專利名稱：一種特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
一種高特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法，屬于生物化工技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
沙丁胺醇(salbutamol)，是一種短效β 2腎上腺素受體激動劑，用作平喘藥。添加微量沙丁胺醇于牲畜飼料內(nèi)，可以增加牲畜的瘦肉量及換肉率、減少脂肪，但是其毒性遠高于具有相同功能的萊克多巴胺。2002年9月10起在中國境內(nèi)禁止在飼料和動物飲用水中使用沙丁胺醇。沙丁胺醇結(jié)構(gòu)式如式(I)。
權(quán)利要求
1.一種特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法，其特征在于以沙丁胺醇為原料，沙丁胺醇與6-氨基己酸反應(yīng)合成沙丁胺醇半抗原即化合物I，化合物I通過1-乙基-3-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺EDC與N-羥基琥珀酰亞胺NHS活化、或者通過三正丁胺與氯甲酸異丁酯活化，再與載體蛋白進行偶聯(lián)制得沙丁胺醇人工抗原即化合物II，合成路線如反應(yīng)式所示:O
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法，其特征在于:所述載體蛋白為牛血清白蛋白BSA、陽離子化的牛血清白蛋白cBSA、匙孔血藍蛋白KLH、血藍蛋白LPH、雞卵清白蛋白OVA、或人血清白蛋白HSA之一種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法，其特征在于:所述沙丁胺醇半抗原即化合物I，其分子結(jié)構(gòu)式為:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法，其特征在于:所述沙丁胺醇人工抗原即化合物II，其分子結(jié)構(gòu)式為:
5.用權(quán)利要求1所述方法合成的沙丁胺醇人工抗原的應(yīng)用，其特征在于制備沙丁胺醇抗體，所述抗體為多克隆抗體和/或單克隆抗體。
6.用權(quán)利要求1所述方法合成的沙丁胺醇人工抗原的應(yīng)用，其特征在于檢測食品中的沙丁胺醇殘留。
全文摘要
一種特異性沙丁胺醇人工抗原的合成方法，屬于生物化工技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明包括如下步驟沙丁胺醇通過甲醛溶液活化，酚羥基鄰位連接上6-氨基己酸，得到沙丁胺醇半抗原；將沙丁胺醇半抗原上的羧基與載體蛋白上的氨基進行偶聯(lián)，得到沙丁胺醇人工抗原。本發(fā)明彌補了現(xiàn)有沙丁胺醇抗原合成技術(shù)的不足和缺陷，得到了一種高特異性的沙丁胺醇人工抗原，產(chǎn)生的抗體特異性高、靈敏度高，實驗結(jié)果表明，用本發(fā)明的沙丁胺醇人工抗原免疫動物得到的抗血清效價可達80000，檢測限為0.5ng/mL，半抑制濃度IC50為5ng/mL。本發(fā)明的抗原或抗體可用于建立酶聯(lián)免疫吸附分析方法和膠體金試紙快速檢測法，從而用于快速檢測食品中的沙丁胺醇殘留，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號C07K14/77GK103145831SQ20131010688
公開日2013年6月12日 申請日期2013年3月28日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月28日
發(fā)明者胥傳來, 劉麗強, 王利兵, 匡華, 徐利廣, 馬偉, 胡擁明 申請人:江南大學(xué)