專利名稱：用含量98.5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種熊去氧膽酸的制備方法，尤其涉及一種用含量98. 5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法；是一種溶解膽固醇結石藥物，同時也用于治療原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBS)、慢性丙型肝炎、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝的保肝護肝性藥物。
背景技術：
早在1848年首先在鵝膽汁中發(fā)現(xiàn)了鵝去氧膽酸這一個有效成分，于1924年命名為鵝去氧膽酸(CDCA)這一名稱。1937年以來 ，有人試圖用含有鵝去氧膽酸的混合物溶解膽結石，后來又發(fā)現(xiàn)了鵝去氧膽酸具有糾正膽固醇飽和膽汁作用，英國于1972年正式開辟了溶解膽固醇結石的治療，作為第一個糾正飽和膽汁和溶解膽結石的藥物。鵝去氧膽酸的化學名稱為3α、7α-二羥基-5β-膽烷酸，是白色針狀結晶，無味，可溶于甲醇、乙醇、氯仿、丙酮、冰醋酸及稀堿液。不溶于水、石油酸及苯，熔點141-142°C [α ]。+11. 50°。熊去氧膽酸化學名3 α，7 β - 二羥基_5 β -膽烷酸，與鵝去氧膽酸、牛羊膽酸的分子式相同，立體結構不同，化學上把這兩種化合物的結構關系稱為同分異構體，本品是白色結晶粉末，無臭，味苦。易溶于乙醇、氯仿、冰醋酸、稀堿液，略溶于乙醚，難溶于水和稀礦酸，熔點203°C，[α]0 +57°C熊去氧膽酸是一種無毒性親水膽酸，能競爭性地抑制毒性內源性膽酸在回腸的吸收，通過即或鈣離子、蛋白激酶C組成的信號網(wǎng)絡，并通過激活分離活性蛋白激酶來增強膽汁淤積肝細胞的分泌能力，使血液及肝細胞中的內源性蔬水膽酸濃度降低，達到抗膽汁淤積的作用。熊去氧膽酸還能競爭性地取代細胞膜和細胞器上的毒性膽酸分子，防止肝細胞和膽管細胞受到更多毒性膽酸的損害。在臨床上，熊去氧膽酸主要用于溶解膽固醇型肝膽結石，原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)、慢性丙型肝炎，同時還用于酒精性肝病、非酒精性脂肪肝、良性復發(fā)性肝內膽汁淤積癥、先天性內膽管囊性擴張癥?，F(xiàn)有技術中，生產(chǎn)熊去氧膽酸的藥物通常都是用從禽膽汁中分離、提取、純化出的86%的鵝去氧膽酸通過化學方法轉化成熊去氧膽酸，但是由于存在著禽膽汁量較少，難以收集的問題，所以導致目前熊膽藥材稀缺，難以滿足人們的需求。

發(fā)明內容
本發(fā)明針對上述現(xiàn)有技術中存在的問題，通過大量的摸索和試驗總結，提供了一種用含量98. 5%的牛氧膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法；解決了現(xiàn)有技術中熊膽藥材稀缺的問題，而且本發(fā)明工藝簡單，成本低，提高了熊去氧膽酸的純度，適合批量生產(chǎn)。本發(fā)明的技術方案包括下述步驟
取甲醇50-60kg，加入含量98. 5%的牛羊膽酸20-30kg，加熱1_2小時，放置室溫6_8小時后有結晶析出，過濾，濾液待回收甲醇，結晶用石油醚洗滌，在70°C真空干燥得膽酸甲酷；
取甲苯10-20kg，加入2-4kg吡啶投入反應釜中，然后再加入上述結晶的膽酸甲酯2-4kg在室溫下攪拌40-50分鐘，然后加水120-150kg，再次攪拌40-50分鐘，然后靜置5_6小時后，分離出甲苯后進行回收，析出結晶，結晶在70°C下真空干燥；結晶用石油醚反復洗滌得3α、7α_ 二乙酰膽酸甲酯；
取上述3 α、7α-二乙酰膽酸甲酯l_3kg，加入2_4kg醋酸鈉，加入10_15kg甲醇進行回流30分鐘，待溫度達到5-10°C時加入次氯酸鈉1kg，繼續(xù)攪拌4-5小時，然后加入IOOkg水中，待結晶后過濾，結晶在70°C下真空干燥；結晶為3 α -7 α -二乙酰氧基_12_酮基膽烷酸甲酯；
取3 α -7 α - 二乙酰氧基_12_酮基膽烷酸甲酯20_30kg加入乙二醇200_250kg，水合肼溶劑20-30kg回流12-15小時，然后再升溫至195-200°C再回流3_4小時，然后停止升溫冷卻至室溫，再加入500-700kg水稀釋，然后用稀硫酸調節(jié)PH2. O，待析出結晶，過濾，結晶在·70°C真空干燥，結晶為含量98. 5%鵝去氧膽酸；·
