專利名稱：制取高Reb-D甜菊糖甙的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種甜菊糖甙的制備及提純技術(shù)，尤其是一種制取高Reb-D甜菊糖甙的方法。
背景技術(shù)：
甜菊糖甙是從菊科草本植物甜葉菊的葉片中提取出來(lái)的一種高甜度、低熱能、味質(zhì)好、安全無(wú)毒的新型天然甜味劑，可廣泛應(yīng)用于食品、飲料、醫(yī)藥、日化工業(yè)等行業(yè)。甜菊糖甙是多組分糖甙混合物，甜度和口感取決于它的糖甙組分及含量。在甜菊糖甙已知的九種組分中，甜菊甙(簡(jiǎn)稱Stv甙)、瑞包迪A甙(簡(jiǎn)稱Reb-A甙)、瑞包迪C甙(簡(jiǎn)稱Reb-C甙) 占絕大部分約92%，而瑞包迪D甙(簡(jiǎn)稱Reb-D甙)相對(duì)含量較少約0. 8%，但是Reb-D甙的甜度最高約為白砂糖的450倍，而且味質(zhì)最好，不含任何不良余味，被業(yè)內(nèi)人士譽(yù)為“甜菊糖甙中的黃金”，售價(jià)也是其他糖甙的3-5倍，是一種最為理想的天然甜味劑。因此，制取含量高的Reb-D甙的甜菊糖甙產(chǎn)品具有廣闊的市場(chǎng)前景。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制取高Reb-D甜菊糖甙的方法。本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是
(a)預(yù)處理將粉碎的甜葉菊葉與50°C— 55°C軟化水混合，連續(xù)逆流萃取，使甜葉菊葉的糖甙萃取率達(dá)到99. 99%以上，制成甜菊糖甙萃取液，萃取液經(jīng)過(guò)絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序后，進(jìn)入下一道工序；
(b)脫鹽將上述濾液用離子交換樹脂脫鹽，得透光率>65%、電導(dǎo)率< 6700us/cm的脫鹽濾液，脫鹽濾液進(jìn)入下一道工序；
(c)吸附采用樹脂吸附上述脫鹽濾液中甜菊糖甙有效成分，到樹脂出甜時(shí)止；
Cd)樹脂處理及洗脫1)樹脂處理用氫氧化鈉稀溶液、鹽酸稀溶液、純水洗樹脂，至流出液PH值達(dá)到7時(shí)止；2)樹脂解析用濃度為30%的乙醇溶液對(duì)樹脂進(jìn)行洗脫，得含Reb-D甙4-5%的洗脫液，洗脫液進(jìn)入下一道工序；
(e)脫色將活性炭置入洗脫液中混合攪拌，經(jīng)過(guò)板框過(guò)濾得含Reb-D甙5-6%的脫色液，脫色液進(jìn)入下一道工序；
(f)離子交換脫色液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹脂和陰離子交換樹脂除雜后，得含Reb-D甙6-7%的交換液，交換液進(jìn)入下一道工序；
(g)納濾濃縮交換液經(jīng)過(guò)納濾膜濃縮過(guò)濾得糖甙濃度為25%— 30%的濃縮液，濃縮液進(jìn)入下一道工序；
(h)結(jié)晶將納濾后的濃縮液放置于10°C以下靜止結(jié)晶48h，過(guò)濾、淋洗晶體，結(jié)晶體進(jìn)入下一道工序；
(i)干燥將結(jié)晶體真空干燥，得到含Reb-D甙80%以上的甜菊糖甙產(chǎn)品。本發(fā)明的效果是利用吸附樹脂對(duì)甜菊糖甙不同組分具有不同的親和力原理，用低濃度乙醇對(duì)Reb-D甙進(jìn)行洗脫，提高了洗脫液中Reb-D甙的相對(duì)含量；再經(jīng)過(guò)脫色除雜、離子交換除雜、結(jié)晶分離等方法進(jìn)一步提純精制，最后所得甜菊糖甙產(chǎn)品總含甙量大于90%，其中Reb-D甙含量達(dá)到80%以上。與普通甜菊糖甙相比，甜度更高，口感更純正，無(wú)不良余味。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)描述。(a)預(yù)處理將甜葉菊與50°C — 55°C軟水按重量/體積比1:15混合，浸泡制得甜菊糖甙提取液，經(jīng)過(guò)絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序，板框過(guò)濾后的濾清液進(jìn)入下一道工序; (b)脫鹽將上述濾液用732型陽(yáng)、LK-330陰離子交換樹脂脫鹽，所得脫鹽液透光率為78. 2%、電導(dǎo)率為4950l^s/cm，脫鹽液進(jìn)入下一道工序；
