一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法，該方法為：將原料洗凈切碎后從投入提取罐組主機(jī)，固液兩相物質(zhì)在提取罐機(jī)組中逆向運(yùn)動中充分接觸，從而將藥材中有效成分提取出來。藥渣經(jīng)出料傳送器強(qiáng)制推動至出渣口而排出，專門的擠汁機(jī)對藥渣進(jìn)行擠壓，將藥渣中殘留藥液擠出藥材組織，減少藥渣中殘留藥液含量。提取效率更高、提取更完全。本發(fā)明同時選用大孔吸附樹脂并結(jié)合硅膠柱層析法純化，分離效果更佳?？傻米罡呤章蕿?％，含量為95％以上的蘿卜硫苷成品。
【專利說明】一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種蘿卜硫苷的制備方法，特別是涉及一種利用大孔吸附樹脂耦合硅膠柱層析分離純化蘿卜硫苷的制備方法。
【背景技術(shù)】:
[0002]花椰菜(學(xué)名:Brassicaoleracea L.var.botrytis L.),又稱花菜、菜花或椰菜花，是一種十字花科的蔬菜，為甘藍(lán)的變種。
[0003]二年生草本，高60-90厘米，被粉霜。莖直立，粗壯，有分枝。基生葉及下部葉長圓形至橢圓形，長2-3.5厘米，灰綠色，頂端圓形，開展，不卷心，全緣或具細(xì)牙齒，有時葉片下延，具數(shù)個小裂片，并成翅狀；葉柄長2-3厘米；莖中上部葉較小且無柄，長圓形至披針形，抱莖。莖頂端有I個由總花梗、花梗和未發(fā)育的花芽密集成的乳白色肉質(zhì)頭狀體；總狀花序頂生及腋生；花淡黃色，后變成白色。長角果圓柱形，長3-4厘米，有I中脈，喙下部粗上部細(xì)，長10-12毫米。種子寬橢圓形，長近2毫米，棕色?；ㄆ?月，果期5月。
[0004]蘿卜硫苷為花椰菜球莖提取物，經(jīng)科學(xué)研究及臨床應(yīng)用證明，蘿卜硫苷可以造成癌細(xì)胞的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞阻滯，同時可以誘導(dǎo)人體內(nèi)的II相解毒酶，同時抑制I型酶的產(chǎn)生，最終通過多種酶體系排出致癌物和自由基等有害成分，同時，該成分不會在人體內(nèi)殘留，對機(jī)體無副作用，是一種新型的抗癌成分。蘿卜硫苷可以有效地防止胃潰瘍、萎縮性胃炎向胃癌轉(zhuǎn)化。由于其原料花椰菜來源較廣，從中提取蘿卜硫苷已取得了可喜進(jìn)展，名稱為“從青花菜花椰菜提取蘿卜硫苷化合物的方法”的專利申請中便公開了從青花菜花椰菜植物材料的選擇與預(yù)處理，粗提，濃縮，色譜柱純化蘿卜硫苷的方法。上述專利文獻(xiàn)中的蘿卜硫苷制備工藝主要是經(jīng)過熱水提取、色譜柱分離等步驟提取而成，雖然最后的蘿卜硫苷純度很高，但其工藝在原料選擇上要求過大不易于工業(yè)化生產(chǎn)，本身耗費(fèi)大，實際應(yīng)用效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如大孔吸附樹脂耦合硅膠柱層析分離純化法分離的效果。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明目的在于提供一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法；本發(fā)明目的還在于提供一種方便快捷、原料來源豐富、提取效率高、分離純化效原料明顯、提取純度高的利用連續(xù)逆流提取與大孔吸附樹脂富集純化蘿卜硫苷的制備工藝。
[0006]本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
[0007]一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法，其步驟如下:
[0008]1)將花椰菜切碎后加入連續(xù)逆流提取罐用乙醇水溶液回流提??；
[0009]2)將經(jīng)I)處理的提取液過濾，得蘿卜硫苷粗提液:
[0010]3)將所得蘿卜硫苷粗提液濃縮，得蘿卜硫苷粗濃縮液；
[0011]4)將所得蘿卜硫苷粗濃縮液加水稀釋，并過濾，得濾液；
[0012]5)將所得濾液上廣譜型大孔吸附樹脂柱，吸附完畢用水洗雜質(zhì)，再用低度數(shù)的乙醇水溶液洗雜質(zhì)，然后用高度數(shù)的乙醇水溶液洗脫，得蘿卜硫苷洗脫液；[0013]6)將所得洗脫液濃縮成膏，得蘿卜硫苷濃縮膏；
[0014]7)將蘿卜硫苷濃縮膏拌硅膠，并將拌好的混合物置于硅膠柱上方，經(jīng)乙酸乙酯和石油醚混合液洗脫，得洗脫液；
[0015]8)將洗脫液回收溶劑后冷凍干燥得蘿卜硫苷成品；
[0016]所述步驟I)中，花椰菜切碎后經(jīng)過清洗再進(jìn)行乙醇水溶液回流提取，提取溶劑為50%~85%的乙醇水溶液。
[0017]所述步驟I)中，提取的設(shè)備為逆流提取生產(chǎn)線，包括提升機(jī)、進(jìn)料傳送、逆流提取罐組主機(jī)1、掏料器1、擠汁機(jī)1、逆流提取罐組主機(jī)2、掏料器2、擠汁機(jī)2、出料傳送、中間泵、出液泵、暫存罐、換熱器、進(jìn)液閥門等。切碎清洗后原料由提升機(jī)加料口處勻速加入，提取液自流至?xí)簝藿?jīng)由出液泵連續(xù)泵出。
[0018]所述步驟I)中，逆流生產(chǎn)線參數(shù)為，提升機(jī)頻率15~30Hz，主機(jī)I頻率18~20Hz，擠汁機(jī)I頻率45~50Hz，主機(jī)2頻率20~22Hz，擠汁機(jī)2頻率40~45Hz，出液泵流量 0.5 ~2T/h，進(jìn)料 100 ~400kg/h。
[0019]所述步驟4)中，稀釋水量為濃縮液體積的3~5倍，過濾的雜質(zhì)棄去。
[0020]所述步驟5)中，大孔樹脂吸附步驟采用濕法裝柱，保留液面，將濾液通過吸附柱，流速每分鐘0.05ml/g樹脂，樹脂型號為HPD400、HPD100、DM-130或AB-8廣譜型大孔吸附樹
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[0021]所述步驟5)中，大孔吸附樹脂柱高徑比為10~5: 1，低度數(shù)的乙醇水溶液為5 %~20 %乙醇水溶液，高度數(shù)的乙醇水溶液為50 %~80 %乙醇水溶液，洗雜質(zhì)水量為3~5BV，洗雜質(zhì)低度數(shù)的乙醇水溶液量為I~2BV，洗脫高度數(shù)的乙醇水溶液量為4BV。
[0022]所述步驟7)中，硅膠層析步驟采用濕法裝柱，保留液面，將濃縮膏按重量1:1拌活化后硅膠，并將拌好的混合物置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為50~85: 15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，洗脫體積為5BV。硅膠活化條件為，IlO0C 30min。
[0023]本發(fā)明公開一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法，該方法為:將原料粉碎后從投料斗投入，提取罐組主機(jī)旋轉(zhuǎn)，將物料從機(jī)組前端向后緩慢推進(jìn)，同時提取溶劑從機(jī)組末端的進(jìn)液管進(jìn)入提取罐內(nèi)，由罐后端穿過移動的物料向前端流動，固液兩相物質(zhì)在這種逆向運(yùn)動中充分接觸，從而將藥材中有效成分提取出來。藥渣經(jīng)出料傳送器強(qiáng)制推動至出渣口而排出，專門的擠汁機(jī)對藥渣進(jìn)行擠壓，將藥渣申殘留藥液擠出藥材組織，減少藥渣申殘留藥液含量。提取效率更高、提取更完全。
[0024]本發(fā)明同時選用大孔吸附樹脂并結(jié)合硅膠柱層析法純化，分離效果更佳。
【具體實施方式】:
[0025]實施例1:
[0026]稱取花椰菜原料2T，清洗后切碎，由提升機(jī)加料口以400kg/h的速度勻速加入，75%乙醇水溶液用管道泵以2T/h的流量由進(jìn)液管加入，提升機(jī)頻率設(shè)定為30Hz，主機(jī)I頻率設(shè)定為20Hz，擠汁機(jī)I頻率設(shè)定為50Hz，主機(jī)2頻率設(shè)定為22Hz，擠汁機(jī)2頻率設(shè)定為45Hz，得蘿卜硫苷粗提液10T，蘿卜硫苷粗提液自流至?xí)簝藿?jīng)由出液泵連續(xù)泵至濃縮罐濃縮，得蘿卜硫苷粗濃縮液600L ;將所得濃縮液加3T水稀釋，過濾除去雜質(zhì)；濾液過HPD400大孔吸附樹脂，樹脂柱高徑比為5: 1，吸附飽和后6T水洗雜質(zhì)，2T5%乙醇水溶液洗雜質(zhì)，8Τ80%乙醇水溶液洗脫，得蘿卜硫苷洗脫液7.8Τ ;洗脫液濃縮得蘿卜硫苷濃縮膏400kg;蘿卜硫苷濃縮膏拌400kg活化硅膠，置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為85: 15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，得洗脫液2000kg ;洗脫液回收溶劑后濃縮冷凍干燥得蘿卜硫苷成品20kg，含量96.2%。
[0027]實施例2:
[0028]稱取花椰菜原料800kg，清洗后切碎，由提升機(jī)加料口以200kg/h的速度勻速加入，65%乙醇水溶液用管道泵以lT/h的流量由進(jìn)液管加入，提升機(jī)頻率設(shè)定為25Hz，主機(jī)I頻率設(shè)定為18Hz，擠汁機(jī)I頻率設(shè)定為50Hz，主機(jī)2頻率設(shè)定為22Hz，擠汁機(jī)2頻率設(shè)定為45Hz，得蘿卜硫苷粗提液4T ;蘿卜硫苷粗提液自流至?xí)簝藿?jīng)由出液泵連續(xù)泵至濃縮罐濃縮，得蘿卜硫苷粗濃縮液250L ;將所得濃縮液加1.25T水稀釋，過濾除去雜質(zhì)；濾液過AB-8大孔吸附樹脂，樹脂柱高徑比為5: 1，吸附飽和后6T水洗雜質(zhì)，2T20%乙醇水溶液洗雜質(zhì)，8Τ600%乙醇水溶液洗脫，得蘿卜硫苷洗脫液7.8Τ,洗脫液濃縮得蘿卜硫苷濃縮膏150kg ；蘿卜硫苷濃縮膏拌150kg活化硅膠，置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為65: 15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，得洗脫液750kg;洗脫液回收溶劑后濃縮冷凍干燥得蘿卜硫苷成品7.5kg，含量95.8%。
[0029]實施例3:
[0030]稱取花椰菜原料1.6T，清洗后切碎，由提升機(jī)加料口以100kg/h的速度勻速加入，75%乙醇水溶液用管道泵以500kg/h的流量由進(jìn)液管加入，提升機(jī)頻率設(shè)定為25Hz，主機(jī)I頻率設(shè)定為18Hz，擠汁機(jī)I頻率設(shè)定為50Hz，主機(jī)2頻率設(shè)定為22Hz，擠汁機(jī)2頻率設(shè)定為45Hz，得蘿卜硫苷粗提液8T;蘿卜硫苷粗提液自流至?xí)簝藿?jīng)由出液泵連續(xù)泵至濃縮罐濃縮，得蘿卜硫苷粗濃縮液500L ;將所得濃縮液加2.5T水稀釋，過濾除去雜質(zhì)；濾液過DM-1308T70%乙醇水溶液洗脫，得蘿卜硫苷洗脫液7.8T ;洗脫液濃縮得蘿卜硫苷濃縮膏310kg;蘿卜硫苷濃縮膏拌310kg活化硅膠，置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為75: 15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，得洗脫液1.5T ;洗脫液回收溶劑后濃縮冷凍干燥得蘿卜硫苷成品15kg，含量97%。
【權(quán)利要求】