取上述含量98. 5%的鵝去氧膽酸10-20kg為原料，加入原料的10-15倍重量的甲醇，力口熱60-80°C，溶解3-7小時，得溶液A ；
將上述溶液A溫度降至5-10°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的6%-15%，在5-10°C下反應8-10小時，得反應液B ;
將上述反應液B再加溫到50-60°C，然后加入碳酸鈉30-40kg，加水100-150 kg過濾，棄掉過濾液，結晶在70°C真空干燥，得7-酮；
取上述7-酮8-12kg，加入仲丁醇30-40kg，升溫至60-70°C溶解，加入金屬鈉3-8kg，在90-100°C攪拌2-3小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70°C真空干燥；
取上述干燥后的結晶品8-12kg,加入30-50kg乙酸乙酯,再加入1. 0_3kg三乙胺在50-75 0C溶解，并攪拌1-3小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，濾液棄掉，結晶在70 V真空干燥，得熊去氧膽酸。本發(fā)明的優(yōu)點和有益效果如下
本發(fā)明是采用牛羊膽酸經(jīng)過酯化、乙酰化、氧化、還原等四個步驟，將同分異構體的膽酸轉化成鵝去氧膽酸的結構，形成了鵝去氧膽酸的化合物，再利用鵝去氧膽酸，通過反應后得到熊去氧膽酸；克服了只能從禽膽中提取鵝去氧膽酸的局限性，另外，禽膽的膽汁較少，牛羊的膽汁大而且較多，將牛羊膽酸轉化成鵝去膽酸的工藝生產(chǎn)成本低，適合大批量生產(chǎn)；而且適合生產(chǎn)的熊去氧膽酸純度高，達到了國際的先進水平。本發(fā)明不僅解決了現(xiàn)有技術中熊膽藥材稀缺的問題，而且生產(chǎn)工藝簡單，原料來源易得，成本低，提高了熊去氧膽酸的純度，生產(chǎn)運輸儲存無任何風險，具有廣闊市場前景。
具體實施例方式實施例1
取含量98. 5%的牛羊膽酸25kg，加入甲醇55kg，加熱回流1. 5小時后，室溫下放置7小時至產(chǎn)生結晶，過濾，結晶用型號90-120石油醚洗滌，在70°C真空干燥結晶得干燥品，然后取干燥品3kg，取甲苯15kg，取吡啶3kg —起放入反應罐中，在室溫下攪拌45分鐘，然后加入135kg水再次攪拌45分鐘，然后靜置5. 5小時后，分離出甲苯進行回收，析出結晶，結晶用型號90-120石油醚反復多次洗滌得3 α、7 α -二乙酰膽酸甲酯，在70°C真空干燥，取干燥品2kg加入3kg醋酸鈉,然后取13kg甲醇一起放入反應罐中一起回流30分鐘，然后將溫度降至8°C加入次氯酸鈉1kg，繼續(xù)攪拌4. 5小時，然后加水100kg，繼續(xù)攪拌30分鐘后，析出結晶，過濾，結晶在70°C真空干燥。取上述干燥品25 kg加入乙二醇225kg，含量85%的水合肼25kg于130°C回流13小時，然后再升溫至198°C再回流3. 5小時，然后停止升溫冷卻至室溫后再加入600kg水稀釋，然后用稀硫Ife調PH2. O待析出結晶后過濾，結晶在70 C真空干燥，結晶為含量98. 5%的鵝去氧膽酸。取含量為98. 5%的鵝去氧膽酸15kg，加入鵝去氧膽酸原料的13倍重量的甲醇在70°C溶解5小時，溶解后再將溫度降至8°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的9%，在8°C攪拌9小時，然后將溫度升高到55°C，加入碳酸鈉35kg，加水125 kg產(chǎn)生沉淀，過濾，結晶在70°C真空干燥8小時，得到7-酮；取7-酮10kg，加入仲丁醇35 kg,在溫度65°C時溶解，然后加5kg金屬鈉，在95°C攪拌2. 5小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70 V真空干燥。取上述干燥品10kg，加入40kg乙酸乙 酯，再加入2kg三乙胺在60°C溶解，并攪拌2小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，結晶，70°C真空干燥，即得純度在98. 5%以上的熊去氧膽酸。實施例2
