專利名稱：一種彌洛松甙的提純工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種彌洛松甙的提純工藝，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
彌洛松式來源于羅漢松科(Podocarpaceae)取洛敗Prumnopitys ferruginea (D.^Laubenf.的枝葉。彌洛松甙可溶于醇類有機(jī)試劑，溶于水，極性大?，F(xiàn)代藥理研究表明彌洛松甙具有多種生活性細(xì)胞毒活性，對(duì)P388細(xì)胞的IC50為19 μ g/ml，對(duì)猴腎細(xì)胞株(BSC)也有活性；抗菌作用，在150μ g/disk時(shí)，對(duì)大腸桿菌和枯草桿菌的抑菌圈直徑(mm)為3和6 ;抗真菌活性。在150 μ g/disk時(shí)，對(duì)白色念珠菌和須發(fā)癬菌的抑菌圈直徑(mm)為I和9。
目前尚未見彌洛松甙工業(yè)分離制備方法的相關(guān)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是提供一種簡(jiǎn)單、提率較高的彌洛松甙提純工藝。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。一種彌洛松甙的提純工藝，其特征在于
1)把原料粉碎至20-80目，加入5-15倍量70%乙醇溶液，微波提取l_2h，提取1_3次，合并提取液；
2)上述提取液減壓回收乙醇至浸膏狀，加水溶解，濾出不溶物，濾液加入大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用4-7BV40-50%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液；
3)上述洗脫液加入超濾膜超濾，透過液再加入納濾膜濃縮，得濃縮液；
4)上述濃縮液通過制備型液相色譜分離純化得到彌洛松甙。所述步驟I)中微波提取功率為Ι-lOkw，提取溫度控制在40_50°C。所述步驟2)中大孔樹脂可選AB-8、NAK-II、ADS-7或SPD100中的一種。所述步驟3)中超濾膜為截留分子量3000-10000的中空復(fù)合膜，納濾膜選截留分子量100的中空復(fù)合膜，進(jìn)口壓力控制O. 4-0. 7Mpa。所述步驟4)中制備型液相色譜的流動(dòng)相為33%甲醇溶液。本發(fā)明采用大孔樹脂吸附，富集量大，除雜質(zhì)效果好；洗脫液用生物膜截流濃縮，能耗低，并且避免溫度過高發(fā)生物質(zhì)變化；采用制備型液相色譜法，制備量大，產(chǎn)品純度高，可實(shí)現(xiàn)連續(xù)生產(chǎn)；整個(gè)工藝操作簡(jiǎn)單，易揮發(fā)毒性溶劑使用量少，對(duì)操作人員危害程度減小。
具體實(shí)施例方式 下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施例。實(shí)施例I :
將彌洛松的枝葉粉碎至20目，取5kg投入微波提取罐，加入25L70%乙醇溶液微波提取lh，微波提取功率為10kW，提取溫度控制在50°C，提取3次，合并提取液，減壓回收乙醇至浸膏狀加水溶解，濾出不溶物，濾液加入5L NAK-II大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用20L40%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量3000的中空復(fù)合膜超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量100的中空復(fù)合納濾膜濃縮，進(jìn)口壓力控制O. 5Mpa得濃縮液；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以33%甲醇溶液為流動(dòng)相，將濃縮液加少量流動(dòng)相溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為213nm，收集目標(biāo)成分，濃縮，冷凍干燥即得彌洛松式，含量為95. 7%。實(shí)施例2
將彌洛松的枝葉粉碎至60目，取5kg投入微波提取罐，加入75L70%乙醇溶液微波提取lh，微波提取功率為lkW，提取溫度控制在40°C，提取I次，合并提取液，減壓回收乙醇至浸膏狀加水溶解，濾出不溶物，濾液加入5L AB-8大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用35L50%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量10000的中空復(fù)合膜超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量100的中空復(fù)合納濾膜濃縮，進(jìn)口壓力控制 O. 5Mpa得濃縮液；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以33%甲醇溶液為流動(dòng)相，將濃縮液加少量流動(dòng)相溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為213nm，收集目標(biāo)成分，濃縮，冷凍干燥即得彌洛松式，含量為96. 3%。實(shí)施例3:
將彌洛松的枝葉粉碎至80目，取5kg投入微波提取罐，加入25L70%乙醇溶液微波提取2h,微波提取功率為5kW，提取溫度控制在45°C，提取3次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀加水溶解，濾出不溶物，濾液加入5L SPD100大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用28L45%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量6000的中空復(fù)合膜超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量100的中空復(fù)合納濾膜濃縮，進(jìn)口壓力控制O. 6Mpa得濃縮液；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以33%甲醇溶液為流動(dòng)相，將濃縮液加少量流動(dòng)相溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為213nm，收集目標(biāo)成分，濃縮，冷凍干燥即得彌洛松甙，含量為95. 5%。實(shí)施例4:
將彌洛松的枝葉粉碎至60目，取5kg投入微波提取罐，加入30L70%乙醇溶液微波提取I. 5h，微波提取功率為4kW，提取溫度控制在50°C，提取3次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀加水溶解，濾出不溶物，濾液加入5L ADS-7大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用30L40%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量3000的中空復(fù)合膜超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量100的中空復(fù)合納濾膜濃縮，進(jìn)口壓力控制O. 4Mpa得濃縮液；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以33%甲醇溶液為流動(dòng)相，將濃縮液加少量流動(dòng)相溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為213nm，收集目標(biāo)成分，濃縮，冷凍干燥即得彌洛松式，含量為95. 2%。實(shí)施例5:
將彌洛松的枝葉粉碎至40目，取5kg投入微波提取罐，加入50L70%乙醇溶液微波提取Ih,微波提取功率為8kW，提取溫度控制在50°C，提取2次，合并提取液減壓回收乙醇至浸膏狀加水溶解，濾出不溶物，濾液加入5L AB-8大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用25L40%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液，洗脫液加入截留分子量6000的中空復(fù)合膜超濾膜超濾，透過液再加入截留分子量100的中空復(fù)合納濾膜濃縮，進(jìn)口壓力控制O. 4Mpa得濃縮液；以反相C18硅膠鍵合固定相為色譜柱填料，以33%甲醇溶液為流動(dòng)相，將濃縮液加少量流動(dòng)相溶解，進(jìn)樣，紫外在線監(jiān)測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為213nm，收集目標(biāo)成分，濃縮，冷凍干燥即得彌洛松甙，含量為95. 9%。 ·
權(quán)利要求
1.一種彌洛松甙的提純工藝，其特征在于包含以下步驟 1)把原料粉碎至20-80目，加入5-15倍量70%乙醇溶液，微波提取l_2h，提取1_3次，合并提取液； 2)上述提取液減壓回收乙醇至浸膏狀，加水溶解，濾出不溶物，濾液加入大孔樹脂柱吸附，先水洗至糖反應(yīng)呈陰性，再用4-7BV40-50%乙醇溶液洗脫有效成分，收集洗脫液； 3)上述洗脫液加入超濾膜超濾，透過液再加入納濾膜濃縮，得濃縮液； 4)上述濃縮液通過制備型液相色譜分離純化得到彌洛松甙。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的彌洛松甙提純工藝，其特征在于所述步驟I)中微波提取功率為Ι-lOkw，提取溫度控制在40-50°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的彌洛松甙提純工藝，其特征在于所述步驟2)中大孔樹脂可選AB-8、NAK-II、ADS-7 或 SPD100 中的一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的彌洛松甙提純工藝，其特征在于所述步驟3)中超濾膜為截留分子量3000-10000的中空復(fù)合膜，納濾膜選截留分子量100的中空復(fù)合膜，進(jìn)口壓力控制O.4-0. 7Mpa。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的彌洛松甙提純工藝，其特征在于所述步驟4)中制備型液相色譜的流動(dòng)相為33%甲醇溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種彌洛松甙的提純工藝，方法是以彌洛松的枝葉為原料，加入乙醇溶液，微波提取2-3次，提取液回收乙醇，浸膏加水分散，加入極性大孔樹脂樹脂柱吸附，40-50%乙醇洗脫，洗脫液通過超濾膜超濾，納濾膜濃縮，濃縮液經(jīng)過制備型液相色譜分離得到彌洛松甙。本發(fā)明所述方法的先進(jìn)性和實(shí)用價(jià)值在于，應(yīng)用本方法所制備的彌洛松甙純度高，方法簡(jiǎn)便實(shí)用。
文檔編號(hào)C07H1/08GK102827217SQ20121037196
公開日2012年12月19日 申請(qǐng)日期2012年9月29日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月29日
發(fā)明者劉東鋒, 萬冬梅 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司