專利名稱：從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥現(xiàn)代化分離純化技術(shù)，具體的說是一種從羅布麻葉中同時(shí)制備金 絲桃苷和異槲皮苷的方法
背景技術(shù)：
羅布麻葉為夾竹桃科多年生草本植物羅布麻Apocynum venetum.的干燥葉，具有 平肝安神、清熱利水之功效，其藥用、茶飲歷史悠久。現(xiàn)代藥理研究表明，羅布麻葉可用來治 療高血壓、高血脂、冠心病、哮喘病、氣管炎等疾病，具有較好的效果。金絲桃苷和異槲皮苷是羅布麻中主要的活性成分。金絲桃苷又名槲皮 素-3-0- ^ -D-吡喃半乳糖苷，屬于黃酮醇苷類化合物，苷元為槲皮素，糖基為吡喃半乳糖， 由槲皮素的3位0原子以3糖苷鍵與糖基相連，具有局部鎮(zhèn)痛、抗過敏、抗炎、抗抑郁、抗 菌、止咳等作用，對(duì)心肌缺血再灌、腦缺血再灌、腦梗塞具有良好的保護(hù)作用。異槲皮苷又名 槲皮素-3-0-0-D-吡喃葡萄糖苷，具有降血壓、抗炎、抗抑郁等作用，是田基黃治療肝炎的 有效成分之一。
權(quán)利要求
1.一種從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于 1)提取以羅布麻葉為原料經(jīng)加熱回流或超聲提取，提取液減壓濃縮，濃縮液用石油醚萃取除去色素及脂溶性雜質(zhì)，萃取后的水相經(jīng)稀釋即為中間產(chǎn)物A ； 2)富集中間產(chǎn)物A以Ι-lOBV/h的流速通過大孔吸附樹脂柱，動(dòng)態(tài)吸附至飽和；再用3-15BV的水以5-20BV/h的流速淋洗上述大孔吸附樹脂柱至無色；最后用3-15BV體積分?jǐn)?shù)為30-50%的乙醇在3-10BV/h的流速下進(jìn)行洗脫，收集洗脫液直至洗脫液無色，將收集所得洗脫液減壓濃縮即得中間產(chǎn)物B ； 3)純化將上述中間產(chǎn)物B在甲醇中重結(jié)晶，得金絲桃苷和異槲皮苷的混合物C;將混合物C利用中壓梯度系統(tǒng)進(jìn)行分離，具體為以15-40 μ m的C18硅膠鍵合固定相為色譜填料，流動(dòng)相為甲醇和水，并以50-200mL/min的流速進(jìn)行洗脫；按出峰時(shí)間先后順序分別收集金絲桃苷和異槲皮苷，而后分別減壓濃縮回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥后即得高純度金絲桃苷和異槲皮苷粉末。
2.按權(quán)利要求I所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟I)向干燥粉碎的羅布麻葉中加入8-20倍量(mL/g)的溶劑,經(jīng)加熱回流或超聲提取2-3次，每次1-3小時(shí)，合并提取液；提取液過濾后，減壓濃縮得到浸膏，浸膏加水溶解，用等體積的石油醚萃取3-4次，而后將萃取后的水相稀釋至濃度為l-10g/L，充分混勻，即得中間產(chǎn)物A。
3.按權(quán)利要求2所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟I)溶劑為體積分?jǐn)?shù)為70% -100%甲醇或乙醇。
4.按權(quán)利要求I所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟2)大孔吸附樹脂柱為串聯(lián)的大孔吸附樹脂柱；所述各個(gè)串聯(lián)的大孔吸附樹脂柱的徑高比為1:4-1:10。
5.按權(quán)利要求4所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟2)大孔樹脂為AB-8、DlOl和/或X-5 ;串聯(lián)的大孔吸附樹脂柱可以是一種樹脂或幾種樹脂的組合；串聯(lián)的大孔吸附樹脂柱至少為3級(jí)串聯(lián)。
6.按權(quán)利要求I所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟2)吸附殘液可循環(huán)吸附1-2次后棄去。
7.按權(quán)利要求I所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟2)洗脫收集中間產(chǎn)物B后的大孔吸附樹脂柱經(jīng)再生液再生后可重復(fù)利用，進(jìn)而達(dá)到連續(xù)操作的目的。
8.按權(quán)利要求7所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟2)再生液為無水乙醇。
9.按權(quán)利要求I所述的從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法，其特征在于所述步驟3)洗脫純化時(shí)流動(dòng)相甲醇的體積分?jǐn)?shù)從10%到50%梯度變化。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種從羅布麻葉中同時(shí)制備金絲桃苷和異槲皮苷的方法。本發(fā)明以羅布麻葉為原料，經(jīng)加熱回流或超聲提取，減壓濃縮得浸膏；浸膏加水溶解，用石油醚除去色素及脂溶性雜質(zhì)；水相稀釋，通過至少三級(jí)串聯(lián)的大孔吸附樹脂柱，動(dòng)態(tài)吸附至飽和后，流加洗雜液洗雜，再用洗脫液洗脫至無金絲桃苷和異槲皮苷流出，并收集流出液；流出液減壓濃縮，在甲醇中重結(jié)晶，經(jīng)裝填有C18反相硅膠的中壓梯度洗脫系統(tǒng)同時(shí)得到純度均達(dá)到90％-98％的金絲桃苷和異槲皮苷。該方法樣品處理量大，操作簡(jiǎn)單，同時(shí)制備出高純度的金絲桃苷和異槲皮苷，不僅成本低廉而且適用于較大規(guī)模的制備。
文檔編號(hào)C07H1/08GK102924537SQ20121042455
公開日2013年2月13日 申請(qǐng)日期2012年10月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月30日
發(fā)明者夏傳海, 孔娜娜, 方圣濤, 凌浩 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所