專利名稱：一種從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝。
背景技術(shù)：
檸檬是蕓香科柑桔屬的常綠小喬木，近代科學(xué)研究表明檸檬中含有多種黃酮類化合物，包括橙皮苷、柚皮苷、圣草次苷、多甲氧基黃酮等，其中多甲氧基黃酮是含有多個甲氧基、低級性、具有平面結(jié)構(gòu)的有強烈生物活性的黃酮類成分，它具有抗癌、抗炎、抗氧化、抗誘變等多種藥理作用，但是對于在檸檬中多甲氧基黃酮的提取工藝則未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從檸檬中提取高含量多甲氧基黃酮的工藝，該提取工藝簡單、成本低、提取率高。為達到上述發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為提供一種從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，其特征在于包括以下步驟
O總黃酮的制備將檸檬果實粉碎至10-30目，加入2-6倍檸檬果實重量的乙醇浸泡 I. 5-5小時；在60-801下，加入2-4倍檸檬果實重量的乙醇回流浸提2_5次，每次浸提1_3 小時，制得提取液，合并提取液并回收乙醇，再將提取液濃縮至比重為1-2，制得總黃酮；
2)生物黃酮的制備將步驟I)制得的總黃酮濃縮液加1-4倍水靜置4小時或4小時以上，然后離心分離去掉母液，得到沉淀，制得生物黃酮；
3)多甲氧基黃酮的制備將步驟2)制得的生物黃酮加水水洗3-4次，洗至pH為
4.5-6. 5，然后加入堿溶液，并調(diào)pH至8-9，加熱煮沸1_3小時進行皂化反應(yīng)，冷卻至45°C 以下，然后加入萃取劑萃取2-5次，分離得到萃取劑相；將萃取劑相回收萃取劑后，收集沉淀部分，再依次加入O. 5-3倍沉淀量的質(zhì)量分數(shù)大于85%的乙醇、O. 5-3倍沉淀量的水和
O.5-3倍沉淀量的β環(huán)糊精，攪拌1-1. 5小時或用膠體磨4-5次，進行乳化混合至無可見油狀物為至，然后干燥、粉碎、檢測、復(fù)配、包裝，制得成品多甲氧基黃酮。優(yōu)選地，步驟I)中所述檸檬果實優(yōu)選為檸檬生理落果、次果、果皮、果胚中任一種或一種以上的組合；
優(yōu)選地，步驟I)中所述乙醇質(zhì)量分數(shù)為85%，所述第一次浸提時間為I. 5小時，其余每次浸提時間都為I小時。優(yōu)選地,步驟3)中所述堿溶液為氫氧化鈉溶液,按重量計,堿溶液的加入量為調(diào) pH后的生物黃酮重量的I倍，堿溶液的濃度為3-4%。優(yōu)選地，步驟3)中所述萃取劑為乙酸乙酯，按重量計，乙酸乙酯的加入量為皂化液的I倍。其中，步驟3)中將生物黃酮用清水清洗，并洗至pH為4. 5-6. 5，目的是將沉淀中大量的酸性條件下的水溶性多酚、多糖和低聚果膠去除，而PH為4. 5-6. 5是黃酮、生物黃酮和多甲氧基黃酮損失最少的條件，pH低于4. 5，大量水溶性多酚、多糖和低聚果膠殘留，pH高于6. 5,黃酮和多甲氧基黃酮將大量損失。其中，步驟3)中加入堿溶液后，并用酸(鹽酸或硫酸)或堿(氫氧化鈉或氫氧化鉀) 調(diào)節(jié)PH至8-9，pH低于8，皂化不徹底，造成多甲氧基黃酮提取率低，pH高于9，加熱煮沸過程中將造成多甲氧基黃酮的分解破壞，而在pH為8-9的條件下加熱煮沸I小時，使多甲氧基黃酮和油脂部分充分皂化溶于水。將皂化液冷卻至45°C是為了減少萃取過程中乙酸乙酯的揮發(fā)損失，同時在此溫度下亦可降低乳化現(xiàn)象的發(fā)生從而提高萃取率。本發(fā)明提取的多甲氧基黃酮為黃色，經(jīng)HPLC檢測，多甲氧基黃酮的含量可高達 30%，同時，本發(fā)明的生產(chǎn)工藝簡單，生產(chǎn)成本低，便于工業(yè)化應(yīng)用。綜上所述，本發(fā)明所提供的多甲氧基黃酮提取工藝簡單、成本低、提取率高，經(jīng)高效液相色譜分析表明該黃酮類化合物含量高，且具有較高的生物活性，因此具有很高的應(yīng)用價值。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的具體實施方式
