專利名稱：一種柴胡皂苷a的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種中藥提取物的制備方法，特別涉及ー種柴胡皂苷a的制備方法。
背景技術(shù)：
柴胡為傘形科植物柴胡(Bupleurum chinense DC.)或狹葉柴胡(Bupleurumscorzoner-ifolium Willd.)的干燥根。按性狀不同，分別習稱“北柴胡”及“南柴胡”。柴胡具有疏肝解郁、疏散退熱、升陽舉陷等功效。柴胡皂苷為柴胡的主要藥效成分，對整個藥物的療效起著舉足輕重的作用。在柴胡制劑的研究中，只有通過提高柴胡皂苷的提取率，才能提高藥材的利用度，確保療效。公告號CN101084948B的發(fā)明公開了ー種柴胡皂苷的制備方法，該方法按順序包括如下步驟(I)取柴胡或柴胡提取揮發(fā)油后的殘渣，加入溶劑，將溶液調(diào)至堿性后再進行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型堿性陰離子交換柱，先用堿水和純水沖洗，沖洗液棄去，再用含水こ醇洗脫，洗脫液濃縮，即得柴胡皂苷。其中不足之處為提取液直接上大孔型堿性陰離子交換柱分離而獲得柴胡皂苷a，這樣柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率(相對收率)不穩(wěn)定且轉(zhuǎn)移率不高，致使最終獲得的柴胡皂苷a的純度不高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供ー種柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率高且穩(wěn)定，最終柴胡皂苷a的純度高的柴胡皂苷a的制備方法，提高了藥材的利用度，エ藝穩(wěn)定，適合規(guī)?；a(chǎn)。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是ー種柴胡皂苷a的制備方法，所述的制備方法步驟如下
⑴將柴胡藥材粗粉碎得粉碎物，向粉碎物中加入6-10倍重量的こ醇水溶液進行提取得提取液，將提取液真空減壓濃縮至含固量為25%-40%得濃縮液，離心，得沉淀；本發(fā)明將提取液濃縮至含固量為25%-40%再離心，這樣有利于柴胡藥材中的有效成分柴胡皂苷a經(jīng)離心積聚到沉淀中，提高了柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率和提取率；
⑵取沉淀，用こ醇水溶液溶解，上Al2O3柱層析，再用こ醇水溶液洗脫，洗脫液真空減壓濃縮至こ醇質(zhì)量濃度在5%以下，真空干燥即得柴胡皂苷a成品。取沉淀，用こ醇水溶液溶解，こ醇水溶液用量為使溶質(zhì)溶解的溶劑量。本發(fā)明將濃縮液離心，取沉淀溶解后，經(jīng)Al2O3柱層析來分離獲得柴胡皂苷a，而不采用現(xiàn)有方法將濃縮液直接上大孔型堿性陰離子交換柱，通過這樣操作，柴胡皂苷a的分離效果好，柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率即相對收率高，得到的最終產(chǎn)品純度高，提高了藥材的利用度，エ藝穩(wěn)定，適合規(guī)?；a(chǎn)。作為優(yōu)選，步驟⑴中粉碎物的大小在10-60目?？刂品鬯槲锏拇笮≡?0-60目利
于柴胡皂苷a的提取。 作為優(yōu)選，步驟⑴中所述的こ醇水溶液的質(zhì)量濃度為60%_95%。
作為優(yōu)選，步驟⑴中提取的溫度在70_100°C，提取時間1-2小時，提取2-3次。作為優(yōu)選，步驟⑴和步驟⑵中所述的真空減壓濃縮的條件為溫度50_65°C，真空度 _0. 06 _0. 09Mpa。作為優(yōu)選，步驟⑴中所述的離心是在轉(zhuǎn)速4000-7000r/min下離心10_20min，離心
1-2次。離心參數(shù)的控制，柴胡藥材中的有效成分柴胡皂苷a能更好地離心積聚到沉淀中，獲得最佳地柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率和提取率。作為優(yōu)選，步驟⑵中所述的こ醇水溶液的質(zhì)量濃度為70%_95%。
作為優(yōu)選，步驟⑵中用こ醇水溶液洗脫時，洗脫劑用量為2倍保留體積至6倍保留體積。保留體積為從進樣開始到某組分在柱后出現(xiàn)濃度極大值時流出溶劑的體積。本發(fā)明中洗脫劑こ醇水溶液的用量為2倍保留體積至6倍保留體積。作為優(yōu)選，步驟⑵中所述的Al2O3柱Al2O3的裝柱量為H :D=2_10 1 ;A1203柱上樣量為m樣品m氧化[I:2-8。Al2O3的大小在IOO-3OO目，優(yōu)選中性Al2O3，裝柱量為H:D，其中H
