專利名稱:一種二氫柯楠因堿的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬于中藥提取分離技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及一種二氫柯楠因堿的提取方法。
背景技術(shù):
二氫柯楠因減是菌草科(Rubiaceae)胼胝葉鉤藤callophylla Korth.莖中的活性成分,為咔啉類生物堿,無色棒狀結(jié)晶(乙醚),分子式C22H28N2O3,結(jié)構(gòu)式
OgC\
O 。
'COOCH3
H二氫柯楠因堿具有以下生物活性(I)降壓作用,靜脈注射本品O. 5-5. Omg/kg,能有效降低清醒或麻醉大鼠的動脈壓。(2)對刺毀腦脊髓的(pithed)大鼠具有a-腎上腺受體阻斷活性。(3)小鼠LD50 (腹腔注射)為89mg/kg。經(jīng)文獻檢索,尚未發(fā)現(xiàn)二氫柯楠因堿的工業(yè)提取純化方法的相關(guān)報道。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種二氫柯楠因堿的提取方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案加以實現(xiàn)的
(1)將胼胝葉鉤藤莖粉碎,加O.5-1%鹽酸或硫酸水溶液浸泡3-6h,超聲處理20-45min,過濾得到提取液;
(2)提取液調(diào)節(jié)pH至7-8,加入超濾膜超濾,再加入納濾膜納濾,得到濃縮液;
(3)濃縮液調(diào)pH9-ll,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品;
(4)粗品采用高速逆流色譜分離,紫外在線檢測,收集目標成分,低溫干燥即得二氫柯楠因堿產(chǎn)品。所述步驟(2)超濾膜為截留分子量為3000-6000的超濾膜,納濾膜為截留分子量為200-500的納濾膜。所述步驟(4)中高速逆流色譜流動相為氯仿-甲醇-水,體積比為7-9:3-4:7-8,紫外檢測波長為227nm。本發(fā)明的優(yōu)點在于
(I)本發(fā)明采用酸水浸提,有效減少雜質(zhì)的溶出,超聲處理,能更好地溶出有效成分,效
率聞;(2)采用膜分離能濾除多種雜質(zhì),屬物理除雜,不影響有效成分的性質(zhì);
(3)高速逆流色譜具有提取量大、產(chǎn)品純度高、簡單易行等優(yōu)點,可產(chǎn)業(yè)規(guī)?;?br>
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行說明。實施例I :
將胼胝葉鉤藤莖粉碎,取1kg,加1%鹽酸水溶液浸泡3h,超聲處理40min,過濾得到提取液,調(diào)節(jié)PH至7,加入截留分子量為3000的超濾膜超濾,再加入截留分子量為200的納濾膜納濾,得到濃縮液,調(diào)PH10,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品;以體積比為9:3:8氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng),將其充分混和,靜置分相,兩相分別超聲波脫氣 25min,上相為固定相,下相為流動相,將粗品溶于兩相(上相與下相體積比為I: I)混合溶液中,注入高速逆流色譜儀,紫外在線檢測,檢測波長為227nm,收集目標成分,低溫干燥,得到純度為96. 5%的二氫柯楠因堿。實施例2:
將胼胝葉鉤藤莖粉碎,取1kg,加O. 5%硫酸水溶液浸泡6h,超聲處理45min,過濾得到提取液,調(diào)節(jié)PH至8,加入截留分子量為5000的超濾膜超濾,再加入截留分子量為500的納濾膜納濾,得到濃縮液,調(diào)PH9,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品;以體積比為9:4:8氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng),將其充分混和,靜置分相,兩相分別超聲波脫氣20min,上相為固定相,下相為流動相,將粗品溶于兩相(上相與下相體積比為I: I)混合溶液中,注入高速逆流色譜儀,紫外在線檢測,檢測波長為227nm,收集目標成分,低溫干燥,得到純度98. 2%的二氫柯楠因堿。實施例3:
將胼胝葉鉤藤莖粉碎,取5kg,加O. 8%硫酸水溶液浸泡6h,超聲處理35min,過濾得到提取液,調(diào)節(jié)PH至8,加入截留分子量為5000的超濾膜超濾,再加入截留分子量為300的納濾膜納濾,得到濃縮液,調(diào)PH11,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品;以體積比為8:3:7氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng),將其充分混和,靜置分相,兩相分別超聲波脫氣25min,上相為固定相,下相為流動相,將粗品溶于兩相(上相與下相體積比為I: I)混合溶液中,注入高速逆流色譜儀,紫外在線檢測,檢測波長為227nm,收集目標成分,低溫干燥,得到純度96. 6%的二氫柯楠因堿。實施例4:
將胼胝葉鉤藤莖粉碎,取10kg,加O. 5%鹽酸水溶液浸泡5h,超聲處理20min,過濾得到提取液,調(diào)節(jié)PH至8,加入截留分子量為6000的超濾膜超濾,再加入截留分子量為300的納濾膜納濾,得到濃縮液,調(diào)PH10,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品;以體積比為7:3:7氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng),將其充分混和,靜置分相,兩相分別超聲波脫氣30min,上相為固定相,下相為流動相,將粗品溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中,注入高速逆流色譜儀,紫外在線檢測,檢測波長為227nm,收集目標成分,低溫干燥,得到純度95. 5%的二氫柯楠因堿。實施例5:
將胼胝葉鉤藤莖粉碎,取10kg,加O. 8%鹽酸水溶液浸泡4h,超聲處理40min,過濾得到提取液,調(diào)節(jié)PH至8,加入截留分子量為6000的超濾膜超濾,再加入截留分子量為300的納濾膜納濾,得到濃縮液,調(diào)PH10,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品;以體積比為7:3:7氯仿-甲醇-水為兩相溶劑系統(tǒng),將其充分混和,靜置分相,兩相分別超聲波脫氣20min,上相為固定相,下相為流動相,將粗品溶于兩相(上相與下相體積比為1:1)混合溶液中,注入高速逆流色譜儀,紫外在線檢測,檢測波長為227nm,收集目標成分, 低溫干燥,得到純度98. 7%的二氫柯楠因堿。
權(quán)利要求
1.一種ニ氫柯楠因堿的提取方法,其特征在于包括以下步驟 (1)將胼胝葉鉤藤莖粉碎,加O.5-1%鹽酸或硫酸水溶液浸泡3-6h,超聲處理20-45min,過濾得到提取液; (2)提取液調(diào)節(jié)pH至7-8,加入超濾膜超濾,再加入納濾膜納濾,得到濃縮液; (3)濃縮液調(diào)pH9-ll,用氯仿萃取,取有機層,回收氯仿,干燥得到粗品; (4)粗品采用高速逆流色譜分離,紫外在線檢測,收集目標成分,低溫干燥即得ニ氫柯楠因堿產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種ニ氫柯楠因堿的提取方法,其特征在于所述步驟(2)超濾膜為截留分子量為3000-6000的超濾膜,納濾膜為截留分子量為200-500的納濾膜。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種ニ氫柯楠因堿的提取方法,其特征在于所述步驟(4)中高速逆流色譜流動相為氯仿-甲醇-水,體積比為7-9:3-4:7-8,紫外檢測波長為227nm。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種二氫柯楠因堿的提取方法,它是將胼胝葉鉤藤莖粉碎,加0.5-1%鹽酸或硫酸水溶液提取,提取液調(diào)節(jié)pH至7-8,加入超濾膜超濾,再加入納濾膜納濾,濃縮液調(diào)pH9-11,用氯仿萃取,萃取液濃縮干燥得到粗提物,采用高速逆流色譜對粗提物進行分離純化,紫外在線檢測,收集目標成分,低溫干燥即得二氫柯楠因堿產(chǎn)品。本發(fā)明能耗低,污染少,產(chǎn)品含量高,可達95%以上,既適合小型實驗,也可以用于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07D471/14GK102659781SQ201210122809
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司