取含量在98. 5%以上的牛羊膽酸20kg，加入甲醇50kg，加熱回流I小時后，室溫下放置6小時至產(chǎn)生結晶，過濾，結晶用型號90-120石油醚洗滌，在70°C真空干燥結晶，然后取干燥品2kg，取甲苯10kg，取吡啶2kg —起放入反應罐中，在室溫下攪拌40分鐘，然后加入120kg水再次攪拌40分鐘，然后靜置5小時后，分離出甲苯進行回收，析出結晶，結晶用型號90-120石油醚反復多次洗滌得3a、7a-二乙酰膽酸甲酯，在70°C真空干燥，取干燥品Ikg加入2kg醋酸鈉，然后取IOkg甲醇一起放入反應罐中一起回流30分鐘，然后將溫度降至5°C加入次氯酸鈉3kg，繼續(xù)攪拌4小時，然后加水100kg，繼續(xù)攪拌30分鐘后，析出結晶，過濾，結晶在70°C真空干燥。取上述干燥品20 kg加入乙二醇200kg，含量85%的水合肼20kg于130°C回流12小時，然后再升溫至195°C再回流3小時，然后停止升溫冷卻至室溫后再加A 500kg水稀釋，然后用稀硫酸調PH2. O待析出結晶后過濾，結晶在70°C真空干燥，結晶為含量98. 5%的鵝去氧膽酸。取含量為98. 5%的鵝去氧膽酸10kg，加入鵝去氧膽酸原料的10倍重量的甲醇在60°C溶解3小時，溶解后再將溫度降至5°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的12%，在5°C攪拌8小時，然后將溫度升高到50°C，加入碳酸鈉30kg，加水100 kg產(chǎn)生沉淀，過濾，結晶在70°C真空干燥8小時，得到7-酮；取7-酮8kg，加入仲丁醇30 kg，在溫度60 V時溶解，然后加3kg金屬鈉，在90 V攪拌2小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70 V真空干燥。取上述干燥品8kg，加入30kg乙酸乙酯，再加入1. Okg三乙胺在50°C溶解，并攪拌I小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，結晶，70°C真空干燥，即得純度在98. 5%以上的熊去氧膽酸。實施例3
取含量在98. 5%以上的牛羊膽酸30kg，加入甲醇60kg，加熱回流2小時后，室溫下放置8小時至產(chǎn)生結晶，過濾，結晶用型號90-120石油醚洗滌，在70°C真空干燥結晶即得，然后取干燥品4kg，取甲苯20kg，取吡啶4kg —起放入反應罐中，在室溫下攪拌50分鐘，然后加入150kg水再次攪拌50分鐘，然后靜置6小時后，分離出甲苯進行回收，析出結晶，結晶用型號90-120石油醚反復多次洗滌得3 α、7 α -二乙酰膽酸甲酯，在70°C真空干燥，取干燥品3kg加入4kg醋酸鈉,然后取15kg甲醇一起放入反應罐中一起回流30分鐘,然后將溫度降至10°C加入次氯酸鈉4kg，繼續(xù)攪拌5小時，然后加水100kg，繼續(xù)攪拌30分鐘后，析出結晶，過濾，結晶在70°C真空干燥。取上述干燥品30 kg加入乙二醇250kg，含量85%的水合肼30kg于130°C回流15小時，然后再升溫至200°C再回流4小時，然后停止升溫冷卻至室溫后再加入700kg水稀釋，然后用稀硫Ife調PH2. O待析出結晶后過濾，結晶在70 C真空干燥，結晶為含量98. 5%的鵝去氧膽酸。取含量為98. 5%的鵝去氧膽酸20kg，加入鵝去氧膽酸原料的15倍重量的甲醇在60°C溶解7小時，溶解后再將溫度降至10°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的12%，在10°C攪拌10小時，然后將溫度升高到60°C，加入碳酸鈉40kg，加水150 kg產(chǎn)生沉淀，過濾，結晶在70°C真空干燥 8小時，得到7-酮；取7-酮12kg，加入仲丁醇40 kg,在溫度70°C時溶解，然后加8kg金屬鈉，在100°C攪拌3小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70°C真空干燥。取上述干燥品12kg，加入50kg乙酸乙酯，再加入3kg三乙胺在75°C溶解，并攪拌3小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，結晶，70°C真空干燥，即得純度在98. 5%以上的熊去氧膽酸。實施4
