專利名稱：一種從穿地龍中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，涉及提取原薯蕷皂苷、薯蕷皂苷的方法，具體涉及一種從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法。
背景技術(shù)：
穿地龍，又名穿山龍，是薯蕷科植物穿龍薯蕷的根莖，多年生草本植物。性平、味苦，具有活血舒筋，消食利水，祛痰截瘧。治風(fēng)寒濕痹，慢性氣管炎，消化不良，勞損扭傷，瘧疾，癰腫等功效。民間用其治療筋骨麻木和腰酸腿疼。近代研究證明，穿地龍有調(diào)節(jié)免疫、改善心血管功能、鎮(zhèn)咳、祛痰、平喘等多種藥理作用。其中，穿地龍治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、冠心病心絞痛、慢性氣管炎、慢性布魯氏菌病、脂肪瘤療效較好。穿地龍主要成分為留體皂苷，包括薯蕷皂苷、纖維皂苷和水溶性皂苷。其中水溶性皂苷主要指原薯蕷皂苷，原薯蕷皂苷具有很強的生物活性，如增強男性性功能，對多種癌 細胞有毒殺作用，有降血脂，抗白血病等功效。該物質(zhì)的生物活性已引起中外學(xué)者的廣泛關(guān)注，很多學(xué)者對此化合物的生物活性、藥理作用和全合成開展了卓有成效的工作。除此之外，穿地龍中另一種重要的成分薯蕷皂苷也具有較強的生物活性，薯蕷皂苷具有抗癌、殺菌、殺蟲、消炎等功效，此外薯蕷皂苷還是生產(chǎn)薯蕷皂苷元的基本原料，薯蕷皂苷元是合成甾體激素類藥物和載體避孕藥的基本醫(yī)藥化工原料?，F(xiàn)有報道的文獻、專利大多針對于薯蕷皂苷或其水解產(chǎn)物薯蕷皂素的分離方法，對于原薯蕷皂苷提取純化的方案極少，高含量原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的報道近乎沒有，更未見綜合開發(fā)兩種產(chǎn)品的方案。目前見載于文獻的關(guān)于原薯蕷皂苷的制備方法主要是化學(xué)合成方法，雖然取得了一定的進展，但是技術(shù)難度高、設(shè)備復(fù)雜，且合成出來的產(chǎn)品純度不高，生物活性相對較低。專利CN101255183A文獻中提出一種從葫蘆巴中提取原薯蕷皂苷的方法，包括原料超聲提取，再分別采用大孔吸附樹脂和硅膠柱層析的方法進行純化分離。該方法工藝繁瑣，同時由于使用層析步驟，所以有效成分收率較低。對于薯蕷皂苷提取技術(shù)的專利文獻較多薯蕷皂苷傳統(tǒng)純化方法是原料提取，再經(jīng)過大孔樹脂純化，例如專利文獻CN1706864A、CN1843371A、CN02146284. 2、CN02146284. 4 和 CN200510016775. 9 公開了利用極性大孔樹脂生產(chǎn)薯蕷皂苷的方法，但是存在吸附量小、解析率低及制得的薯蕷皂苷的含量低的缺點。除此之外通過輔助手段除雜改良大孔樹脂吸附法，例如專利CN101333241A從中藥盾葉薯蕷中提取薯蕷皂苷的方法，采用酶解除雜，采用弱極性大孔樹脂富集薯蕷皂苷；專利CN101705275A采用超聲波輔助提取，加入表面活性劑，在通過大孔樹脂純化技術(shù)得到純度較高的薯蕷皂苷。上述方法同樣存在收率低，且操作較為困難等缺點。專利文獻CN1008938中的方案是以含薯蕷皂苷的薯蕷科植物為原料，使用黑曲霉菌發(fā)酵，可聯(lián)合生產(chǎn)薯蕷皂苷和檸檬酸兩項產(chǎn)品。該方法中使用黑曲霉進行發(fā)酵，產(chǎn)生糖化酶來分解淀粉，但因為使用液化酶，使發(fā)酵時間延長很多，且降解不完全，造成過濾困難，不能提高收率。