1.一種從花椰菜中制備蘿卜硫苷的方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 1)將花椰菜切碎后加入連續(xù)逆流提取罐用乙醇水溶液回流提?。? 2)將經(jīng)I)處理的提取液過濾，得蘿卜硫苷粗提液: 3)將所得蘿卜硫苷粗提液濃縮，得蘿卜硫苷粗濃縮液； 4)將所得蘿卜硫苷粗濃縮液加水稀釋，并過濾，得濾液； 5)將所得濾液上廣譜型大孔吸附樹脂柱，吸附完畢用水洗雜質(zhì)，再用低度數(shù)的乙醇水溶液洗雜質(zhì)，然后用高度數(shù)的乙醇水溶液洗脫，得蘿卜硫苷洗脫液； 6)將所得洗脫液濃縮成膏，得蘿卜硫苷濃縮膏； 7)將蘿卜硫苷濃縮膏拌硅膠，并將拌好的混合物置于硅膠柱上方，經(jīng)乙酸乙酯和石油醚混合液洗脫，得洗脫液； 8)將洗脫液回收溶劑后冷凍干燥得蘿卜硫苷成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟I)中，花椰菜切碎后經(jīng)過清洗再進(jìn)行乙醇水溶液回流提取，提取溶劑為50%~85%的乙醇水溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟I)中，提取的設(shè)備為逆流提取生產(chǎn)線，包括提升機(jī)、進(jìn)料傳送、逆流提取罐組主機(jī)1、掏料器1、擠汁機(jī)1、逆流提取罐組主機(jī)2、掏料器2、擠汁機(jī)2、出料傳送、中間泵、出液泵、暫存罐、換熱器、進(jìn)液閥門等。切碎清洗后原料由提升機(jī)加料口處勻速加入，提取液自流至?xí)簝藿?jīng)由出液泵連續(xù)栗出。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟I)中，逆流生產(chǎn)線參數(shù)為，提升機(jī)頻率15~30Hz，主機(jī)I頻率18~20Hz，擠汁機(jī)I頻率45~50Hz，主機(jī)2頻率20~22Hz，擠汁機(jī)2頻率40~45Hz，出液泵流量0.5~2T/h，進(jìn)料100~400kg/h.
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟4)中，稀釋水量為濃縮液體積的3~5倍，過濾的雜質(zhì)棄去。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟5)中，大孔樹脂吸附步驟采用濕法裝柱，保留液面，將濾液通過吸附柱，流速每分鐘0.05ml/g樹脂，樹脂型號為HPD400、HPD100, DM-130或AB-8廣譜型大孔吸附樹脂。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟5)中，大孔吸附樹脂柱高徑比為10~5: I，低度數(shù)的乙醇水溶液為5%~20%乙醇水溶液，高度數(shù)的乙醇水溶液為50 %~80 %乙醇水溶液，洗雜質(zhì)水量為3~5BV，洗雜質(zhì)低度數(shù)的乙醇水溶液量為I~2BV，洗脫高度數(shù)的乙醇水溶液量為4BV。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘿卜硫苷的制備新方法其特征在于所述的步驟7)中，硅膠層析步驟采用濕法裝柱，保留液面，將濃縮膏按重量1:1拌活化后硅膠，并將拌好的混合物置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為50~85: 15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，洗脫體積為5BV。硅膠活化條件為，IlO0C 30min。
【文檔編號】C07H15/14GK103709211SQ201310695016
【公開日】2014年4月9日 申請日期:2013年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月13日
【發(fā)明者】姚德坤, 蘇學(xué)輝, 姚德利, 張亞紅, 姚航, 黃運(yùn)生, 吳海龍, 孟祥敏 申請人:大興安嶺嘉迪歐營養(yǎng)原料有限公司