代表柱的高度，D代表柱的直徑；上樣量為m#s其中代表樣品的質(zhì)量(即沉淀
用こ醇水溶液溶解后的液體)，代表氧化鋁的質(zhì)量?？刂蒲b柱量和上樣量，以達到最佳的分離效果，柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率高，最終產(chǎn)品的純度高。作為優(yōu)選，步驟⑵中所述的真空干燥條件為溫度50-70 °C,真空度-0. 06 -0. 09Mpa，干燥時間1-2. 5小時。本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明將濃縮液離心，取沉淀溶解后，經(jīng)Al2O3柱層析來分離獲得柴胡皂苷a，柴胡皂苷a的分離效果好，柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率即相對收率高，得到的最終產(chǎn)品純度高，提高了藥材的利用度，エ藝穩(wěn)定，適合規(guī)?；a(chǎn)。
具體實施例方式下面通過具體實施例，對本發(fā)明的技術(shù)方案作進ー步的具體說明。實施例I
⑴將柴胡藥材粗粉碎至10-60目得粉碎物，向粉碎物中加入6倍重量的質(zhì)量濃度為95%こ醇水溶液進行提取得提取液，提取溫度70°C，提取時間2小時，提取3次，將提取液在溫度500C，真空度-0. 06^-0. 09Mpa條件下真空減壓濃縮至含固量為25%得濃縮液，轉(zhuǎn)速4000r/min下離心20min,得沉淀；
⑵取沉淀，用質(zhì)量濃度為95%こ醇水溶液溶解，上Al2O3柱層析，再用質(zhì)量濃度為95%乙醇水溶液洗脫，洗脫劑用量為2倍保留體積，洗脫液真空減壓濃縮至こ醇質(zhì)量濃度在5%以下，在溫度50°C，真空度-0. 06 -0. 09Mpa，真空干燥2. 5小時即得柴胡皂苷a成品。其中Al2O3柱Al2O3的裝柱量為H D=2 1 ；A1203柱上樣量為m樣品:m氧化鋁=1:2。經(jīng)HPLC檢測，洗脫液中柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率即相對收率為80. 96%，柴胡皂苷a成品的純度在88. 4%。柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率計算為(提取物的重量X提取物中柴胡皂苷a的含量)+ (藥材中柴胡皂苷a的含量X藥材的使用量)X 100%即是柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率。實施例2
⑴將柴胡藥材粗粉碎至10-60目得粉碎物，向粉碎物中加入10倍重量的質(zhì)量濃度為60%こ醇水溶液進行提取得提取液，提取溫度100°C，提取時間I小時，提取2次，將提取液在溫度65°C，真空度-0. 06^-0. 09Mpa條件下真空減壓濃縮至含固量為40%得濃縮液，轉(zhuǎn)速7000r/min下離心IOmin,離心2次,得沉淀；
⑵取沉淀，用質(zhì)量濃度為70%こ醇水溶液溶解，上Al2O3柱層析，再用質(zhì)量濃度為70%乙醇水溶液洗脫，洗脫劑用量為6倍保留體積，洗脫液真空減壓濃縮至こ醇質(zhì)量濃度在5%以下，在溫度70°C，真空度-0. 06^-0. 09Mpa，真空干燥I小時即得柴胡皂苷a成品。其中Al2O3柱Al2O3的裝柱量為H :D=10 1 ;A1203柱上樣量為m樣品:m氧化鋁=1:8。經(jīng)HPLC檢測，洗脫液中柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率即相對收率為85. 73%，柴胡皂苷a成品的純度在87. 5%。實施例3
⑴將柴胡藥材粗粉碎至10-60目得粉碎物，向粉碎物中加入7倍重量的質(zhì)量濃度為80%こ醇水溶液進行提取得提取液，提取溫度80°C，提取時間I小時，提取2次，將提取液在溫度600C，真空度-0. 06^-0. 09Mpa條件下真空減壓濃縮至含固量為35%得濃縮液，轉(zhuǎn)速5000r/ min下離心15min,得沉淀；
