專利名稱：瘤果黑種草籽中具有骨架類型1的生物堿及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種瘤果黑種草籽中具有骨架類型I的生物堿及其制備方法。
背景技術(shù)：
黑種草屬(Nigella)植物屬于被子植物門，雙子葉植物綱，毛茛科(Ranunculaceae)金蓮花亞科(Helleboroideae)鐵接子族(HelleboreaeDC.)。廣泛分布在地中海、中歐、西亞、新疆等地，在印度、埃及和中東地區(qū)也有種植。該屬約有22種，藥用植物主要有三種，分別為:瘤果黑種草(NigelIaglanduliferaFreyn)；果黑種草(Nigellasativa)；以及原產(chǎn)于歐洲南部，在新疆也有栽培的黑種草(NigelladamascenaL.)。本研究選取具新疆特有植物資源的瘤果黑種草(NigellaglanduliferaF·reyn)草桿做為研究對(duì)象。瘤果黑種草又名腺毛黑種草、斯亞旦(維語(yǔ))、色拉那博(藏語(yǔ))、景郎(傣語(yǔ))，是維吾爾族、藏族和傣族的常用藥材。已收錄于《中華人民共和國(guó)藥典》、《中國(guó)藥用植物志》、《維吾爾藥志》；功能主治:刺激消化健胃、驅(qū)風(fēng)止痛、補(bǔ)腎健腦、利尿發(fā)汗、抗蠕蟲、治療哮喘等?，F(xiàn)有成藥:十二味石榴散、復(fù)方木尼孜其顆粒及用于生發(fā)的復(fù)方斯亞旦生發(fā)油、復(fù)方斯亞旦生發(fā)酉丁等國(guó)際上對(duì)黑種草籽、果黑種草籽的化學(xué)成分及活性研究較多，已經(jīng)證實(shí)其具有抗感染、治療風(fēng)濕、鎮(zhèn)痛、類雌激素活力、抗?jié)?、抗病毒、抗?xì)菌、真菌、降脂降糖等作用。但對(duì)瘤果黑種草籽的研究只有國(guó)內(nèi)以及韓國(guó)的少數(shù)研究報(bào)道，信學(xué)雷等對(duì)瘤果黑種草提取物分段組分進(jìn)行了降脂降糖活性的研究，發(fā)現(xiàn)其中的一些部位具有較好的促進(jìn)Apo-AI與SR-BI之間的相互作用，進(jìn)而促膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)的進(jìn)行，以降低血脂；同時(shí)，利用PTP-1B、α -葡萄糖苷酶和蛋白非酶糖化抑制劑篩選模型對(duì)提取過(guò)程中的成分進(jìn)行跟蹤，已初步證實(shí)了瘤果黑種草籽中具有ΡΤΡ1Β、α -葡萄糖苷酶和蛋白非酶糖化抑制成分存在。迄今已從黑種草屬植物中分離到的化合物類型有:黃酮類化合物，皂苷類化合物，生物堿類化合物，留體化合物，酚類化合物，以及香豆素類化合物，醌類化合物，揮發(fā)油和多糖等。郝海峰、劉玉明、倪君君等先后從瘤果黑種草籽中分離得到了 17個(gè)化合物；信學(xué)雷等從瘤果黑種草籽中分離得到了 33個(gè)化合物，其中包括:7個(gè)三萜，6個(gè)黃酮，3個(gè)生物堿，4個(gè)甾體化合物，3個(gè)異苯并呋喃酮衍生物，4個(gè)酚類化合物，2個(gè)三糖，以及多種揮發(fā)油、不飽和脂肪和脂肪酸。已報(bào)道的從瘤果黑種草籽中分離得到的5個(gè)新化合物分別為:黑種草糖，黑種草三糖，黑種草堿，黑種草苷，山奈酚-3-0- a -L-鼠李糖- (I — 6)-0_[ β -D-吡喃葡萄糖-(I — 2) -O- β -D-吡喃半乳糖-(I — 2) ] -O- β -D-吡喃葡萄糖。我們對(duì)瘤果黑種草籽的生物堿的研究過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)了新骨架類型I生物堿:6_異丙基-2，2，4，8a-三甲基-8a，9-二氫-2H-茚并[2，Ι-b]吡啶-7(8H)_ 酮。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于，提供瘤果黑種草籽中具有骨架類型I的生物堿及其制備方法，該生物喊的化學(xué)名稱為:6_異丙基_2，2，4，8a_ 二甲基_8a, 9_ 二氧-2H-卻并[2，l_b]批啶-7 (8H)-酮，該方法是從瘤果黑種草籽中采用有機(jī)溶劑提取，酸溶堿沉，制得總生物堿后采用PH區(qū)帶高速逆流色譜法得到骨架類型I的生物堿成分。本發(fā)明所述的一種瘤果黑種草籽中具有骨架類型I的生物堿，結(jié)構(gòu)式為:
權(quán)利要求
1.一種瘤果黑種草籽中具有骨架類型I的生物堿，其征在于結(jié)構(gòu)式為:
2.一種如權(quán)利要求1所述的瘤果黑種草籽中具有骨架類型I的生物堿的制備方法，其特征在于按下列步驟進(jìn)行: a、將粉碎的瘤果黑種草籽，加入石油醚回流脫脂，過(guò)濾，濾渣重復(fù)用石油醚脫脂5-15次，回收濾洛并干燥，濾洛用1/2-1倍體積的氨水:丙酮=1:2-1:4混合液浸泡過(guò)夜，干燥得干燥物； b、向步驟a干燥物中加入1-3倍體積的氯仿采用微波萃取、超聲萃取、滲漏、常溫浸提或加熱提取的方法進(jìn)行提取，反復(fù)提取至無(wú)生物堿反應(yīng)，每次1-3小時(shí)，濾過(guò)，收集濾液，得到氯仿提取物； C、將步驟b氯仿提取物用氯仿溶解后，加入1-3倍體積的0.5N硫酸溶液萃取，反復(fù)萃取至無(wú)生物堿反應(yīng)，收集硫酸萃取液，合并后，硫酸萃取液再用氯仿萃取，回收硫酸水層，再用氨水堿化至PH大于10，得堿化液，過(guò)濾得到黑褐色沉淀，干燥后得到黑褐色固體粉末總生物堿； d、再將步驟c黑褐色固體粉末總生物堿，經(jīng)pH區(qū)帶高速逆流色譜分離，溶劑為甲基叔丁基醚:正丁醇:水=1-3:1:3-4，放在分液漏斗中，搖勻后靜置分層，待平衡后，分離上下相，上相有機(jī)相為固定相，上相中加入IOmM的三乙胺做為保留堿，下相水相為流動(dòng)相，下相中加入IOmM的鹽酸做為洗脫酸，先將固定相泵入分離柱，待分離柱充滿后，調(diào)整轉(zhuǎn)速至700-900轉(zhuǎn)/分，同時(shí)泵入流動(dòng)相，流速為1.0-2.0mL/min，待平衡后，由進(jìn)樣閥注入樣品，打開自外檢測(cè)器及記錄儀，檢測(cè)波長(zhǎng)254nm，按色譜圖收集所有餾分，真空干燥后，經(jīng)DragendorfT試劑顯色以及一維和二維核磁鑒定，得到具有骨架類型I的生物堿6-異丙基-2，2，4，8a-三甲基-8a，9-二氫-2H-茚并[2，Ι-b]吡啶 _7(8Η)_ 酮。
3.根據(jù)權(quán)利要求2中所述方法，其特征在于步驟a中脫脂草籽與氨水:丙酮的混合液的液比為1:2-1:4。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于步驟b超聲萃取溫度為20-40°C，常溫浸提溫度為20-30°C，加熱提取溫度為沸點(diǎn)溫度。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種瘤果黑種草籽中具有骨架類型1的生物堿及其制備方法，該生物堿的化學(xué)名稱為6-異丙基-2,2,4,8a-三甲基-8a,9-二氫-2H-茚并[2,1-b]吡啶-7(8H)-酮，該方法是從瘤果黑種草籽中采用有機(jī)溶劑提取，酸溶堿沉，制得總生物堿后采用pH區(qū)帶高速逆流色譜法得到骨架類型1的生物堿成分。本發(fā)明采用的方法，簡(jiǎn)便易行，上樣量大，可以獲得較多的純品。
文檔編號(hào)C07D221/16GK103086967SQ201310046399
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2013年2月5日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月5日
發(fā)明者信學(xué)雷, 陳其賓, 阿吉艾克拜爾·艾薩 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所