專利名稱：一種豐花草堿的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種植物有效成分的提取方法，具體來說是ー種豐花草堿的提取方法。
背景技術(shù)：
豐花草喊(Borrerine),分子式為C16H2tlON2,分子量為240. 35,是從菌草科(Rubiaceae)輪生豐花草iferreria verticillata (L. ) G. F. ff. Meyer 地上部分中提取分離的一種咔啉生物堿類化合物。實(shí)驗(yàn)研究表明，豐花草堿具有抗微生物活性，對(duì)金黃色葡萄球菌和某些腸桿菌有活性；具有細(xì)胞毒活性，在3-6μ g/ml時(shí)有高度細(xì)胞毒活性。目前，國(guó)內(nèi)尚未見豐花草堿的提取純化方法方面的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種豐花草堿的提取方法，エ藝操作簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)エ業(yè)化生產(chǎn)。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是這樣來實(shí)現(xiàn)的
(1)將輪生豐花草地上部分粉碎，用5-10倍量70-95%的こ醇溶液，25-55°C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取20-100min，得到こ醇提取液；
(2)上述提取液加入其體積的O.8-1. 2%的活性炭40-60°C下保溫脫色20_50min，過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物；
(3)上述粗提物采用高速逆流色譜對(duì)粗提物進(jìn)行分離純化，以氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，紫外在線檢測(cè)，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得高純度豐花草堿產(chǎn)品。所述步驟(I)中超聲頻率為40-80KHZ。所述步驟(3)中氯仿-甲醇-水的體積比為9-11:3-5:7-9。所述步驟(3)中紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm。本發(fā)明采用高速逆流色譜法對(duì)豐花草堿進(jìn)行分離純化，與以往的技術(shù)手段相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)分離能力強(qiáng)、時(shí)間段、樣品損失少，以及分離和純化同步進(jìn)行，實(shí)現(xiàn)了エ業(yè)化目的。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)ー步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :
取輪生豐花草地上部分，粉碎，取5kg，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備頭部進(jìn)料ロ進(jìn)料，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備尾部溶劑加入ロ加入10倍95%こ醇溶液，55 °C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取20min，超聲頻率為80KHz，得到提取液，加入其體積的I. 2%的活性炭60°C下保溫脫色20min,過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物，以體積比為9:3:8氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混和，靜置分相，兩相分別超聲波脫氣25min，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗提物溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中，注入高速逆流色譜儀，紫外在線檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得產(chǎn)品I. 3g，含量為98. 8%。實(shí)施例2:
取輪生豐花草地上部分，粉碎，取5kg，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備頭部進(jìn)料ロ進(jìn)料，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備尾部溶劑加入ロ加入6倍70%こ醇溶液，35°C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取50min，超聲頻率為50KHz，得到提取液，加入其體積的1%的活性炭50°C下保溫脫色30min，過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物，以體積比為9:3:7氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混和，靜置分相，兩相分別超聲波脫氣25min，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗提物溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中，注入高速逆流色譜儀，紫外在線檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得產(chǎn)品I. 9g，含量為98. 5%。實(shí)施例3:
取輪生豐花草地上部分，粉碎，取5kg，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備頭部進(jìn)料ロ進(jìn)料，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備尾部溶劑加入ロ加入10倍80%こ醇溶液，45 °C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取lOOmin，超聲頻率為60KHz，得到提取液，加入其體積的1%的活性炭50°C下保溫脫色30min,過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物，以體積比為9:4:8氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混和，靜置分相，兩相分別超聲波脫氣20min，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗提物溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中，注入高速逆流色譜儀，紫外在線檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得產(chǎn)品2. 3g，含量為98. 6%。實(shí)施例4:
取輪生豐花草地上部分，粉碎，取5kg，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備頭部進(jìn)料ロ進(jìn)料，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備尾部溶劑加入ロ加入5倍80%こ醇溶液，25°C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取80min，超聲頻率為40KHz，得到提取液，加入其體積的O. 8%的活性炭55°C下保溫脫色40min，過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物，以體積比為10:3:9氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混和，靜置分相，兩相分別超聲波脫氣30min，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗提物溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中，注入高速逆流色譜儀，紫外在線檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得產(chǎn)品2. 5g，含量為98. 3%。實(shí)施例5:
取輪生豐花草地上部分，粉碎，取10kg，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備頭部進(jìn)料ロ進(jìn)料，從連續(xù)逆流超聲提取設(shè)備尾部溶劑加入ロ加入12倍90%こ醇溶液，55°C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取20min，超聲頻率為80KHz，得到提取液，加入其體積的O. 8%的活性炭40°C下保溫脫色50min，過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物，以體積比為11:5:9氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，將其充分混和，靜置分相，兩相分別超聲波脫氣20min，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗提物溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中，注入高速逆流色譜儀，紫外在線檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶， 濾出結(jié)晶干燥即得產(chǎn)品6. 2g，含量為98. 0%。
權(quán)利要求
1.一種豐花草堿的提取方法，其特征在于包括以下步驟 (1)將輪生豐花草地上部分粉碎，用5-10倍量70-95%的乙醇溶液，25-55°C下進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取20-100min，得到乙醇提取液； (2)上述提取液加入其體積的0.8-1. 2%的活性炭40-60°C下保溫脫色20_50min，過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物； (3)上述粗提物采用高速逆流色譜對(duì)粗提物進(jìn)行分離純化，以氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng)，紫外在線檢測(cè)，收集目標(biāo)流分，濃縮干燥，用丙酮回流溶解，趁熱過濾，放冷結(jié)晶，濾出結(jié)晶干燥即得高純度豐花草堿產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種豐花草堿的提取方法，其特征在于所述步驟(I)中超聲頻率為 40-80KHz。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種豐花草堿的提取方法，其特征在于所述步驟(3)中氯仿-甲醇-水的體積比為9-11:3-5:7-9。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述一種豐花草堿的提取方法，其特征在于所述步驟(3)中紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為226nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種豐花草堿的提取方法。方法包括以下步驟將輪生豐花草地上部分粉碎，用70-95%的乙醇溶液連續(xù)逆流超聲提取，得到提取液，加入活性炭脫色，過濾得到脫色液，脫色液濃縮干燥得到粗提物，采用高速逆流色譜對(duì)粗提物進(jìn)行分離純化，結(jié)晶得到豐花草堿產(chǎn)品。本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單易操作，污染小，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07D471/04GK102649791SQ201210122780
公開日2012年8月29日 申請(qǐng)日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司