一種制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)及其方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)及其方法，三柱循環(huán)分離系統(tǒng)包括三個逆流色譜柱，三個泵，三個檢測器，三個收集器和四個六通閥。以第一逆流色譜柱做起始分離柱，第二逆流色譜柱和第三逆流色譜柱做相互獨立的循環(huán)分離柱，樣品經(jīng)第一逆流色譜柱進行第一維分離后，通過調(diào)節(jié)三個六通閥依次進入第二逆流色譜柱進行第二維分離，進入第三逆流色譜柱進行第三維分離，再次進入第一逆流色譜柱進行下一次循環(huán)分離，實現(xiàn)丹參酮類化合物多維循環(huán)分離。丹參酮類化合物包括二氫丹參酮Ⅰ、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、1,2-二氫丹參醌、丹參酮ⅡA、三葉鼠尾酮B、甲基丹參酮酯和丹參新醌A。本發(fā)明提取分離簡單、時間短，產(chǎn)物純度高，可連續(xù)化操作。
【專利說明】一種制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)及其方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)及其方法。
【背景技術(shù)】
[0002]逆流色譜(Counter-current chromatography CCC)是一種不需要固體支持物的液液分配色譜，因此可以避免固體支持物帶來的缺點，例如樣品損失，活性變化，拖尾以及污染。相比于高效液相色譜(High performance liquid chromatography HPLC), CCC 擁有更大的制備裝載量和更好的選擇性。因此，從微量分析到制備分離甚至工業(yè)生產(chǎn)，CCC仍是一種重要的分離純化技術(shù)。然而，逆流色譜的分辨率仍然遠遠小于HPLC、氣相色譜(Gaschromatography GC)和毛細管電泳(Capillary electrophoresis CE)。但是研究者米取了很多方法改善這一缺點，到目前為止，已經(jīng)在柱子排列順序，提高離心力，采用不同形狀繞線圈等方面進行了改進。
[0003]通常情況下，增加柱子長度會提高分離效率，但是單純增加柱子的物理長度不僅需要占用更大空間，同時需要耗費更多成本增加儀器及溶劑。循環(huán)分離則是一種有效的解決方法，它沒有增加柱子的物理長度，而是將尾端洗脫液進入首端進行循環(huán)分離，這樣既可以節(jié)省空間，又可以節(jié)約試劑，循環(huán)分離最大的風險是分開的物質(zhì)因循環(huán)后導致混合在一起，因此如何避免返混是利用循環(huán)分離的最大技術(shù)難點?，F(xiàn)有的循環(huán)色譜多是用單柱進行循環(huán)，同時采用填充柱色譜，柱尾端壓力較大導致材料要求高，也因死吸附等使樣品容易損失；有些循環(huán)分離中沒有將檢測器放在循環(huán)中，因此無法實時檢測分離情況。
[0004]丹參(Salvia miltiorrhiza Bunge)是唇形科植物丹參的干燥根和莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品。其味苦，性微寒，歸心、肝二經(jīng)，具有活血通絡，祛瘀止痛、涼血消癰、除煩安神等功效，中醫(yī)有“一味丹參飲，功同四物湯”之說。丹參酮(Tanshinones)是丹參中具有橙黃色和橙紅色特征的脂溶性二萜類化合物，按其結(jié)構(gòu)不同分為丹參酮1、丹參酮II A、丹參酮II B、隱丹參酮、二氫丹參酮1、羥基丹參酮、丹參酮甲酯、異丹參酮、異隱丹參酮等10多種成分。由于醌類成分已被還原成二酚類衍生物，后者又被氧化為醌，因此起到電子傳遞的作用。它們作為新陳代新的產(chǎn)物，通過促進或干擾生物多種生化反應，表現(xiàn)出多種生物活性。藥理活性研究表明，丹參酮在抗腫瘤、心血管疾病、抗菌消炎等方面均有良好的治療作用。
[0005]丹參酮易溶于乙醇、甲醇等有機溶劑。傳統(tǒng)的制備方法是粉碎浸泡提取后用柱層析(薄層色譜、硅膠柱色譜、制備液相色譜)反復富集純化，但是這些制備方法經(jīng)常耗時而且會因為柱填料的吸附而造成樣品損失，專利CN200610017897.4提供一種用正相硅膠柱、乙酸乙酯、苯、氯仿、60-90規(guī)格的石油醚多次提取的方法分離丹參酮，其分離次數(shù)過多，操作繁瑣，且使用了苯、氯仿等對環(huán)境污染較大的溶劑；專利CN201210549910.6中提供的丹參酮提取物及其水溶物的制備方法中只是用乙醇浸提、回流提取、減壓濃縮、純水洗滌等步驟，得到的產(chǎn)物中丹參酮II A含量僅有10.0%?15.0%，隱丹參酮物質(zhì)含量為8.0%?11.0%。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是針對上述現(xiàn)有丹參酮分離制備過程中分離流程長、所用溶劑環(huán)境危害性大、回收率不高等缺陷，而提供一種提取分離簡單、可連續(xù)化操作的制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)及其方法。
