一種高嶺土吸附法從絕經(jīng)期婦女尿液中提取尿促性素的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高嶺土吸附法從絕經(jīng)期或絕經(jīng)期后婦女的尿中提取尿促性素的方法。利用尿促性素蛋白質(zhì)在等電點溶解度最低的特性，在高嶺土吸附工序中，通過調(diào)尿液的pH值，使尿促性素易沉淀析出。技術(shù)方案是通過在絕經(jīng)期婦女尿液中加入高嶺土吸附、沉淀、脫附、沉淀、脫水、干燥步驟來實現(xiàn)從尿液中提取尿促性素。
【專利說明】一種高嶺土吸附法從絕經(jīng)期婦女尿液中提取尿促性素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說涉及從絕經(jīng)期婦女尿液中分離尿促性素方法。
【背景技術(shù)】
[0002]尿促性素是由人腦下垂體前葉部分分泌的一種糖蛋白促性腺激素，一般是從絕經(jīng)期或絕經(jīng)期后婦女的尿中經(jīng)提取純化而制得。婦女在行經(jīng)期間HMG的含量有所波動，但較低，只有婦女進入絕經(jīng)期或之后的十幾年中，其尿中HMG的含量方達到高峰(60-100iu / L尿)，并能維持在一個穩(wěn)定的水平上，HMG含有卵泡刺激素(FSH)和黃體生成素(LH)，其所含比例近似1:1。
[0003]臨床主要用于治療婦女因功能性不排卵所致的不育癥；男性因激素水平低下所引起的精子過少或活力不足。另外，還用于治療諸如婦女閉經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)、男女之性機能失調(diào)等癥。
[0004]至今為止，尚未有關(guān)于尿促性素提取方法方面的研究資料及專利文獻。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明公開了一種高嶺土吸附法從絕經(jīng)期或絕經(jīng)期后婦女的尿中經(jīng)提取尿促性素的方法。利用尿促性素蛋白質(zhì)在等電點溶解度最低的特性，在高嶺土吸附工序中，通過調(diào)尿液的PH值，使尿促性素易沉`淀析出。技術(shù)方案是通過在絕經(jīng)期婦女尿液中加入高嶺土吸附、沉淀、脫附、沉淀、脫水、干燥步驟來實現(xiàn)從尿液中提取尿促性素粗制品。
[0006]在發(fā)明的技術(shù)方案中，還具有以下技術(shù)特征:所述高嶺土吸附法包括如下步驟:
[0007]1、吸附工序:
[0008]1.1將送來的尿液，稱重過濾，輸送到反應(yīng)罐中；
[0009]1.2待尿液溫度為4_15°C條件下，緩慢加入醋酸，調(diào)節(jié)pH至3.0-4.5。
[0010]1.3計量尿液的總體積，按120-80:0.9-0.5 (L:Kg)比例加高嶺土，攪拌15分鐘，使高嶺土全部溶解，在攪拌的同時，測定PH，保持pH在3.5-4.8之間；
[0011]1.4攪拌吸附1.5-2小時后，靜置分層；
[0012]1.5將沉淀物放離心機中甩干得干吸附物。
[0013]2.脫附工序:
[0014]2.1將干吸附物稱重，加入配好的脫附液，保持pH在10.0-11.8之間，攪拌1.5小時；離心，取上層清液；
[0015]2.2沉淀物按2.1重復(fù)操作一次，得上層清液；
[0016]2.3合并二次上清液，調(diào)pH至7.5-9.0，離心取上清液，將渣子去掉；
[0017]2.4上清液用醋酸調(diào)pH至4.5-6.0，加2倍量丙酮，攪拌均勻，靜置沉淀；
[0018]2.5棄去上層廢液，底部絮狀沉淀物用離心機離心，再用適量丙酮脫水兩次，再離心。
[0019]2.6將沉淀物置于用五氧化二磷作吸水劑的真空干燥箱中真空干燥。即得尿促性素粗制品。
[0020]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果是:
[0021]利用尿促性素蛋白質(zhì)在等電點溶解度最低的特性，在高嶺土吸附
[0022]工序中，通過調(diào)尿液的pH值，使尿促性素易沉淀析出。技術(shù)方案是通過在絕經(jīng)期婦女尿液中加入高嶺土吸附、沉淀、脫附、沉淀、脫水、干燥步驟來實現(xiàn)從尿液中提取尿促性素粗制品。
【具體實施方式】
[0023]實施例1
[0024]1、吸附工序:
[0025]1.1取合格尿液IOT用二層紗布過濾，濾入陶瓷缸中；
[0026]1.2在不斷攪拌的同時，以緩慢的速度加入醋酸，調(diào)節(jié)尿液pH到4.1，加50公斤高嶺土，攪拌約120分鐘，使高嶺土全部溶解。在攪拌的同時，測定pH，保持pH在4.1-4.5之間；