取含量98. 5%的牛羊膽酸27kg，加入甲醇58kg，加熱回流2小時后，室溫下放置7小時至產(chǎn)生結晶，過濾，結晶用型號90-120石油醚洗滌，在70°C真空干燥結晶得膽酸甲酯，然后取膽酸甲酯3kg，取甲苯18kg，取吡啶4kg—起放入反應罐中，在室溫下攪拌50分鐘，然后加入145kg水再次攪拌48分鐘，然后靜置6小時后，分離出甲苯進行回收，析出結晶，結晶用型號90-120石油醚反復多次洗滌得3 α、7 α -二乙酰膽酸甲酯，在70°C真空干燥，取上述干燥后的3 α、7 α -二乙酰膽酸甲酯2. 8kg加入3. 5kg醋酸鈉,然后取14kg甲醇一起放入反應罐中一起回流30分鐘，然后將溫度降至10°C加入次氯酸鈉4kg，繼續(xù)攪拌5小時，然后加水100kg，繼續(xù)攪拌30分鐘后，析出結晶，過濾，結晶在70°C真空干燥。取上述干燥品28kg加入乙二醇240kg，含量85%的水合肼26kg于130°C回流15小時，然后再升溫至200°C再回流4小時，然后停止升溫冷卻至室溫后再加入650kg水稀釋，然后用稀硫酸調PH2. O待析出結晶后過濾，結晶在70°C真空干燥，結晶為含量98. 5%的鵝去氧膽酸。取含量為98. 5%的鵝去氧膽酸18kg，加入鵝去氧膽酸原料的12倍重量的甲醇在60°C溶解6小時，溶解后再將溫度降至10°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的15%，在10°C攪拌10小時，然后將溫度升高到60°C，加入碳酸鈉40kg，加水150 kg產(chǎn)生沉淀，過濾，結晶在70°C真空干燥8小時，得到7-酮；取7-酮12kg，加入仲丁醇40 kg,在溫度70°C時溶解，然后加8kg金屬鈉，在100°C攪拌3小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70°C真空干燥。取上述干燥品Ilkg，加入45kg乙酸乙酯，再加入3kg三乙胺在75°C溶解，并攪拌3小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，結晶，70°C真空干燥，即得純度在98. 5%以上的熊去氧膽酸。本發(fā)明的各項技術指標及有益效果，參照國家標準進行了全面系統(tǒng)的檢驗，其檢測結果為了便于參照，列于表I。結論綜合上述比較和對本發(fā)明的各項技術指標按國家標準進行的檢測可知，本發(fā)明的各項技術指標均符合標準。并且充實證明本發(fā)明的熊去氧膽酸純度高，適合批量生產(chǎn)。
權利要求
1.一種用含量98. 5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法，其特征在于包括下述步驟取甲醇50-60kg，加入含量98. 5%的牛羊膽酸20-30kg，加熱1_2小時，放置室溫6_8 小時后有結晶析出，過濾，濾液待回收甲醇，結晶用石油醚洗滌，在70°C真空干燥得膽酸甲酷；取甲苯10-20kg，加入2-4kg吡啶投入反應釜中，然后再加入上述結晶的膽酸甲酯 2-4kg在室溫下攪拌40-50分鐘，然后加水120-150kg，再次攪拌40-50分鐘，然后靜置5_6 小時后，分離出甲苯后進行回收，析出結晶，結晶在70°C下真空干燥；結晶用石油醚反復洗滌得3 α、7α-二乙酰膽酸甲酯；取上述3 α、7α-二乙酰膽酸甲酯l_3kg，加入2_4kg醋酸鈉，加入10_15kg甲醇進行回流30分鐘，待溫度達到5-10°C時加入次氯酸鈉1kg，繼續(xù)攪拌4-5小時，然后加入IOOkg 水中，待結晶后過濾，結晶在70°C下真空干燥；結晶為3 α -7 α -二乙酰氧基_12_酮基膽烷酸甲酯；取3 α -7 α - 二乙酰氧基_12_酮基膽烷酸甲酯20_30kg加入乙二醇200_250kg，水合肼溶劑20-30kg回流12-15小時，然后再升溫至195-200°C再回流3_4小時，然后停止升溫冷卻至室溫，再加入500-700kg水稀釋，然后用稀硫酸調節(jié)PH2. O，待析出結晶，過濾，結晶在 70°C真空干燥，結晶為含量98. 5%鵝去氧膽酸；取上述含量98. 