[0007]本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的:
[0008]本發(fā)明的制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)，包括三個逆流色譜柱，三個泵，三個檢測器，三個收集器和四個六通閥；其中第一六通閥做進樣閥，該進樣閥與第二六通閥的第I節(jié)點以及第一盛裝流動相容器相連；第二六通閥的第II節(jié)點與第一泵的輸入端相連，第一泵的輸出端與第一逆流色譜柱的首端相連，第一逆流色譜柱的尾端與第一檢測器的輸入端相連，第一檢測器的輸出端與第三六通閥的第I節(jié)點相連，第三六通閥的第II節(jié)點與第一收集器相連；第三六通閥的第V節(jié)點與第二盛裝流動相的容器相連，第三六通閥的第VI節(jié)點與第二泵的輸入端相連，第二泵的輸出端與第二逆流色譜柱的首端相連，第二逆流色譜柱的尾端與第二檢測器的輸入端相連，第二檢測器的輸出端與第四六通閥的第I節(jié)點相連，第四六通閥的第II節(jié)點與第二收集器相連；第四六通閥的第V節(jié)點與第三盛裝流動相容器相連，第四六通閥的第VI節(jié)點與第三泵的輸入端相連，第三泵的輸出端與第三逆流色譜柱的首端相連，第三逆流色譜柱的尾端與第三檢測器的輸入端相連，第三檢測器的輸出端與第二六通閥的第III節(jié)點相連，第二六通閥的第IV節(jié)點與第三收集器相連。
[0009]利用本發(fā)明的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)制備高純度丹參酮化合物的方法，該丹參酮類化合物包括結(jié)構(gòu)式(I) 二氫丹參酮1、結(jié)構(gòu)式(2)隱丹參酮、結(jié)構(gòu)式(3)丹參酮1、結(jié)構(gòu)式(4)1，2_ 二氫丹參醌、結(jié)構(gòu)式(5)丹參酮II A、結(jié)構(gòu)式(6)三葉鼠尾酮B、結(jié)構(gòu)式(7)甲基丹參酮酯和結(jié)構(gòu)式(8)丹參新醌A，
[0010]
【權(quán)利要求】
1.一種制備高純度丹參酮化合物的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)，其特征在于包括三個逆流色譜柱(Al、B1、Cl)，三個泵(1、2、3)，三個檢測器(4、5、6)，三個收集器(7、8、9)和四個六通閥(10、11、12、13);其中第一六通閥(10)做進樣閥，該進樣閥與第二六通閥(11)的第I節(jié)點以及第一盛裝流動相容器(14)相連；第二六通閥(11)的第II節(jié)點與第一泵(I)的輸入端相連，第一泵(I)的輸出端與第一逆流色譜柱(A)的首端相連，第一逆流色譜柱(A)的尾端與第一檢測器(4)的輸入端相連，第一檢測器(4)的輸出端與第三六通閥(12)的第I節(jié)點相連，第三六通閥(12)的第II節(jié)點與第一收集器(7)相連；第三六通閥(12)的第V節(jié)點與第二盛裝流動相的容器(15)相連，第三六通閥(12)的第VI節(jié)點與第二泵(2)的輸入端相連，第二泵(2)的輸出端與第二逆流色譜柱(B)的首端相連，第二逆流色譜柱(B)的尾端與第二檢測器(5)的輸入端相連，第二檢測器(5)的輸出端與第四六通閥(13)的第I節(jié)點相連，第四六通閥(13)的第II節(jié)點與第二收集器(8)相連；第四六通閥(13)的第V節(jié)點與第三盛裝流動相容器(16)相連，第四六通閥(13)的第VI節(jié)點與第三泵(3)的輸入端相連，第三泵(3)的輸出端與第三逆流色譜柱(C)的首端相連，第三逆流色譜柱(C)的尾端與第三檢測器(6)的輸入端相連，第三檢測器(6)的輸出端與第二六通閥(11)的第III節(jié)點相連，第二六通閥(11)的第IV節(jié)點與第三收集器(9)相連。
2.利用權(quán)利要求1所述的三柱循環(huán)分離系統(tǒng)制備高純度丹參酮化合物的方法，該丹參酮類化合物包括結(jié)構(gòu)式(I) 二氫丹參酮1、結(jié)構(gòu)式(2)隱丹參酮、結(jié)構(gòu)式(3)丹參酮1、結(jié)構(gòu)式(4) 1，2_ 二氫丹參醌、結(jié)構(gòu)式(5)丹參酮II A、結(jié)構(gòu)式(6)三葉鼠尾酮B、結(jié)構(gòu)式(7)甲基丹參酮酯和結(jié)構(gòu)式(8)丹參新醌A，
【文檔編號】C07J73/00GK103768826SQ201310750853
【公開日】2014年5月7日 申請日期:2013年12月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月30日
【發(fā)明者】吳世華, 孟杰 申請人:浙江大學