專利名稱：一種叉蕊皂甙Ⅲ的提取分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域，尤其涉及一種叉蕊皂甙III的提取分離方法。
背景技術(shù)：
叉蕊阜式III(Agapanthussaponin A)屬甾體阜苷類，分子式為C45H72O16,分子量869. 06，溶于正丁醇、甲醇、乙醇，不溶于丙酮。叉蕊皂甙III具有抗炎作用和降血糖活性。叉蕊阜式III主要來源于百合科(Liliaceae)闊葉土麥冬Ziriope p IatyphyI la Wang et Tang的地下部分。目前，國(guó)內(nèi)尚未見叉蕊皂甙III的工業(yè)提取純化方法的相關(guān)文獻(xiàn)和專利的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種叉蕊皂甙III的提取分離方法，該方法操作簡(jiǎn)
單，廣品含量聞。本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的
(1)取闊葉土麥冬的地下部分粉碎，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)?br> (2)原料殘?jiān)屑尤?0-80%乙醇溶液微波提取1-3次，過濾得到提取液；
(3 )提取液濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入1-3倍量的水飽和正丁醇萃取2-3次，合并萃取液加O. 5-1倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品；
(4)以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(6-8:2-4:5-7:4-6)作為兩相溶劑系統(tǒng)，混勻后置分液漏斗中靜置分層，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，注入高速逆流色譜儀，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品。所述步驟(I)中超臨界CO2萃取溫度為40_60°C，萃取壓力為15_25MPa，解析溫度為30-50°C，解析壓力為5-9MPa，CO2流量為18_20L/h。所述步驟(2)中微波提取功率為600-800W。所述步驟(4)中高速逆流色譜儀轉(zhuǎn)速750-900r/min,流動(dòng)相流速I. 5-2. 5ml/min。本發(fā)明的積極效果是
1)采用超臨界CO2萃取雜質(zhì)，因?yàn)椴嫒镌磉癐II不易被萃取出，而小分子和低極性的物質(zhì)，很容易被萃取出，這種除雜方式操作簡(jiǎn)便，而且周期較短；
2)高速逆流色譜法分離無需使用載體，減少了操作過程中樣品的損失，分離效果好，制備量大。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施例。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I :闊葉土麥冬的地下部分粉碎，稱取3kg，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取溫度為60°C，萃取壓力為25MPa，解析溫度為50°C，解析壓力為9MPa，CO2流量為20L/h，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)尤?0%乙醇溶液微波提取3次，微波提取功率為800w，過濾得到提取液，濃 縮至浸膏，加適量水分散后，加入3倍量的水飽和正丁醇萃取2次，合并萃取液加O. 5倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(8:4:7:6)作為兩相溶劑系統(tǒng),混勻后置分液漏斗中靜置分層，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，每次進(jìn)樣量為150mg，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為850r/min，流動(dòng)相流速為2. 5ml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品
0.8g，含量 99. 0%。實(shí)施例2:
闊葉土麥冬的地下部分粉碎，稱取3kg，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取溫度為40°C，萃取壓力為15MPa，解析溫度為30°C，解析壓力為5MPa，CO2流量為18L/h，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)?，加?0%乙醇溶液微波提取3次，微波提取功率為600w，過濾得到提取液，濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入I倍量的水飽和正丁醇萃取3次，合并萃取液加I倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(6:4:7:6)作為兩相溶劑系統(tǒng),混勻后置分液漏斗中靜置分層,取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，每次進(jìn)樣量為200mg，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為SOOr/min，流動(dòng)相流速為2. Oml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品
1.lg，含量 98. 7%。實(shí)施例3:
闊葉土麥冬的地下部分粉碎，稱取3kg，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取溫度為50°C，萃取壓力為20MPa，解析溫度為40°C，解析壓力為7MPa，CO2流量為20L/h，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)?，加?0%乙醇溶液微波提取2次，微波提取功率為800w，過濾得到提取液，濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入2倍量的水飽和正丁醇萃取2次，合并萃取液加O. 8倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(7:3:6:5)作為兩相溶劑系統(tǒng),混勻后置分液漏斗中靜置分層，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，每次進(jìn)樣量為250mg，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為SOOr/min，流動(dòng)相流速為2. Oml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品
1.3g，含量 98. 1%。實(shí)施例4:
闊葉土麥冬的地下部分粉碎，稱取10kg，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取溫度為55°C，萃取壓力為22MPa，解析溫度為45°C，解析壓力為7MPa，CO2流量為20L/h，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)?，加?0%乙醇溶液微波提取2次，微波提取功率為600w，過濾得到提取液，濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入2倍量的水飽和正丁醇萃取2次，合并萃取液加O. 6倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(7:4:7:6)作為兩相溶劑系統(tǒng),混勻后置分液漏斗中靜置分層，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，每次進(jìn)樣量為250mg，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為750r/min，流動(dòng)相流速為2. 5ml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品
2.6g，含量 99. 3%ο
實(shí)施例5:
闊葉土麥冬的地下部分粉碎，稱取20kg，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，萃取溫度為50°C，萃取壓力為18MPa，解析溫度為40°C，解析壓力為6MPa，CO2流量為18L/h，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)尤?0%乙醇溶液微波提取2次，微波提取功率為800w，過濾得到提取液，濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入3倍量的水飽和正丁醇萃取3次，合并萃取液加I倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品；以石油醚-乙酸乙酯-乙醇-水(8:3:5:5)作為兩相溶劑系統(tǒng),混勻后置分液漏斗中靜置分層,取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，通過進(jìn)樣閥進(jìn)樣，每次進(jìn)樣量為150mg，設(shè)定色譜儀轉(zhuǎn)速為900r/
min，流動(dòng)相流速為I. 5ml/min，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品7. 6g，含量 98. 7%。
權(quán)利要求
1.ー種叉蕊皂甙III的提取分離方法，其特征在于包含以下步驟 (1)取闊葉土麥冬的地下部分粉碎，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)? (2)原料殘?jiān)屑尤?0-80%こ醇溶液微波提取1-3次，過濾得到提取液； (3)提取液濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入1-3倍量的水飽和正丁醇萃取2-3次，合并萃取液加O. 5-1倍量丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品； (4)以石油醚-こ酸こ酷-こ醇-水(6-8:2-4:5-7:4-6)作為兩相溶劑系統(tǒng)，混勻后置分液漏斗中靜置分層，取上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將粗品用下相溶解，注入高速逆流色譜儀，收集高含量叉蕊皂甙III流分，濃縮干燥即得叉蕊皂甙III產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求I所述的叉蕊皂甙III的提取分離方法，其特征在于所述步驟(I)中超臨界CO2萃取溫度為40-60°C，萃取壓カ為15-25MPa，解析溫度為30_50°C，解析壓カ為5-9MPa, CO2 流量為 18_20L/h。
3.如權(quán)利要求2所述的叉蕊皂甙III的提取分離方法，其特征在于所述步驟(2)中微波提取功率為600-800w。
4.如權(quán)利要求2所述的叉蕊皂甙III的提取分離方法，其特征在于所述步驟(4)中高速逆流色譜儀轉(zhuǎn)速750-900r/min,流動(dòng)相流速I. 5-2. 5ml/min。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種叉蕊皂甙Ⅲ的提取分離方法，方法是將闊葉土麥冬的地下部分粉碎，加入超臨界萃取釜中進(jìn)行超臨界CO2萃取，脫除油脂類物質(zhì)，放出原料殘?jiān)尤?0-80%乙醇溶液微波提取，提取液濃縮至浸膏，加適量水分散后，加入水飽和正丁醇萃取2-3次，合并萃取液加丙酮沉淀，過濾，濾液濃縮干燥得到粗品，再采用高速逆流色譜法對(duì)粗品進(jìn)行分離純化，得到叉蕊皂甙Ⅲ。本方法制備量大，樣品損失少，生產(chǎn)周期短，效率高，污染小，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C07J71/00GK102659908SQ201210122810
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司