5%的鵝去氧膽酸10-20kg為原料，加入原料的10-15倍重量的甲醇，力口熱60-80°C，溶解3-7小時，得溶液A ；將上述溶液A溫度降至5-10°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的 6%-15%，在5-10°C下反應8-10小時，得反應液B ；將上述反應液B再加溫到50-60°C，然后加入碳酸鈉30-40kg，加水100-150 kg過濾， 棄掉過濾液，結晶在70°C真空干燥，得7-酮；取上述7-酮8-12kg，加入仲丁醇30-40kg，升溫至60-70°C溶解，加入金屬鈉3-8kg， 在90-100°C攪拌2-3小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70°C真空干燥；取上述干燥后的結晶品8-12kg,加入30-50kg乙酸乙酯,再加入1. 0_3kg三乙胺在 50-750C溶解，并攪拌1-3小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，濾液棄掉，結晶在70 V真空干燥，得熊去氧膽酸。
2.根據(jù)權利要求1所述的用含量98.5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法，其特征在于包括下述步驟取含量98. 5%的牛羊膽酸27kg，加入甲醇58kg，加熱回流2小時后，室溫下放置7小時至產(chǎn)生結晶，過濾，結晶用型號90-120石油醚洗滌，在70°C真空干燥結晶得膽酸甲酯，然后取膽酸甲酯3kg，取甲苯18kg，取吡啶4kg—起放入反應罐中，在室溫下攪拌50分鐘，然后加入145kg水再次攪拌48分鐘，然后靜置6小時后，分離出甲苯進行回收，析出結晶，結晶用型號90-120石油醚反復多次洗滌得3 α、7 α -二乙酰膽酸甲酯，在70°C真空干燥，取上述干燥后的3 α、7 α - 二乙酰膽酸甲酯2. 8kg加入3. 5kg醋酸鈉,然后取14kg甲醇一起放入反應罐中一起回流30分鐘，然后將溫度降至10°C加入次氯酸鈉4kg，繼續(xù)攪拌5小時，然后加水100kg，繼續(xù)攪拌30分鐘后，析出結晶，過濾，結晶在70°C真空干燥；取上述干燥品28kg加入乙二醇240kg，含量85%的水合肼26kg于130°C回流15小時，然后再升溫至200°C再回流4小時，然后停止升溫冷卻至室溫后再加入650kg水稀釋，然后用稀硫酸調PH2. O待析出結晶后過濾，結晶在70°C真空干燥，結晶為含量98. 5%的鵝去氧膽酸；取含量為98. 5%的鵝去氧膽酸18kg，加入鵝去氧膽酸原料的12倍重量的甲醇在60°C 溶解6小時，溶解后再將溫度降至10°C，然后加入次氯酸鈉，次氯酸鈉的重量是溶液A重量的15%，在10°C攪拌10小時，然后將溫度升高到60°C，加入碳酸鈉40kg，加水150 kg產(chǎn)生沉淀，過濾，結晶在70°C真空干燥8小時，得到7-酮；取7-酮12kg，加入仲丁醇40 kg，在溫度70°C時溶解，然后加8kg金屬鈉，在100°C攪拌3小時，然后停止攪拌，過濾，結晶在70°C 真空干燥；取上述干燥品11kg，加入45kg乙酸乙酯，再加入3kg三乙胺在75°C溶解，并攪拌3小時，然后用HCl調節(jié)PH2. O左右，過濾，結晶，70°C真空干燥，即得純度在98. 5%以上的熊去氧膽酸。
3.根據(jù)權利要求1所述的用含量98.5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的石油醚為型號100-120石油醚。
4.根據(jù)權利要求1所述的用含量98.5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的水合肼溶劑為含量85%的水合肼溶劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用含量98.5%的牛羊膽酸生產(chǎn)熊去氧膽酸的生產(chǎn)方法，采用牛羊膽酸經(jīng)過酯化、乙?；?、氧化、還原等四個步驟，將同分異構體的膽酸轉化成鵝去氧膽酸的結構，形成了鵝去氧膽酸的化合物，利用鵝去氧膽酸，通過反應后得到熊去氧膽酸，然后再用乙酸乙酯進行分離得到純度98.5%的熊去氧膽酸，該生產(chǎn)方法工藝過程簡單，生產(chǎn)成本低，解決了禽膽汁量較少，難以收集的問題，而且合成生產(chǎn)的熊去氧膽酸純度高，達到了國際的先進水平。
文檔編號C07J9/00GK103012532SQ20121052690
公開日2013年4月3日 申請日期2012年12月10日 優(yōu)先權日2012年12月10日
發(fā)明者姚鳳云, 劉墨涵 申請人:遼寧百鳳生物藥業(yè)有限公司, 遼寧百隆生物工程有限公司, 劉墨涵