專利文獻CN1289777公開了一種利用生物技術(shù)由黃姜類植物生產(chǎn)皂苷的工藝，包括細胞膜透析，水解，采用多級管式或柱式耐高溫嗜熱脂肪肝菌類吸附裝置進行吸附，純化結(jié)晶。該方法工藝繁瑣，不適宜工業(yè)化生產(chǎn)。專利文獻CN1394869A公開了一種薯蕷皂苷和薯蕷皂苷元的提取方法，包括脂解酶發(fā)酵；發(fā)酵后分離纖維素、木質(zhì)素；合并濾液，濃縮用乙醇提取，添加乙醚，分步析出皂苷。再將皂苷水解成皂素。采用酶發(fā)酵收率較低，而且時間長。專利文獻CN1415625A公開了一種從穿龍薯蕷或盾葉薯蕷中工業(yè)化提取制備薯蕷皂苷的新方法以及薯蕷皂苷的新用途。將原料采用乙醇回流，調(diào)節(jié)PH值或經(jīng)柱 層析純化，可得到用于中藥新藥研究的原料藥。四種方法，包括醇提，柱層析，重結(jié)晶；氫氧化鈣乙醇提?。灰掖继崛?，吸附劑混合攪拌，用乙酸乙酯-乙醇回流提取，過氧化鋁柱層析；醇提取，活性炭脫色，正丁醇萃取，中低壓柱層析。上述方法均采用了柱層析純化方法，收率較低，生產(chǎn)周期長。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在綜合開發(fā)穿地龍原料，提供一種從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)無法對兩種產(chǎn)品綜合開發(fā)而導(dǎo)致的資源浪費，并且優(yōu)化提取步驟，降低生產(chǎn)成本，提升可操作性。本發(fā)明的技術(shù)思想體現(xiàn)在以下步驟一.原料粉碎，采用有機溶劑同時提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷；二 ·合并提取液，濃縮至比重I. 12左右，過濾，將得到的沉淀采用乙醇溶解后再進行沉淀析出薯蕷皂苷(最好采用丙酮)，過濾得薯蕷皂苷產(chǎn)品。三.對步驟二中過濾得母液進行萃取，萃取液濃縮烘干得粗品，粗品重結(jié)晶，得原薯蕷皂苷產(chǎn)品。為實現(xiàn)以上發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下基本解決方案一種從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，包括以下步驟(I)提取對穿地龍原料進行粉碎得粉碎物，用所述穿地龍原料質(zhì)量的3-10倍量的有機溶劑對粉碎物進行提取，提取溫度為50°C -100°C，得到提取液；本步驟中所述有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿中的一種或任意混合；(2)濃縮對所得的提取液進行濃縮，得到浸膏，浸膏比重I. 05-1. 2 (kg/L);然后過濾，得濾液與沉淀；(3)結(jié)晶將步驟(2)所得沉淀采用1-10倍質(zhì)量的乙醇溶解，溫度30°C _80°C，過濾，濾液中加入濾液體積1/10-1/2的有機溶劑，冰浴放置結(jié)晶，離心分離，真空干燥，得白色粉末，該白色粉末即薯蕷皂苷產(chǎn)品；本步驟中所述有機溶劑為丙酮、氯仿、乙酸乙酯、石油醚的一種或任意混合；(4)萃取對步驟(2)所得濾液，采用乙酸乙酯、氯仿、正丁醇其中一種或任意混合溶液萃取，得到萃取液，將萃取液濃縮烘干，得烘干產(chǎn)品；(5)重結(jié)晶
