、其異構(gòu)體(例如立體異構(gòu)體)、可藥用的鹽或前藥，所述化合物具有式la、Ila、Ib或IIb:
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的化合物，其特征在于，L1為基團(tuán)-CRe=CRf-、-C = C-或-C=C=C-,其中Re和Rf如權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所定義。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的化合物，其特征在于，L1為基團(tuán)-CRe=CRf-,其中Re和Rf獨(dú)立地選自H和甲基。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其異構(gòu)體(例如立體異構(gòu)體)、可藥用的鹽或前藥，所述化合物具有式IIc或IId:
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物或其異構(gòu)體、可藥用的鹽或前藥，所述化合物選自下述:
12.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，所述化合物選自下述:化合物編號(hào)(I)、(2)、(3)、(4)、(5)、(6)、(7)、(8)、(10)、(11)、(12)、(14)、(33)、(56)和(58)、它們的異構(gòu)體、其可藥用的鹽及前藥。
13.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，所述化合物選自下述:化合物編號(hào)(2)、(3)、(4)、⑶、(10)、(11)、(12)、(14)和(57)、它們的異構(gòu)體、其可藥用的鹽及前藥。
14.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的化合物，除了下述化合物:
15.一種制備權(quán)利要求1或2限定的式I或式II的化合物的方法，所述方法包括至少一個(gè)下述步驟: (a)將通式III的化合物:
16.一種藥物制劑，其包括如權(quán)利要求1到14中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用的鹽，和一種或多種可藥用的載體或賦形劑。
17.如權(quán)利要求1到14中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用的鹽，其用于治療。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的化合物，其特征在于，所述化合物用于治療和/或預(yù)防Wnt通路中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過度活化引起的任何病癥或疾病，例如涉及β_連環(huán)蛋白活化的這樣的病癥或疾病的治療和/或預(yù)防。
19.根據(jù)權(quán)利要求17所述的化合物，所述化合物用于預(yù)防和/或延緩腫瘤細(xì)胞的增殖或轉(zhuǎn)移，例如癌如腺癌，例如治療和/或預(yù)防任一種下述癌癥:結(jié)腸癌(例如結(jié)直腸癌)、胰腺癌、胃癌、肝癌(例如肝細(xì)胞和肝胚細(xì)胞癌)、腎的腎母細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、皮膚癌(例如黑素瘤)、非小細(xì)胞肺癌、子宮頸癌、卵巢子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、甲狀腺未分化癌、頭頸癌、乳腺癌、前列腺癌和成膠質(zhì)細(xì)胞瘤。
20.根據(jù)權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用的鹽在制造用于治療或預(yù)防下列癌癥中任一種的方法中的藥物中的用途:結(jié)腸癌(例如結(jié)直腸癌)、胰腺癌、胃癌、肝癌(例如肝細(xì)胞和肝胚細(xì)胞癌)、腎的腎母細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、皮膚癌(例如黑素瘤)、非小細(xì)胞肺癌、子宮頸癌、卵巢子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、甲狀腺未分化癌、頭頸癌、乳腺癌、前列腺癌和成膠質(zhì)細(xì)胞瘤。
21.一種治療人類或非人的動(dòng)物機(jī)體減輕或預(yù)防下列癌癥中任一種的方法:結(jié)腸癌(例如結(jié)直腸癌)、胰腺癌、胃癌、肝癌(例如肝細(xì)胞和肝胚細(xì)胞癌)、腎的腎母細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、皮膚癌(例如黑素瘤)、非小細(xì)胞肺癌、子宮頸癌、卵巢子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、甲狀腺未分化癌、頭頸癌、乳腺癌、前列腺癌和成膠質(zhì)細(xì)胞瘤，所述方法包括向所述機(jī)體施用有效量的權(quán)利要求1-14中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用的鹽。
22.一種促進(jìn)和/或引導(dǎo)細(xì)胞分化的方法(例如體外方法)，其包括將祖細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求1-1 4中任一項(xiàng)所述的化合物或其可藥用的鹽進(jìn)行接觸。
【文檔編號(hào)】C07D401/12GK103429583SQ201180064778
【公開日】2013年12月4日 申請(qǐng)日期:2011年12月8日 優(yōu)先權(quán)日:2010年12月8日
【發(fā)明者】D·霍爾斯沃斯, J·瓦勒, O·馬洪, S·克勞斯, A·E·沃隆科夫 申請(qǐng)人:奧斯陸大學(xué)醫(yī)院公司