[0027]1.3離心脫水，取白色沉淀物；
[0028]1.4用ρΗ4.5酸水洗滌二次，脫水，得高嶺土吸附物80kg。
`[0029]2、脫附工序:
[0030]2.1將脫水后的高嶺土吸附物放在搪瓷桶中，加入配好的脫附液，調(diào)節(jié)pH并保持在10.0-11.8之間，攪拌洗脫90分鐘；離心，取上層清液；
[0031]2.2沉淀物按2.1 ;重復(fù)操作一次，得上層清液；
[0032]2.3合并二次洗脫液，用醋酸調(diào)pH至8.5，靜置60分鐘，離心取上清液，將渣子棄去;
[0033]2.4上清液用醋酸調(diào)pH至5.0，加2倍量丙酮，稍攪拌后，放置過夜；
[0034]2.5次日，棄去上層液體，過濾底部絮狀沉淀物,待過濾物即將抽干時,加入少量丙酮洗滌一次，再抽干。
[0035]2.6將過濾物取出，置用工業(yè)無水氯化鈣或五氧化二磷作干燥劑的真空干燥器中干燥，得干燥物。
[0036]2.7將干燥物研磨成粉末即得粗制品400g，置干燥器中，陰涼處保存。
[0037]以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非是對本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更或改型為等同變化的等效實施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所作的任何簡單修改、等同變化與改型，仍屬于。
【權(quán)利要求】
1.本發(fā)明公開了一種高嶺土吸附法從從絕經(jīng)期或絕經(jīng)期后婦女的尿中提取尿促性素的方法，其特征在于所述高嶺土吸附法包括如下步驟: (1)吸附工序:將尿液過濾后，調(diào)節(jié)PH值，然后按比例加入高嶺土，攪拌，調(diào)節(jié)pH后靜置，甩干得干吸附物； (2)脫附工序:將干吸附物加入脫附液，攪拌并調(diào)節(jié)pH值，離心，取上清液；將離心渣再加入脫附液，攪拌并調(diào)節(jié)PH值，離心，取上清液；合并兩次上清液，調(diào)pH，離心取上清液，調(diào)PH后加丙酮，攪拌，靜置，離心，并用丙酮脫水，最后將沉淀物真空干燥，得尿促性素粗制品。
2.根據(jù)權(quán)利要求書1(1)所述，其特征在于:將尿液經(jīng)紗網(wǎng)過濾后，在4-15°C條件下緩慢加入醋酸，調(diào)節(jié)PH值至3.0-4.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求書1(1)所述，其特征在于:計量尿液的總體積，按(120-80):(0.9-0.5) (L:Kg)的比例加高嶺土，攪拌15分；調(diào)節(jié)pH值:3.5-4.8，攪拌1.5-2.0小時。
4.根據(jù)權(quán)利要求書3所述，其特征在于:計量尿液的總體積，按(110-100):(0.6-0.4)(L:Kg)的比例加高嶺土，攪拌15分；調(diào)節(jié)pH值:4.0-4.5，攪拌1.5-2.0小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求書1(2)所述，其特征在于:調(diào)節(jié)pH:10.0-11.8，攪拌1.5小時；離心，取上清液，將離心渣再加入脫附液，調(diào)節(jié)PH在10.0-11.8，攪拌1.5小時，離心，取上清液。
6.根據(jù)權(quán)利要求書5所述，其特征在于:調(diào)節(jié)pH:10.5-11.0，攪拌1.5小時；離心，取上清液，將離心渣再加入脫附液，調(diào)節(jié)PH在10.5-11.0，攪拌1.5小時，離心，取上清液。
7.根據(jù)權(quán)利要求書1(2)所述，其特征在于:合并兩次上清液，用酸調(diào)節(jié)pH值至7.5-9.0，離心，取上清液，再用酸調(diào)pH值至4.5-6.0后，加兩倍量的丙酮，攪拌均勻，靜置沉淀，棄去上層廢液，底部絮狀沉淀物用離心機離心，再用丙酮脫水兩次，離心后，將沉淀物真空干燥即得尿促性素粗制品。
8.一種由權(quán)利要 求1-7任意之一所述的制備方法制備得到的尿促性素粗制品。
【文檔編號】C07K14/59GK103804487SQ201310625497
【公開日】2014年5月21日 申請日期:2013年11月24日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月24日
【發(fā)明者】劉乃山, 葛翠鳳, 劉翠珍, 劉君 申請人:青島康原藥業(yè)有限公司