專利名稱：一種純化細梗香草皂苷b的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種純化細梗香草皂苷B的方法，特別是涉及一種利用高速逆流色譜法純化細梗香草皂苷B的高效方法。
背景技術：
細梗香草為報春花科植物細梗香草的全草，又叫排香、香排草、排草香、香草(《四川中藥志》)，毛柄珍珠菜(《廣西植物名錄》)。分布于我國的西南、華南地區(qū)，民間用于治療感冒咳喘、風濕痛、月經不調、神經衰弱、補虛、驅蛔。通過對細梗香草的化學成分的研究，發(fā)現皂苷和黃酮是該植物中的主要成分，此外還有揮發(fā)油、留醇類化合物，所含的皂苷有很好的抗腫瘤效果，其中細梗香草皂苷B含量較高。細梗香草阜苷B (capilliposide B)為三職阜苷類物質，白色無定形粉末，mp. 236-238°C，分子式C58H96024，分子量1167. 7，具有對卵巢癌腫瘤有抑制作用。通過文獻檢索，純化細梗香草皂苷B的方法，一般采用硅膠柱或凝膠柱分離。如田景奎等采用的方法是細梗香草的乙醇提取物，經過大孔樹脂處理后，再用硅膠柱和凝膠柱處理得到了包括細梗香草皂苷B在內的多種成分。如上所述，現有這些方法操作復雜，單純的反復結晶很難得到高純度細梗香草皂苷B，而采用硅膠柱和凝膠柱分離，試劑用量大，樣品得率低，周期較長，在放大過程很難重現，對人員技術水平要求較高。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是克服現有技術的缺陷和不足，提供一種高效、簡單的純化細梗香草皂苷B的方法。本發(fā)明的目的是通過以下技術方案來實現的
一種純化細梗香草皂苷B的方法，其特征在于以下步驟
1)取細梗香草原料粉碎，乙醇回流提取，提取液濃縮后加適量中性氧化鋁進行干燥，裝柱，用30-80%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮得浸膏；
2)上述浸膏采用高速逆流色譜法純化，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，根據圖譜收集成分，流分干燥即得。所述的高速逆流色譜法分離的溶劑系統(tǒng)可選乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水四元溶劑系統(tǒng)，混合比例3-7:1-3:1-2:4-9，取上相做固定相，下相做流動相。本發(fā)明的優(yōu)點是方法采用了高速逆流色譜法純化，方法簡便易操作，溶劑用量小，樣品無損失，制備量大，一次性可以得到高純度樣品，可連續(xù)制備，而且無污染。
具體實施例方式下面將結合具體實施方式
進一步說明本發(fā)明。實施例I :
細梗香草原料粉碎，取1kg，加8倍量95%乙醇回流提取2次，提取液濃縮后加200g中性氧化鋁進行干燥，裝柱，用1L60%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮得浸膏。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水溶劑，按比例5:1:2:6混合，充分分層后，取上相做固定相注滿高速逆流色譜管，轉動主機750rpm，泵入下相做流動相，待動態(tài)平衡后，流速調整為3ml/min，同時用流動相溶解浸膏，由進樣閥進樣，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，根據圖譜收集目標成分，連續(xù)制備，回收試劑，減壓干燥得白色粉末地榆皂苷II. 2g，經HPLC檢測，含量98. 6%。 實施例2:
細梗香草原料粉碎，取1kg，加8倍量80%乙醇回流提取2次，提取液濃縮后加200g中性氧化鋁進行干燥，裝柱，用1L80%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮得浸膏。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水溶劑，按比例7:2:3:9混合，充分分層后，取上相做固定相注滿高速逆流色譜管，轉動主機900rpm，泵入下相做流動相，待動態(tài)平衡后，流速調整為2ml/min，同時用流動相溶解浸膏，由進樣閥進樣，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，根據圖譜收集目標成分，連續(xù)制備， 回收試劑，減壓干燥得白色粉末地榆皂苷II. 4g，經HPLC檢測，含量96. 7%。
權利要求
1.一種純化細梗香草皂苷B的方法，其特征在于以下步驟 1)取細梗香草原料粉碎，乙醇回流提取，提取液濃縮后加適量中性氧化鋁進行干燥，裝柱，用30-80%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮得浸膏； 2)上述浸膏采用高速逆流色譜法純化，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，根據圖譜收集成分，流分干燥即得。
2.根據權利要求I所述的純化細梗香草皂苷B的方法，其特征在于步驟2)中所述的高速逆流色譜法分離的溶劑系統(tǒng)可選乙酸乙酯、丁醇、甲醇和水四元溶劑系統(tǒng)，混合比例3-7:1-3:1-2:4-9，取上相做固定相，下相做流動相。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種純化細梗香草皂苷B的方法。方法如下1)取細梗香草原料粉碎，乙醇回流提取，提取液濃縮后加適量中性氧化鋁進行干燥，裝柱，用30-80%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮得浸膏；2)上述浸膏采用高速逆流色譜法純化，蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測，根據圖譜收集成分，流分干燥即得。采用本方法純化細梗香草皂苷B，工藝操作簡單，制備周期短，溶劑容量少，樣品損失小，適合高純度細梗香草皂苷B的生產。
文檔編號C07H1/08GK102659901SQ20121012445
公開日2012年9月12日 申請日期2012年4月26日 優(yōu)先權日2012年4月26日
發(fā)明者劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司