專利名稱：一種綿棗兒皂苷b的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域，尤其是涉及一種綿棗兒皂苷B的制備方法。
背景技術(shù)：
綿棗兒為風(fēng)信子科綿棗兒屬多年生草本植物，鱗莖含綿棗兒皂苷、綿棗兒素等皂苷成分，具有強(qiáng)心利尿、消腫止痛作用。綿棗兒皂苷B為留體皂苷，是綿棗兒皂苷的主要成分之一，具有抗腫瘤活性，CAS號(hào) 144863-06-9，分子式 C59H94O29，分子量 1267.37。通過(guò)文獻(xiàn)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)有綿棗兒皂甙B的制備方法公開(kāi)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是解決現(xiàn)有技術(shù)不足和缺陷，提供一種高效、簡(jiǎn)單的綿棗兒皂苷B的制備方法。本發(fā)明的目的是采用以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于包含以下步驟:
A.取綿棗兒打漿，加生物酶酶解3-20小時(shí)，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取，萃取液濃縮至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，得粗提物；
B.上述粗提物利用高速逆流 色譜制備，依據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器譜圖分別收集流分，干燥流分即得。所述步驟A中的生物酶可選纖維素酶、果膠酶和淀粉酶中的一種。所述步驟A中的大孔樹脂型號(hào)可選ADS-21、AB-8、NK-9和HPD500中的一種。所述步驟A中的乙醇溶液梯度洗脫為:以5-10倍柱體積30-50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再以5-10倍柱體積60-80%乙醇溶液洗脫成分。步驟B中的高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)為正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例
3-5:1-2:4-7,上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相。采用本方法制備綿棗兒皂苷B，提取效率高，產(chǎn)品收率高，操作簡(jiǎn)單，易于工業(yè)化生產(chǎn)。下面將結(jié)合具體實(shí)施方式
進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
具體實(shí)施方式
:
實(shí)施例1:
取新鮮綿棗兒鱗莖IOkg打漿加入多功能提取罐，加5%。纖維素酶酶解5小時(shí)，再加5倍量70%乙醇溶液回流提取3次，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上ADS-21大孔樹脂柱吸附，以6倍柱體積50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再以8倍柱體積70%乙醇溶液洗脫成分，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取3次，萃取液濃縮至干，以無(wú)水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例3:1:4，上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物，以800rpm轉(zhuǎn)速,流速2ml/min,用高速逆流色譜儀分離，依據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器譜圖分別收集流分，干燥流分，得白色粉末3g，含量 98.2%ο實(shí)施例2:
取新鮮綿棗兒鱗莖IOkg打漿加入多功能提取罐，加3%。淀粉酶酶解20小時(shí)，再加7倍量80%乙醇溶液回流提取2次，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上AB-8大孔樹脂柱吸附，以5倍柱體積40%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再以7倍柱體積80%乙醇溶液洗脫成分，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取3次，萃取液濃縮至干，以無(wú)水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例5:2:7，上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物，以900rpm轉(zhuǎn)速,流速3ml/min,用高速逆流色譜儀分離，依據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器譜圖分別收集流分，干燥流分，得白色粉末3.2g，含量95.4%。實(shí)施例3:
取新鮮綿棗兒鱗莖IOkg打漿加入多功能提取罐，加2%。果膠酶酶解10小時(shí)，再加8倍量90%乙醇溶液回流提取2次，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上HPD500大孔樹脂柱吸附，以8倍柱體積40%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再以6倍柱體積75%乙醇溶液洗脫成分，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取3次，萃取液濃縮至干，以無(wú)水乙醇溶解，力口入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，得粗提物。取正丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例4:1:5，上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相，流動(dòng)相溶解粗提物，以850rpm轉(zhuǎn)速,流速2ml/min,用高速逆流色譜儀分離，依據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器譜圖分別收集流分，干燥流分，得白色粉末3.1g,含量97.2%ο·
權(quán)利要求
1.一種綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于包含以下步驟: A.取綿棗兒打漿，加生物酶酶解3-20小時(shí)，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取，萃取液濃縮至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生，過(guò)濾，得粗提物； B.上述粗提物利用高速逆流色譜制備，依據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器譜圖分別收集流分，干燥流分即得。
2.如權(quán)利要求1所述的綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于所述步驟A中的生物酶可選纖維素酶、果膠酶和淀粉酶中的一種。
3.如權(quán)利要求1所述的綿棗兒皂甙B的制備方法，其特征在于所述步驟A中的大孔樹脂型號(hào)可選ADS-21、AB-8、NK-9和HPD500中的一種。
4.如權(quán)利要求1所述的綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于所述步驟A中的乙醇溶液梯度洗脫為:以5-10倍柱體積30-50%乙醇溶液洗脫雜質(zhì)，再以5-10倍柱體積60-80%乙醇溶液洗脫成分。
5.如權(quán)利要求1所述的綿棗兒皂苷B的制備方法，其特征在于所述步驟B中的高速逆流色譜溶劑系統(tǒng)為正 丁醇、冰醋酸和水溶液混合，比例3-5:1-2:4-7，上相作為固定相，下相作為流動(dòng)相。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種操作簡(jiǎn)便、污染小的綿棗兒皂苷B的制備方法。方法如下A.取綿棗兒打漿，加生物酶酶解3-20小時(shí)，再加4-10倍量70-90%乙醇溶液回流提取，提取液減壓濃縮，濃縮液加水稀釋，上大孔樹脂柱吸附，乙醇溶液梯度洗脫，洗脫液減壓回收試劑，濃縮液以水飽和的正丁醇萃取，萃取液濃縮至干，以乙醇溶解，加入丙酮至沉淀不再產(chǎn)生,過(guò)濾,得粗提物；B.上述粗提物利用高速逆流色譜制備,依據(jù)蒸發(fā)光散射檢測(cè)器譜圖分別收集流分，干燥流分即得。采用本發(fā)明生產(chǎn)綿棗兒皂苷B，所得產(chǎn)品純度高，生產(chǎn)成本低。
文檔編號(hào)C07J21/00GK103232517SQ20131018338
公開(kāi)日2013年8月7日 申請(qǐng)日期2013年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2013年5月17日
發(fā)明者劉東鋒, 萬(wàn)冬梅 申請(qǐng)人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司