將步驟(4)所得烘干產(chǎn)品采用3-10倍質(zhì)量的乙酸乙酯、氯仿、乙醇其中一種或任意混合溶液溶解，濃縮至穿地龍原料質(zhì)量O. 5-2倍質(zhì)量的浸膏，冰浴放置結(jié)晶，抽濾，真空干燥，得白色粉末，此白色粉末即原薯蕷皂苷產(chǎn)品?；谏鲜龌炯夹g(shù)方案，本發(fā)明還作了如下優(yōu)化限定上述步驟(3)中所述的有機溶劑優(yōu)選丙酮。上述步驟(I)中優(yōu)選采用80%乙醇(水溶液V/V)對粉碎物進行提取，提取溫度為750C ;步驟(2)中濃縮至浸膏比重為I. 12。上述步驟(3)中，將步驟(2)所得沉淀采用4倍量95%乙醇溶解，溫度75°C ;濾液中加入濾液體積1/5的丙酮。上述步驟(5)中將烘干產(chǎn)品采用5倍質(zhì)量的乙酸乙酯-乙醇混合溶液溶解，其中，采用的混合溶液的體積比為乙酸乙酯乙醇=5:1。 上述步驟(4)中采用的萃取溶劑為正丁醇-乙酸乙酯混合溶液，其體積比為正丁醇乙酸乙酯=2:1。上述步驟(I)中提取條件為7倍量，提取時間2h，2次。上述步驟(5)中濃縮浸膏至穿地龍原料質(zhì)量的O. 8倍。本發(fā)明具有以下優(yōu)點I、將穿地龍原料充分利用，設(shè)計工藝同時生產(chǎn)原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷兩種產(chǎn)品，且產(chǎn)品含量高，生產(chǎn)成本低，節(jié)約生產(chǎn)時間，為中草藥綜合利用領(lǐng)域開辟新的思路。2、原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的提取更加優(yōu)化，過程縮短。利用原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷極性大小的不同，控制提取液濃縮比重，達到一步可將二者很好地分離。3、摒棄大孔樹脂分離方法和柱層析純化方法，縮短了工藝流程，大幅度提高有效成分回收率。4、丙酮對于薯蕷皂苷結(jié)晶有較好的專一性，步驟(3)中采用丙酮能夠最終得到更高含量的薯蕷皂苷。5、原薯蕷皂苷采用混合溶劑萃取，既可避免乳化現(xiàn)象，又可對有效成分進行專一性富集，效果更佳。
具體實施例方式實施例一(I)提取對穿地龍原料進行粉碎得粉碎物，用所述穿地龍原料質(zhì)量的3倍量的甲醇對粉碎物進行提取，提取溫度為95°C，提取時間2h，3次；得到提取液。(2)濃縮對所得的提取液進行濃縮，得到浸膏，浸膏比重I. 05 ;然后過濾，得濾液與沉淀。(3)結(jié)晶將步驟(2)所得沉淀采用2倍量95%乙醇溶解，溫度35°C，過濾，濾液中加入濾液體積1/3的丙酮，冰浴放置結(jié)晶，離心分離，真空干燥，得白色粉末，該白色粉末即薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的薯蕷皂苷含量93. 86%，有效成分回收率91%。(4)萃取
對步驟(2)所得濾液，采用乙酸乙酯萃取，得到萃取液，將萃取液濃縮烘干，得烘干
女口
廣叩ο(5)重結(jié)晶將步驟(4)所得烘干產(chǎn)品采用10倍質(zhì)量的乙酸乙酯-甲醇混合溶液溶解，該混合溶液的體積比為乙酸乙酯甲醇=5:1 ;濃縮至原料量O. 5倍質(zhì)量的浸膏，冰浴放置結(jié)晶，抽濾，真空干燥，得白色粉末，此白色粉末即原薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的原薯蕷皂苷含量95. 43%，有效成分回收率90%。實施例二( I)提取 對穿地龍原料進行粉碎得粉碎物，用所述穿地龍原料質(zhì)量的5倍量的丙酮對粉碎物進行提取，提取溫度為50°C，提取時間2h，2次；得到提取液。(2)濃縮對所得的提取液進行濃縮，得到浸膏，浸膏比重I. 15 ;然后過濾，得濾液與沉淀。(3)結(jié)晶將步驟(2)所得沉淀采用8倍量95%乙醇溶解，溫度50°C，過濾，濾液中加入濾液體積1/8的氯仿，冰浴放置結(jié)晶，離心分離，真空干燥，得白色粉末，該白色粉末即薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的薯蕷皂苷含量92. 22%，有效成分回收率90%.