做詳細地描述
實施例I:
將檸檬生理落果粉碎至10目，加入2倍檸檬果實重量的質(zhì)量分數(shù)為85%的乙醇浸泡
I.5小時；在60°C下，加入2倍檸檬果實重量的質(zhì)量分數(shù)為85%的乙醇到上述原料中回流浸提2次，第一浸提I. 5小時，第二次浸提I小時，制得提取液，將第一次和第二次的提取液合并并回收乙醇，再將提取液濃縮至比重為1，制得總黃酮；將制得的總黃酮濃縮液中加入 4倍濃縮液重量的水靜置4小時，然后離心分離去掉母液，制得沉淀生物黃酮；將制得的生物黃酮加水水洗3次，洗至pH為4. 5，然后加入O. 5倍調(diào)pH后的生物黃酮重量的濃度為3% 的氫氧化鈉溶液，并加入鹽酸調(diào)節(jié)溶液的PH為8，加熱煮沸I小時進行皂化反應(yīng)，將皂化液放涼冷卻至45°C，再加入O. 5倍皂化液重量的萃取劑乙酸乙酯萃取2次，然后分離得到乙酸乙酯相，將乙酸乙酯相回收乙酸乙酯后，收集沉淀部分,再依次加入O. 5倍沉淀量的質(zhì)量分數(shù)為86%的乙醇、O. 5倍沉淀量的水和O. 5倍沉淀量的β環(huán)糊精，攪拌I小時，進行乳化混合至無可見油狀物為至，然后干燥、粉碎、檢測、復(fù)配、包裝，制得成品多甲氧基黃酮，經(jīng)HPLC 檢測，制得的多甲氧基黃酮的含量為20%。實施例2
將檸檬果皮粉碎至20目，加入4倍檸檬果實重量的質(zhì)量分數(shù)為85%的乙醇浸泡3小時； 在75°C下，加入3倍檸檬果實重量的質(zhì)量分數(shù)為85%的乙醇到上述原料中回流浸提4次，第一浸提I. 5小時，第二次、第三次、第四次分別浸提I小時，制得提取液，將第一次、第二次、 第三次和第四次的提取液合并并回收乙醇，再將提取液濃縮至比重為I. 2，制得總黃酮；將制得的總黃酮濃縮液中加入I倍濃縮液重量的水靜置5小時，然后離心分離去掉母液，制得沉淀生物黃酮；將制得的生物黃酮加水水洗4次，洗至pH為5. 5，然后加入I倍調(diào)pH后的生物黃酮重量的濃度為4%的氫氧化鈉溶液，并加入鹽酸調(diào)節(jié)溶液的pH為8. 5，加熱煮沸2 小時進行皂化反應(yīng)，將皂化液放涼冷卻至40°C,再加入I倍皂化液重量的萃取劑乙酸乙酯萃取3次，然后分離得到乙酸乙酯相，將乙酸乙酯相回收乙酸乙酯后，收集沉淀部分，再依次加入I倍沉淀量的質(zhì)量分數(shù)為88%的乙醇、I倍沉淀量的水和I倍沉淀量的β環(huán)糊精，攪拌I. 5小時，進行乳化混合至無可見油狀物為至，然后干燥、粉碎、檢測、復(fù)配、包裝，制得成品多甲氧基黃酮，經(jīng)HPLC檢測，制得的多甲氧基黃酮的含量為30%。實施例3:
將檸檬次果和果皮粉碎至30目，加入6倍檸檬果實重量的質(zhì)量分數(shù)為85%的乙醇浸泡 5小時；在80°C下，加入4倍檸檬果實重量的質(zhì)量分數(shù)為85%的乙醇到上述原料中回流浸提 5次，第一浸提I. 5小時，第二次、第三次、第四次、第五次分別浸提I小時，制得提取液，將第一次、第二次、第三次、第四次和第五次的提取液合并后回收乙醇，再將提取液濃縮至比重為2，制得總黃酮；將制得的總黃酮濃縮液中加入3倍濃縮液重量的水靜置6小時，然后離心分離掉母液，制得沉淀生物黃酮；將制得的生物黃酮加水水洗4次，洗至pH為6. 5，然后加入3倍量的濃度為4%的氫氧化鈉溶液，并加入氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液的pH為9，加熱煮沸 3小時進行皂化反應(yīng),將皂化液放涼冷卻至40°C,再加入5倍皂化液重量的萃取劑乙酸乙酯萃取5次，然后分離得到乙酸乙酯相，將乙酸乙酯相回收乙酸乙酯后，收集沉淀部分，再依次加入3倍沉淀量的質(zhì)量分數(shù)為88%的乙醇、3倍沉淀量的水和3倍沉淀量的β環(huán)糊精，用膠體磨4次，進行乳化混合至無可見油狀物為至，然后干燥、粉碎、檢測、復(fù)配、包裝，制得成品多甲氧基黃酮，經(jīng)HPLC檢測，制得的多甲氧基黃酮的含量為28%。雖然結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的具體實施方式