⑵取沉淀，用質(zhì)量濃度為80%こ醇水溶液溶解，上Al2O3柱層析，再用質(zhì)量濃度為80%乙醇水溶液洗脫，洗脫劑用量為4倍保留體積，洗脫液真空減壓濃縮至こ醇質(zhì)量濃度在5%以下，在溫度60°C，真空度-0. 06^-0. 09Mpa,真空干燥2小時即得柴胡皂苷a成品。其中Al2O3柱Al2O3的裝柱量為H D=5 1 ；A1203柱上樣量為m樣品:m氧化鋁=1:4。經(jīng)HPLC檢測，洗脫液中柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率即相對收率為89. 64%，柴胡皂苷a成品的純度在90. 1%。以上所述的實施例只是本發(fā)明的一種較佳的方案，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，在不超出權(quán)利要求所記載的技術(shù)方案的前提下還有其它的變體及改型。
權(quán)利要求
1.ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于所述的制備方法步驟如下 ⑴將柴胡藥材粗粉碎得粉碎物，向粉碎物中加入6-10倍重量的こ醇水溶液進行提取得提取液，將提取液真空減壓濃縮至含固量為25%-40%得濃縮液，離心，得沉淀； ⑵取沉淀，用こ醇水溶液溶解，上Al2O3柱層析，再用こ醇水溶液洗脫，洗脫液真空減壓濃縮至こ醇質(zhì)量濃度在5%以下，真空干燥即得柴胡皂苷a成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟⑴中粉碎物的大小在10-60目。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟⑴中所述的こ醇水溶液的質(zhì)量濃度為60%-95%。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟(I)中提取的溫度在70-100°C，提取時間1-2小時，提取2-3次。
5.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟(I)和步驟⑵中所述的真空減壓濃縮的條件為溫度50-65°C，真空度-0. 06^-0. 09Mpa。
6.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述的離心是在轉(zhuǎn)速4000-7000r/min下離心10-20min,離心1-2次。
7.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟⑵中所述的こ醇水溶液的質(zhì)量濃度為70%-95%。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟⑵中用こ醇水溶液洗脫時，洗脫劑用量為2倍保留體積至6倍保留體積。
9.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟⑵中所述的Al2O3柱Al2O3的裝柱量為H :D=2-10 1 ；A1203柱上樣量為m樣品:m氧化鋁=1:2-8。
10.根據(jù)權(quán)利要求I或2或3所述的ー種柴胡皂苷a的制備方法，其特征在于步驟⑵中所述的真空干燥條件為 .溫度50-70°C，真空度-0. 06 -0. 09Mpa，干燥時間1-2. 5小吋。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種柴胡皂苷a的制備方法，其目的在于解決現(xiàn)有技術(shù)存在的分離效果不好，柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率不穩(wěn)定且轉(zhuǎn)移率不高，最終獲得的柴胡皂苷a的純度不高的缺陷。本發(fā)明方法為⑴將柴胡藥材粗粉碎得粉碎物，向粉碎物中加入6-10倍重量的乙醇水溶液進行提取得提取液，將提取液真空減壓濃縮至含固量為25%-40%得濃縮液，離心，得沉淀；⑵取沉淀，用乙醇水溶液溶解，上Al2O3柱層析，再用乙醇水溶液洗脫，洗脫液真空減壓濃縮至乙醇質(zhì)量濃度在5%以下，真空干燥即得柴胡皂苷a成品。本發(fā)明柴胡皂苷a的分離效果好，柴胡皂苷a的轉(zhuǎn)移率高，得到的最終產(chǎn)品純度高，提高了藥材的利用度，工藝穩(wěn)定，適合規(guī)?；a(chǎn)。
文檔編號C07J63/00GK102643323SQ201210088649
公開日2012年8月22日 申請日期2012年3月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月30日
發(fā)明者孫振蛟, 李銳, 汪俊, 王財林, 程國才, 謝繼才 申請人:寧波立華植物提取技術(shù)有限公司