一種利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素b的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，首先制備樣品溶液，然后采用高速逆流色譜儀聯(lián)用紫外檢測(cè)器進(jìn)行分離制備，根據(jù)紫外圖譜分別收集含有目標(biāo)組分的流分，減壓濃縮至干得目標(biāo)成分巴西木素和原蘇木素B；目標(biāo)成分的定性是通過(guò)質(zhì)譜結(jié)合核磁共振氫譜、碳譜確定的，純度是通過(guò)HPLC確定的。本發(fā)明不需要使用固相載體，無(wú)不可逆吸附，能夠大大減少分離制備過(guò)程中使用的溶劑，其溶劑減少量在80%以上，分離時(shí)間至少節(jié)省5倍以上，收率提高50%以上，分離出的目標(biāo)成分損失少，純度高，費(fèi)用低，經(jīng)濟(jì)環(huán)保。
【專利說(shuō)明】一種利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及天然藥物中分離化合物的方法，具體涉及一種利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素與原蘇木素B的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘇木為傳統(tǒng)中藥，在我國(guó)有著悠久的藥用歷史，中國(guó)藥典收載蘇木為豆科植物蘇ifXCaesalpinia sappan Lingum)的干燥心材,具有行血祛瘀,消腫止痛的作用。蘇木含有的化學(xué)成分主要有黃酮類、高異黃酮類、查耳酮類等成分。
[0003]巴西木素是一種天然媒介燃料，常用于蠶絲、毛皮和皮革的染色以及棉布的印花等方面；巴西木素與 原蘇木素B是蘇木藥材中的主要大量成分，也是主要的活性成分。因此開(kāi)發(fā)一種經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)單、快捷的方法得到這兩個(gè)化學(xué)成分具有比較大的生產(chǎn)應(yīng)用價(jià)值。
[0004]天然產(chǎn)物的分離大多采用柱色譜的方法進(jìn)行分離，若從蘇木中采用柱色譜分離制備巴西木素與原蘇木素B，則需要多次反復(fù)分離，其不足有:(I)耗時(shí)比較長(zhǎng)，經(jīng)常要超過(guò)一個(gè)月；(2)需要使用大量的溶劑；(3)具有死吸附現(xiàn)象，樣品或多或少都會(huì)有損失；(4)勞動(dòng)量比較大；(5)單次得到的樣品量較少，如果要得到IOmg以上的樣品，要經(jīng)過(guò)多次分離才行。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明為解決傳統(tǒng)的柱色譜分離制備目標(biāo)化合物過(guò)程中遇到的耗時(shí)長(zhǎng)、溶劑消耗量大、勞動(dòng)量大、樣品吸附嚴(yán)重、樣品損失等問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素與原蘇木素B的方法，首先制備樣品溶液，然后采用高速逆流色譜儀聯(lián)用紫外檢測(cè)器進(jìn)行分離制備，根據(jù)紫外圖譜分別收集含有目標(biāo)組分巴西木素和原蘇木素B的流分。本發(fā)明采用高速逆流色譜法聯(lián)用紫外檢測(cè)器不需要使用固相載體，無(wú)不可逆吸附，能夠大大減少分離制備過(guò)程中使用的溶劑，其溶劑減少量在80%以上，分離時(shí)間至少節(jié)省5倍以上，收率提高50%以上，分離出的目標(biāo)成分損失少，純度高，費(fèi)用低，經(jīng)濟(jì)環(huán)保。
[0006]本發(fā)明所述利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素與原蘇木素B的方法，首先制備樣品溶液，然后采用高速逆流色譜儀聯(lián)用紫外檢測(cè)器進(jìn)行分離制備，根據(jù)紫外圖譜分別收集含有巴西木素和原蘇木素B的流分，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，分別得到最終產(chǎn)物巴西木素和原蘇木素B。所述目標(biāo)成分巴西木素和原蘇木素B的定性是通過(guò)質(zhì)譜結(jié)合核磁共振氫譜、碳譜確定的，其純度是利用HPLC分析得到的，其重量是通過(guò)在分析天平上稱量得到的。
[0007]本發(fā)明所述原蘇木素B和巴西木素的結(jié)構(gòu)式如下:
【權(quán)利要求】
1.一種利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:首先制備樣品溶液，然后采用高速逆流色譜儀聯(lián)用紫外檢測(cè)器進(jìn)行分離制備，根據(jù)紫外圖譜分別收集含有巴西木素和原蘇木素B的流分，減壓濃縮至干得目標(biāo)化合物巴西木素和原蘇木素B ； 所述高速逆流色譜采用的色譜條件為:溶劑體系為氯仿:甲醇:水的體積比為4:2-4:2，上相為固定相，下相為流動(dòng)相；儀器轉(zhuǎn)速:采用順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)，轉(zhuǎn)速為400-550轉(zhuǎn)/min，流動(dòng)相流速為5.0-8.0 mL/min ;水浴溫度:20°C -30°C ;保留率:30%-80% ;檢測(cè)波長(zhǎng):280nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:具體步驟包括: (1)溶劑體系的制備 將氯仿:甲醇:水以體積比為4:2-4:2的比例混合，靜置分層，上相為固定相，下相為流動(dòng)相； (2)樣品溶液的制備 將蘇木用2飛倍量的溶劑A熱回流提取f 5次，合并提取液，減壓濃縮至無(wú)溶劑A殘留得浸膏A，浸膏A用水完全分散，再用2-5倍量水的乙酸乙酯萃取浸膏A，乙酸乙酯層減壓濃縮至干后得浸膏B ，上大孔吸附樹(shù)脂，使用5-20倍量的乙醇水溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮至干，得浸膏C，即蘇木有效部位；然后將蘇木有效部位完全溶解于由體積比為1:1的流動(dòng)相與固定相組成的溶劑中，得樣品溶液； (3)分離制備巴西木素和原蘇木素B 取樣品溶液采用高速逆流色譜儀進(jìn)行進(jìn)樣，并根據(jù)紫外檢測(cè)器譜圖分別收集含有巴西木素和原蘇木素B的流分，然后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至干，分別得到最終產(chǎn)物巴西木素和原蘇木素B; 步驟(2)所述溶劑A為甲醇溶液或乙醇溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:所述溶劑體系為氯仿:甲醇:水的體積比為4:4:2。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:所述水浴溫度為25°C。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:所述轉(zhuǎn)速為550轉(zhuǎn)/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:所述流動(dòng)相流速為7.5 mL/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:所述保留率為75%。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:步驟(2)所述溶劑A為:體積分?jǐn)?shù)為30%-100%的甲醇溶液或體積分?jǐn)?shù)為30%-100%的乙醇溶液。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征在于:步驟(2)所述大孔吸附樹(shù)脂為DlOl大孔吸附樹(shù)脂。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的利用高速逆流色譜從蘇木中分離制備巴西木素和原蘇木素B的方法，其特征 在于:步 驟(2)所述洗脫溶劑是體積分?jǐn)?shù)為5%-15%的乙醇水溶液。
【文檔編號(hào)】C07D311/94GK103450145SQ201310393712
【公開(kāi)日】2013年12月18日 申請(qǐng)日期:2013年9月3日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月3日
【發(fā)明者】徐萍萍, 關(guān)樹(shù)宏, 果德安 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海藥物研究所