進行了詳細地描述，但并非是對本專利保護范圍的限定。在權(quán)利要求書所限定的范圍內(nèi)，本領(lǐng)域的技術(shù)人員不經(jīng)創(chuàng)造性勞動即可做出的各種修改或調(diào)整仍受本專利的保護。
權(quán)利要求
1.一種從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，其特征在于包括以下步驟O總黃酮的制備將檸檬果實粉碎至10-30目，加入2-6倍檸檬果實重量的乙醇浸泡 I. 5-5小時；在60-80°C下，加入2-4倍檸檬果實重量的乙醇回流浸提2_5次，每次浸提1_3 小時，制得提取液，合并提取液并回收乙醇，再將提取液濃縮至比重為1-2，制得總黃酮；2)生物黃酮的制備將步驟I)制得的總黃酮濃縮液加1-4倍水靜置4小時或4小時以上，然后離心分離去掉母液，得到沉淀，制得生物黃酮；3)多甲氧基黃酮的制備將步驟2)制得的生物黃酮加水水洗3-4次，洗至pH為 4. 5-6. 5，然后加入堿溶液，并調(diào)pH至8-9，加熱煮沸1_3小時進行皂化反應(yīng)，冷卻至45°C 以下，然后加入萃取劑萃取2-5次，分離得到萃取劑相；將萃取劑相回收萃取劑后，收集沉淀部分，再依次加入O. 5-3倍沉淀量的質(zhì)量分數(shù)大于85%的乙醇、O. 5-3倍沉淀量的水和O.5-3倍沉淀量的β環(huán)糊精，攪拌1-1. 5小時或用膠體磨4-5次，進行乳化混合至無可見油狀物為至，然后干燥、粉碎、檢測、復(fù)配、包裝，制得成品多甲氧基黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，其特征在于步驟I)中所述檸檬果實為檸檬生理落果、次果、果皮、果胚中任一種或一種以上的組合。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，其特征在于步驟I)中所述乙醇質(zhì)量分數(shù)為85%，所述第一次浸提時間為I. 5小時，其余每次浸提時間都為I小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，其特征在于步驟3)中所述堿溶液為氫氧化鈉溶液，堿溶液的加入量為調(diào)pH后的生物黃酮重量的O. 5-4倍,堿溶液的濃度為3-4%。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，其特征在于步驟3)中所述萃取劑為乙酸乙酯，按重量計，乙酸乙酯的加入量為阜化液的O. 5-5倍。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從檸檬中提取多甲氧基黃酮的工藝，本工藝將檸檬果實粉碎，通過乙醇浸泡、乙醇多次回流、濃縮制得總黃酮，將制得的總黃酮加水靜置進行分離，制得生物黃酮，再將制得的生物黃酮通過水洗、皂化、萃取、乳化等步驟制得最終產(chǎn)品多甲氧基黃酮。本發(fā)明所提供的從檸檬中提取多甲氧基黃酮的提取工藝簡單、成本低、提取率高，經(jīng)高效液相色譜分析表明該黃酮類化合物含量高，且具有較高的生物活性，因此具有很高的應(yīng)用價值。
文檔編號C07D311/30GK102603697SQ201210024789
公開日2012年7月25日 申請日期2012年2月6日 優(yōu)先權(quán)日2012年2月6日
發(fā)明者李俊, 黃仁泉 申請人:四川億乙顯生物科技有限公司