專利名稱：一種野菰內(nèi)酯的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種野菰內(nèi)酯的制備方法。
背景技術(shù)：
野菰為列當(dāng)科植物野菰的全株，又叫煙管頭草、僧帽花、蛇箭草、燒不死，性味苦、涼，解毒消腫，清熱涼血，用于扁桃體炎，咽喉炎，尿路感染，骨髓炎，外用治毒蛇咬傷，疔瘡。全株含野菰酸、野菰內(nèi)酯、β_谷留醇、多烯酸E、芹菜素、β-谷留基葡萄糖式、β-胡蘿卜、視黃醇等成分。研究發(fā)現(xiàn)野菰內(nèi)酯有抗腫瘤作用，野菰內(nèi)酯，CAS號53537-93-2，分子式C11H18O3,分子量 198.26。通過文獻(xiàn)檢索，未發(fā)現(xiàn)野菰內(nèi)酯制備方法的公開。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)的不足和缺陷，提供一種野菰內(nèi)酯的制備方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
一種野菰內(nèi)酯的制備方法，其特征在于:取野菰全草切段，加入5-10倍量50-80%甲醇溶液超聲提取2-3次，提取液濃縮后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收試劑加入大孔樹脂吸附，5-10倍柱體積50-70%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，濃縮液再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集流分減壓干燥即得。所述的大孔樹脂可選:HZ816、HPD-500、ADS-7、AB-8。所述的高速逆流色譜儀分 離條件為:取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:3-5:3-7:2-5混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速700-1000rpm，流速為
l-3ml/min。采用本法制備野菰內(nèi)酯，操作簡便，制備量大，產(chǎn)品純度高，而且低污染。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施方式
:
實(shí)施例1:
野菰全草切段，取5kg，每次用50L70%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取2次，提取液減壓濃縮至500ml，加等體積乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加適量熱水?dāng)嚢杓尤際Z816大孔樹脂柱中吸附，7倍柱體積60%甲醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按2:3:5:3混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速800rpm，同時泵入下相做流定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，用流動相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，流分回收試劑，得野菰內(nèi)酯4.lg，經(jīng)HPLC檢測，含量98.1%，經(jīng)UV、IR、MS、2HNMR, 13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實(shí)施例2:野菰全草切段，取5kg，每次用30L75%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取3次，提取液減壓濃縮至600ml，加等體積乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加適量熱水?dāng)嚢杓尤階B-8大孔樹脂柱中吸附，6倍柱體積50%甲醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:3:3:2混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速850rpm，同時泵入下相做流定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為3ml/min，用流動相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，流分回收試劑，得野菰內(nèi)酯4.2g，經(jīng)HPLC檢測，含量97.3%，經(jīng)UV、IR、MS、2HNMR, 13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實(shí)施例3:
野菰全草切段，取5kg，每次用50L70%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取2次，提取液減壓濃縮至500ml，加等體積乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加適量熱水?dāng)嚢杓尤際PD-500大孔樹脂柱中吸附，8倍柱體積70%甲醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按3:5:7:5混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速800rpm，同時泵入下相做流定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2ml/min，用流動相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，流分回收試劑，得野菰內(nèi)酯3.7g，經(jīng)HPLC檢測，含量96.7%，經(jīng)UV、IR、MS、2HNMR、13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。實(shí)施例4:
野菰全草切段，取5kg，每次用50L70%甲醇溶液超聲提取30分鐘，提取2次，提取液減壓濃縮至600ml，加等體積乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液回收乙酸乙酯得萃取物。萃取物加適量熱水?dāng)嚢杓尤階DS-7大孔樹脂柱中吸附，6倍柱體積70%甲醇溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗提物。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1:3:5:4混合，充分分層后，取上相注滿高速逆流色譜管做固定相，開轉(zhuǎn)主機(jī)，轉(zhuǎn)速800rpm，同時泵入下相做流定相，建立動態(tài)平衡后，流速調(diào)節(jié)為2m l/min，用流動相溶解粗提物，由進(jìn)樣閥進(jìn)樣，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集目標(biāo)成分，連續(xù)制備，流分回收試劑，得野菰內(nèi)酯3.8g，經(jīng)HPLC檢測，含量97.3%，經(jīng)UV、IR、MS、2HNMR, 13CNMR等表征其物理性狀的數(shù)據(jù)與現(xiàn)有技術(shù)相一致。
權(quán)利要求
1.一種野菰內(nèi)酯的制備方法，其特征在于取野菰全草切段，加入5-10倍量50-80%甲醇溶液超聲提取2-3次，提取液濃縮后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收試劑加入大孔樹脂吸附，5-10倍柱體積50-70%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，濃縮液再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集流分減壓干燥即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的野菰內(nèi)酯的制備方法，其特征在于所述的大孔樹脂可選HZ816、HPD-500、ADS-7、AB-8。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的野菰內(nèi)酯的制備方法，其特征在于所述的高速逆流色譜儀分離條件為取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水，按1-3:3-5:3-7:2-5混合，取上相做固定相、下相為流動相，主機(jī)轉(zhuǎn)速700-1000rpm,流速為l_3ml/min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種操作簡便、污染小的野菰內(nèi)酯的制備方法。方法是取野菰全草切段，加入5-10倍量50-80%甲醇溶液超聲提取2-3次，提取液濃縮后用乙酸乙酯溶液萃取，收集萃取液回收試劑加入大孔樹脂吸附，5-10倍柱體積50-70%甲醇溶液洗脫，洗脫液濃縮，濃縮液再用高速逆流色譜儀分離，紫外檢測器在線監(jiān)測，收集流分減壓干燥即得。采用本發(fā)明制備野菰內(nèi)酯，產(chǎn)品純度高，易于產(chǎn)業(yè)化放大。
文檔編號C07D307/83GK103254163SQ20131018336
公開日2013年8月21日 申請日期2013年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月17日
發(fā)明者劉東鋒, 萬冬梅 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司