專利名稱：一種奧古斯堿的純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種奧古斯堿的純化方法，特別是涉及一種應(yīng)用超臨界CO2萃取和高速逆流色譜提取純化奧古斯堿的方法。
背景技術(shù)：
奧古斯堿為異喹啉生物堿,分子式C17H19NO4,無色棱晶(苯),mp. 174_176°C。奧古斯堿具有細胞毒活性，對多種癌細胞(BCA-1、HT-1080、LUC-1、MEL-2、C0L-2、KB、P-388、A-431、LNCaP、ZR-75-l、U-373)呈細胞毒活性；對氯喹敏感或耐氯喹的瘧原蟲都有抗瘧活性。奧古斯堿來源于石蒜科奧古斯文殊蘭(Cri/augustum Rox.)植物的全株,現(xiàn)代研究中很少見奧古斯堿的研究報道，該物質(zhì)的相關(guān)研究尚處于起步階段。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是填補該領(lǐng)域的空白，提供一種高純度奧古斯堿的純化方法，該方法產(chǎn)品收率高、含量高。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案如下
一種奧古斯堿的純化方法，其特征在于包括以下步驟以石蒜科植物奧古斯文殊蘭的全株為原料，粉碎，加入堿性醇浸潤2-8小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至8-10，沉淀物以四氯化碳-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離，減壓干燥即得高含量奧古斯堿。所述堿性醇為pH9-12的90-99%乙醇溶液。所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40_60°C，萃取壓力為25_42MPa，CO2流量為20-38L/h，萃取時間為l_3h，分離釜I溫度為35-45°C，壓力為10_18MPa，分離釜II溫度為 25_35°C，壓力為 6_10MPa。所述的四氯化碳-甲醇-水比例為18-21 17-20 :2_3。本發(fā)明的積極效果在于
1)方法采用超臨界CO2萃取，提取時間短，效率高，CO2重復(fù)利用，是一種環(huán)保無污染的方法；
2)方法采用高速逆流色譜分離，沒有產(chǎn)品損失，是一種高效分離方法，制備周期短，試劑可以重復(fù)利用，制備量大。下面將結(jié)合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。
具體實施例方式實施例I :
取Ikg奧古斯文殊蘭的全株，粉碎，加入pH9的90%乙醇浸潤6小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，調(diào)節(jié)萃取溫度為40°C，萃取壓力為38MPa，CO2流量為38L/h，萃取3h，調(diào)節(jié)分離釜I溫度為35°C，壓力為lOMPa，分離釜II溫度為25°C，壓力為6MPa，在分離釜中收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至9，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按(18 18 3)比例混合，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)900r/min，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，收集奧古斯堿流分，減壓干燥得白色奧古斯堿173mg，高效液相檢測，含量98. 3%。實施例2: 取Ikg奧古斯文殊蘭的全株，粉碎，加入pH12的99%乙醇浸潤2小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，調(diào)節(jié)萃取溫度為60°C，萃取壓力為25MPa，C(V流量為20L/h，萃取lh，調(diào)節(jié)分離釜I溫度為45°C，壓力為18MPa，分離釜II溫度為35°C，壓力為lOMPa，在分離釜中收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至8，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按(18 20 2)比例混合，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)950r/min，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，收集奧古斯堿流分，減壓干燥得白色奧古斯堿155mg,高效液相檢測,含量98. 0%。實施例3:
取IOkg奧古斯文殊蘭的全株，粉碎，加入pHIO的95%乙醇浸潤4小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，調(diào)節(jié)萃取溫度為50°C，萃取壓力為35MPa，C(V流量為35L/h，萃取2h，調(diào)節(jié)分離釜I溫度為38°C，壓力為15MPa，分離釜II溫度為28°C，壓力為8MPa，在分離釜中收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至9，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按(18 17 2)比例混合，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)850r/min，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，收集奧古斯堿流分，減壓干燥得白色奧古斯堿944mg，高效液相檢測，含量98. 8%。實施例4:
取IOkg奧古斯文殊蘭的全株，粉碎，加入PHll的92%乙醇浸潤8小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，調(diào)節(jié)萃取溫度為55°C，萃取壓力為42MPa，CO2流量為33L/h，萃取
1.5h，調(diào)節(jié)分離釜I溫度為38°C，壓力為13MPa，分離釜II溫度為27°C，壓力為7MPa，在分離釜中收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至8，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按(21 203)比例混合，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)950r/min，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，收集奧古斯堿流分，減壓干燥得白色奧古斯堿1465mg，高效液相檢測，含量98. 7%。實施例5:
取IOkg奧古斯文殊蘭的全株,粉碎，加入pHll的99%乙醇浸潤5小時，加入萃取爸中，采用超臨界CO2萃取，調(diào)節(jié)萃取溫度為48°C，萃取壓力為33MPa，CO2流量為35L/h，萃取
2.5h，調(diào)節(jié)分離釜I溫度為42°C，壓力為18MPa，分離釜II溫度為32°C，壓力為6MPa，在分離釜中收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至10，收集沉淀物，取四氯化碳、甲醇、水，按(20 20 3)比例混合，以下相為固定相，上相為流動相，開啟高速逆流色譜儀，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)800r/min，取上相溶解沉淀物注入色譜儀，收集奧古斯堿流分，減壓干燥得白色奧古斯堿1714mg，高效液相檢測，含量97. 2%。
權(quán)利要求
1.ー種奧古斯堿的純化方法，其特征在于包括以下步驟以石蒜科植物奧古斯文殊蘭的全株為原料，粉碎，加入堿性醇浸潤2-8小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集萃取物，用3%鹽酸水溶液溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至8-10，沉淀物以四氯化碳-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離，減壓干燥即得高含量奧古斯堿。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述奧古斯堿的純化方法，其特征在于所述堿性醇為PH9-12的90-99%こ醇溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述奧古斯堿的純化方法，其特征在于所述超臨界CO2萃取條件為萃取溫度為40-60°C，萃取壓カ為25-42MPa，C02i量為20_38L/h，萃取時間為l_3h，分離釜I溫度為35-45°C，壓カ為10-18MPa，分離釜II溫度為25_35°C，壓カ為6_10MPa。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述奧古斯堿的純化方法，其特征在于所述的四氯化碳-甲醇-水比例為 18-21 17-20 :2-3。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種奧古斯堿的純化方法。方法是以石蒜科植物奧古斯文殊蘭的全株為原料，粉碎，加入堿性醇浸潤2-8小時，加入萃取釜中，采用超臨界CO2萃取，收集萃取物，用酸水溶解，過濾，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH至8-10，沉淀物以四氯化碳-甲醇-水為溶劑系統(tǒng)，采用高速逆流色譜儀分離，減壓干燥即得高含量奧古斯堿。該方法適合高含量奧古斯堿的制備。
文檔編號C07D491/22GK102659799SQ20121012283
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者萬冬梅, 劉東鋒 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司