(4)萃取對步驟(2)所得濾液，采用氯仿-正丁醇混合溶液萃取，其中，氯仿正丁醇(體積t匕)=1:1 ;得到萃取液，將萃取液濃縮烘干，得烘干產(chǎn)品；(5)重結(jié)晶將步驟(4)所得烘干產(chǎn)品采用3倍質(zhì)量的氯仿溶解，濃縮至原料量2倍質(zhì)量的浸膏，冰浴放置結(jié)晶，抽濾，真空干燥，得白色粉末，此白色粉末即原薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的原薯蕷皂苷含量93. 85%，有效成分回收率90%。實施例三( I)提取對穿地龍原料進行粉碎得粉碎物，用所述穿地龍原料質(zhì)量的7倍量的80%乙醇對粉碎物進行提取，提取溫度為75°C，提取時間2h，2次；得到提取液。(2)濃縮對所得的提取液進行濃縮，得到浸膏，浸膏比重I. 12 ;然后過濾，得濾液與沉淀。(3)結(jié)晶將步驟(2)所得沉淀采用4倍量95%乙醇溶解，溫度75°C，過濾，濾液中加入濾液體積1/5的丙酮，冰浴放置結(jié)晶，離心分離，真空干燥，得白色粉末，該白色粉末即薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的薯蕷皂苷含量97. 54%，有效成分回收率92%.(4)萃取對步驟(2)所得濾液，采用正丁醇-乙酸乙酯混合溶液(體積比為正丁醇乙酸乙酯=2:1)萃取，得到萃取液，將萃取液濃縮烘干，得烘干產(chǎn)品；(5)重結(jié)晶將步驟(4)所得烘干產(chǎn)品采用5倍質(zhì)量的乙酸乙酯-乙醇混合溶液溶解，其中，采用的混合溶液的體積比為乙酸乙酯乙醇=5:1 ;濃縮至原料量O. 8倍質(zhì)量的浸膏，冰浴放置結(jié)晶，抽濾，真空干燥，得白色粉末，此白色粉末即原薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的原薯蕷皂苷含量98. 01%，有效成分回收率90%。實施例四( I)提取對穿地龍原料進行粉碎得粉碎物，用所述穿地龍原料質(zhì)量 的10倍量的氯仿對粉碎物進行提取，提取溫度為68°C，提取時間3h，3次；得到提取液。(2)濃縮對所得的提取液進行濃縮，得到浸膏，浸膏比重I. 12 ;然后過濾，得濾液與沉淀。(3)結(jié)晶將步驟(2)所得沉淀采用6倍量95%乙醇溶解，溫度90°C，過濾，濾液中加入濾液體積1/10的丙酮，冰浴放置結(jié)晶，離心分離，真空干燥，得白色粉末，該白色粉末即薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的薯蕷皂苷含量94. 33%，有效成分回收率91%(4)萃取 對步驟(2 )所得濾液，采用正丁醇萃取，得到萃取液，將萃取液濃縮烘干，得烘干產(chǎn)品O(5)重結(jié)晶將步驟(4)所得烘干產(chǎn)品采用8倍質(zhì)量的乙酸乙酯-乙醇混合溶液溶解，其中，采用的混合溶液的體積比為乙酸乙酯乙醇=5:1 ;濃縮至與原料量等質(zhì)量的浸膏，冰浴放置結(jié)晶，抽濾，真空干燥，得白色粉末，此白色粉末即原薯蕷皂苷產(chǎn)品。所得的原薯蕷皂苷含量95. 68%，有效成分回收率92%。以上各具體實施例，選取了具體的工藝參數(shù)進行舉例說明，采用前述基本技術(shù)方案中確定的各個工藝參數(shù)范圍內(nèi)任意匹配的具體值，均能夠?qū)崿F(xiàn)較滿意的技術(shù)效果。
權(quán)利要求