(c)吸附洗脫用YW-03F吸附樹脂吸附上述脫鹽濾液中的甜菊糖甙有效成分，吸附飽和后的樹脂，先用2BV樹脂體積0. 5%氫氧化鈉溶液和2BV樹脂體積0. 5%鹽酸稀溶液清洗樹脂柱，然后用足量的純水淋洗吸附柱至流出液PH值為7，再用2BV樹脂體積30%的乙醇溶液對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，得到含Reb-D甙4. 8%的洗脫液，洗脫液進(jìn)入下一道工序；
Cd)脫色將植物活性炭按洗脫液體積的0. 4%置入洗脫液中混合攪拌I小時(shí)，板框過(guò)濾得到含Reb-D甙5. 6%的脫色液，脫色液進(jìn)入下一道工序；
(e)離子交換脫色液依次通過(guò)732型陽(yáng)離子交換樹脂和YW-07t陰離子交換樹脂進(jìn)行除雜處理，得到含Reb-D甙7. 8%的交換液，交換液進(jìn)入下一道工序；
(f)納濾濃縮交換液經(jīng)過(guò)納濾膜濃縮過(guò)濾得糖甙濃度為28%的濃縮液，濃縮液進(jìn)入下一道工序；
(g)結(jié)晶將納濾后的濃縮液放置于10°C以下靜止結(jié)晶48h，過(guò)濾、淋洗得晶體，晶體進(jìn)入下一道工序；
(h)干燥將晶體真空干燥，得甜菊糖甙產(chǎn)品。經(jīng)高效液相色譜分析，產(chǎn)品含甙量為92. 75%，其中 Reb-D 甙含量為 84. 63%。文中各參數(shù)的測(cè)定方法為
(1)含甙量即純度的檢測(cè)方法按JECFA2010 Steviol Glycosides ；
(2)透光率測(cè)定方法室溫25°C722型可見(jiàn)光分光光度計(jì)波長(zhǎng)480納米；
(3)電導(dǎo)率測(cè)定方法室溫25°C電導(dǎo)率儀；
(4)比吸光度測(cè)定方法按GB8270-1999。
權(quán)利要求
1.一種制取高Reb-D甜菊糖甙的方法，其特征在制備方法如下 (a)預(yù)處理將粉碎的甜葉菊葉與50°C— 55°C軟化水混合，連續(xù)逆流萃取，使甜葉菊葉的糖甙萃取率達(dá)到99. 99%以上，制成甜菊糖甙萃取液，萃取液經(jīng)過(guò)絮凝沉淀和板框壓濾兩道工序后，進(jìn)入下一道工序； (b)脫鹽將上述濾液用離子交換樹脂脫鹽，得透光率>65%、電導(dǎo)率< 6700us/cm的脫鹽濾液，脫鹽濾液進(jìn)入下一道工序； (c)吸附采用樹脂吸附上述脫鹽濾液中甜菊糖甙有效成分，到樹脂出甜時(shí)止； Cd)樹脂處理及洗脫1)樹脂處理用氫氧化鈉稀溶液、鹽酸稀溶液、純水洗樹脂，至流出液PH值達(dá)到7時(shí)止；2)樹脂解析用濃度為30%的乙醇溶液對(duì)樹脂進(jìn)行洗脫，得含Reb-D甙4-5%的洗脫液，洗脫液進(jìn)入下一道工序； (e)脫色將活性炭置入洗脫液中混合攪拌，經(jīng)過(guò)板框過(guò)濾得含Reb-D甙5-6%的脫色液，脫色液進(jìn)入下一道工序； (f)離子交換脫色液依次通過(guò)陽(yáng)離子交換樹脂和陰離子交換樹脂除雜后，得含Reb-D甙6-7%的交換液，交換液進(jìn)入下一道工序； (g)納濾濃縮交換液經(jīng)過(guò)納濾膜濃縮過(guò)濾得糖甙濃度為25%— 30%的濃縮液，濃縮液進(jìn)入下一道工序； (h)結(jié)晶將納濾后的濃縮液放置于10°C以下靜止結(jié)晶48h，過(guò)濾、淋洗晶體，結(jié)晶體進(jìn)入下一道工序； (i)干燥將結(jié)晶體真空干燥，得到含Reb-D甙80%以上的甜菊糖甙產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種多柱二次樹脂串聯(lián)吸附提純甜菊糖甙的方法，粉碎的甜葉菊葉經(jīng)預(yù)處理、脫鹽、吸附、樹脂處理及洗脫、脫色、離子交換、納濾濃縮、結(jié)晶、干燥工序，制得含Reb-D甙80%以上的甜菊糖甙產(chǎn)品。本發(fā)明利用吸附樹脂對(duì)甜菊糖甙不同組分具有不同的親和力原理，用低濃度乙醇對(duì)Reb-D甙進(jìn)行洗脫，提高了洗脫液中Reb-D甙的相對(duì)含量；再經(jīng)過(guò)脫色除雜、離子交換除雜、結(jié)晶分離等方法進(jìn)一步提純精制，最后所得甜菊糖甙產(chǎn)品總含甙量大于90%，其中Reb-D甙含量達(dá)到80%以上。與普通甜菊糖甙相比，甜度更高，口感更純正，無(wú)不良余味。
文檔編號(hào)C07H1/08GK102796152SQ201210329030
公開日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2012年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月7日
發(fā)明者李善汪 申請(qǐng)人:譜賽科(江西)生物技術(shù)有限公司