專利名稱：一種大丁香素的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥活性成分的制備方法，具體地是ー種從榆綠木樹皮中制備大丁香素的方法。
背景技術(shù)：
大丁香素(Grandinin),分子式C46H3403(l,分子量1066. 75,是從使君子科(Combretaceae)偷綠木acuminata var. Ianceolata Wall.的樹皮中提取分離的ー種鞣質(zhì)類活性成分。大丁香素細(xì)胞毒活性，對黑色素瘤(RPMI-7951)的ED50為O.10 μ g/mlο目前，國內(nèi)對大丁香素的研究較少，尚處于起步階段。因此，研究出ー種制備大丁香素的方法是非常必要的，對于擴(kuò)大藥源以及余甘子的綜合利用具有很重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供ー種操作簡單，產(chǎn)品純度較高的大丁香素制備方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用下列技術(shù)方案
(1)超臨界ニ氧化碳流體萃取榆綠木樹皮中的油脂類物質(zhì)，殘留物用こ醇進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取后得到提取液；
(2)提取液濃縮，加入明膠溶液，離心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初歩純化液；
(3)純化液濃縮，上大孔樹脂柱純化，水和こ醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥即得
大丁香素。步驟(I)中所述超臨界萃取溫度為38-45°C，壓カ為25_30MPa，時(shí)間為50_60min。步驟(I)中所述こ醇為70-85%的こ醇溶液溶液，用量為5-10倍量(V/W)，超聲頻率為 25-35KHz。步驟(2)中所述明膠溶液濃度為3-6%，丙酮水溶液濃度為50%。步驟(3)中所述大孔樹脂可選HPD-400、DlOl或ADS-17型，洗脫劑為75%的こ醇水溶液。綜上所述，本發(fā)明存在以下優(yōu)點(diǎn)本エ藝采用連續(xù)逆流超聲提取的方法提取大丁香素，提高了提取效率，節(jié)省了溶劑；70-85%的こ醇溶液作為提取溶剤，減少了多糖的溶出；采用大孔樹脂分離大丁香素，成本低，分離效果好。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
對本發(fā)明做進(jìn)ー步闡述，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。實(shí)施例I :
榆綠木樹皮粉碎，取lkg，放入超臨界萃取裝置中，在溫度為38°C，壓カ為25MPa下萃取50min，殘留物加8L80%的こ醇溶液進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取，超聲頻率為25KHz，過濾，合并提取液，濃縮，加入濃度為3%明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，離心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初步純化液，上1LHPD-400大孔樹脂柱，吸附完成后，先用4L水洗脫，再用4L75%こ醇溶液洗脫，控制流速為3ml/min，收集富含大丁香素的洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得大丁香素I. ISgo實(shí)施例2:
榆綠木樹皮粉碎，取lkg，放入超臨界萃取裝置中，在溫度為45°C，壓カ為30MPa下萃取50min，殘留物加5L70%的こ醇溶液進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取，超聲頻率為35KHz，過濾，合并提取液，濃縮，加入濃度為6%明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，離心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初步純化液，上1LHPD-400大孔樹脂柱，吸附完成后，先用5L水洗脫，再用5L75%こ醇溶液洗脫，控制流速為4. 5ml/min，收集富含大丁香素的洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得大丁香素I. 27g。 實(shí)施例3
榆綠木樹皮粉碎，取1kg，放入超臨界萃取裝置中，在溫度為40°C，壓カ為30MPa下萃取60min，殘留物加10L70%的こ醇溶液進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取，超聲頻率為30KHz，過濾，合并提取液，濃縮，加入濃度為4. 5%明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，離心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初步純化液，上1LADS-17大孔樹脂柱，吸附完成后，先用3L水洗脫，再用6L75%こ醇溶液洗脫，控制流速為3. 5ml/min，收集富含大丁香素的洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得大丁香素I. 22g。實(shí)施例4:
榆綠木樹皮粉碎，取lkg，放入超臨界萃取裝置中，在溫度為35°C，壓カ為30MPa下萃取50min，殘留物加7L80%的こ醇溶液進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取，超聲頻率為35KHz，過濾，合并提取液，濃縮，加入濃度為5%明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，離心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初步純化液，上1LD-101大孔樹脂柱，吸附完成后，先用6L水洗脫，再用3L75%こ醇溶液洗脫，控制流速為4ml/min，收集富含大丁香素的洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得大丁香素I. 50g。實(shí)施例5:
榆綠木樹皮粉碎，取1kg，放入超臨界萃取裝置中，在溫度為42°C，壓カ為28MPa下萃取60min，殘留物加6L85%的こ醇溶液進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取，超聲頻率為30KHz，過濾，合并提取液，濃縮，加入濃度為6%明膠溶液，攪拌至不再產(chǎn)生沉淀，離心，沉淀物用50%丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初步純化液，上1LHPD-400大孔樹脂柱，吸附完成后，先用3L水洗脫，再用4L75%こ醇溶液洗脫，控制流速為2. 5ml/min，收集富含大丁香素的洗脫液，濃縮，冷凍干燥即得大丁香素I. 47g。
權(quán)利要求
1.一種大丁香素的制備方法，其特征在于包括以下步驟 (1)超臨界ニ氧化碳流體萃取榆綠木樹皮中的油脂類物質(zhì)，殘留物用こ醇進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取后得到提取液； (2)提取液濃縮，加入明膠溶液，離心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初歩純化液； (3)純化液濃縮，上大孔樹脂柱純化，水和こ醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥即得大丁香素。
2.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述超臨界萃取溫度為38_45°C，壓カ為 25_30MPa，時(shí)間為 5O-6Omin。
3.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟(I)中所述こ醇為70-85%的こ醇溶液溶液，用量為5-10倍量(V/W)，超聲頻率為25-35KHZ。
4.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟(2)中所述明膠溶液濃度為3-6%，丙酮水溶液濃度為50%。
5.如權(quán)利要求I所述的制備方法，其特征在于步驟(3)中所述大孔樹脂可選HPD-400、DlOl或ADS-17型，洗脫劑為75%的こ醇水溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種大丁香素的制備方法。本方法是采用榆綠木樹皮為原料。該工藝流程主要分為三部分(1)超臨界二氧化碳流體萃取原料中的油脂類物質(zhì)，脫脂原料進(jìn)行連續(xù)逆流超聲提取后得到提取液；(2)提取液濃縮，加入明膠溶液，離心，沉淀物用丙酮水溶液溶解，濾除明膠，得到初步純化液；(3)上大孔樹脂柱純化，水和乙醇水溶液洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥即得大丁香素。本發(fā)明的制備方法在50℃以下進(jìn)行，避免了大丁香素在常規(guī)熱回流提取過程中因溫度過高所引起的化學(xué)和結(jié)構(gòu)的改變，因此本方法可得到純度較高的大丁香素，產(chǎn)品中大丁香素含量大于62%，且本方法提取周期短，方法安全，適合于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C07H1/08GK102827214SQ201210368379
公開日2012年12月19日 申請日期2012年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月28日
發(fā)明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司