1.一種從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，包括以下步驟 (1)提取 對穿地龍原料進行粉碎得粉碎物，用所述穿地龍原料質(zhì)量的3-10倍量的有機溶劑對粉碎物進行提取，提取溫度為50°C -100°C，得到提取液；本步驟中所述有機溶劑為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿中的一種或任意混合； (2)濃縮 對所得的提取液進行濃縮，得到浸膏，浸膏比重I. 05-1. 2 ;然后過濾，得濾液與沉淀； (3)結(jié)晶 將步驟(2)所得沉淀采用1-10倍質(zhì)量的乙醇溶解，溫度30°C _80°C，過濾，濾液中加入濾液體積1/10-1/2的有機溶劑，冰浴放置結(jié)晶，離心分離，真空干燥，得白色粉末，該白色粉末即薯蕷皂苷產(chǎn)品；本步驟中所述有機溶劑為丙酮、氯仿、乙酸乙酯、石油醚的一種或任意混合； (4)萃取 對步驟(2)所得濾液，采用乙酸乙酯、氯仿、正丁醇其中一種或任意混合溶液萃取，得到萃取液，將萃取液濃縮烘干，得烘干產(chǎn)品； (5)重結(jié)晶 將步驟(4)所得烘干產(chǎn)品采用3-10倍質(zhì)量的乙酸乙酯、氯仿、乙醇其中一種或任意混合溶液溶解，濃縮至穿地龍原料質(zhì)量O. 5-2倍質(zhì)量的浸膏，冰浴放置結(jié)晶，抽濾，真空干燥，得白色粉末，此白色粉末即原薯蕷皂苷產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(3)中所述的有機溶劑為丙酮。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(I)中采用80%乙醇對粉碎物進行提取，提取溫度為75°C ;步驟(2)中濃縮至浸膏比重為I. 12。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(3)中，將步驟(2)所得沉淀采用4倍量95%乙醇溶解，溫度75°C;濾液中加入濾液體積1/5的丙酮。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(5)中將烘干產(chǎn)品采用5倍質(zhì)量的乙酸乙酯-乙醇混合溶液溶解，其中，采用的混合溶液的體積比為乙酸乙酯乙醇=5:1。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(4)中采用的萃取溶劑為正丁醇-乙酸乙酯混合溶液，其體積比為正丁醇乙酸乙酯=2:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(I)中提取條件為7倍量，提取時間2h，2次。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法，其特征在于步驟(5)中濃縮浸膏至穿地龍原料質(zhì)量的O. 8倍。
全文摘要
本發(fā)明旨在綜合開發(fā)穿地龍原料，提供一種從穿地龍原料中綜合提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷的方法。本發(fā)明的技術(shù)思想體現(xiàn)在以下步驟一.原料粉碎，采用有機溶劑同時提取原薯蕷皂苷和薯蕷皂苷；二.合并提取液，濃縮至比重1.12左右，過濾，將得到的沉淀采用乙醇溶解后再進行沉淀析出薯蕷皂苷(最好采用丙酮)，過濾得薯蕷皂苷產(chǎn)品。三.對步驟二中過濾得母液進行萃取，萃取液濃縮烘干得粗品，粗品重結(jié)晶，得原薯蕷皂苷產(chǎn)品。本發(fā)明克服了現(xiàn)有技術(shù)無法對兩種產(chǎn)品綜合開發(fā)而導(dǎo)致的資源浪費，并且優(yōu)化提取步驟，降低生產(chǎn)成本，提升可操作性。
文檔編號C07H1/08GK102875635SQ201210323300
公開日2013年1月16日 申請日期2012年9月4日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月4日
發(fā)明者肖紅, 惠玉虎, 王春德, 王曉瑩 申請人:陜西嘉禾植物化工有限責(zé)任公司