一種胸腺法新的純化方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種胸腺法新的純化方法，其特征包括以下步驟：步驟1，將胸腺法新粗品用水溶解，調(diào)節(jié)pH3-5；步驟2，按體積分數(shù)設置梯度，使用流動相A沖洗聚合物反相色譜柱；步驟3，將步驟1溶液載入聚合物反相色譜柱中；步驟4，按體積分數(shù)設置梯度，洗脫梯度的初始狀態(tài)流動相B為5%，保持2分鐘，然后在5分鐘內(nèi)將流動相B比例增至25%，然后在30分鐘內(nèi)將流動相B比例增至40%。分部收集洗脫餾分；步驟5，將洗脫餾分經(jīng)過干燥得到純品胸腺法新。
【專利說明】一種胸腺法新的純化方法
【技術領域】:
[0001]本發(fā)明涉及一種多肽類藥物的純化方法，特別涉及一種胸腺法新的純化方法。
【背景技術】:
[0002]胸腺法新,英名為:Thymalfasin,為線性多肽,結(jié)構式如下:
[0003]
【權利要求】
1.一種純化胸腺法新的方法，該方法采用聚合物反相色譜法，可使成品胸腺法新中的雜質(zhì)D-Asn28-胸腺法新含量降低到0.3%以下，其特征在于，所述方法包括以下步驟: 步驟1，將胸腺法新粗品用水溶解，調(diào)節(jié)PH3-4 ； 步驟2，按體積分數(shù)設置梯度，使用流動相A沖洗聚合物反相色譜柱；步驟3，將步驟I溶液載入聚合物反相色譜柱中； 步驟4，按體積分數(shù)設置梯度，洗脫梯度的初始狀態(tài)流動相B為5%，保持2分鐘，然后在5分鐘內(nèi)將流動相B比例增至25%，然后在30分鐘內(nèi)將流動相B比例增至40%。分部收集洗脫餾分； 步驟5，將洗脫餾分經(jīng)過干燥得到純品胸腺法新； 其中色譜條件為: 色譜柱采用聚合物反相填料柱(UniPS?10-100，50mmX 250mm)； 流動相A:0.3%醋酸水溶液； 流動相B:乙腈； 梯度程序為:初始狀態(tài)流動相B為5%，保持2分鐘，然后在5分鐘內(nèi)將流動相B比例增至25%，然后在30分鐘內(nèi)將流動相B比例增至40%，流速為:80mL / min, 檢測波長為220nm。
2.根據(jù)權利要求1所述.的方法，其特征是:包括以下步驟: 步驟1，樣品處理: 將Ig胸腺法新粗肽溶解于50ml純凈水中，用氨水調(diào)節(jié)pH為3-4 ； 步驟2，平衡 按體積分數(shù)設置梯度，使用100%的流動相A沖洗聚合物反相色譜柱IOmin ； 步驟3，上樣 將樣品溶液載入色譜柱中； 步驟4，洗脫 按體積分數(shù)設置梯度，梯度的初始狀態(tài)流動相B為5%，保持2分鐘，然后在5分鐘內(nèi)將流動相B比例增至25%，然后在30分鐘內(nèi)將流動相B比例增至40%。分部收集洗脫餾分；步驟5,凍干 將洗脫餾分經(jīng)過凍干得到純品胸腺法新； 其中， 聚合物反相填料柱為(UniPS?10-100，50_X250mm)； 流動相:A為0.3%醋酸水溶液； 流動相B為乙腈； 梯度程序為:初始狀態(tài)流動相B為5%，保持2分鐘，然后在5分鐘內(nèi)將流動相B比例增至25%，然后在30分鐘內(nèi)將流動相B比例增至40%，流速為:80mL / min, 檢測波長為220nm。
【文檔編號】C07K1/20GK103467593SQ201310399935
【公開日】2013年12月25日 申請日期:2013年9月5日 優(yōu)先權日:2013年9月5日
【發(fā)明者】路楊, 楊東暉, 陳曉航 申請人:杭州諾泰制藥技術有限公司