一種阿基瑞林的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物化學【技術領域】,公開了一種阿基瑞林的制備方法。本發(fā)明提供的制備方法包括:取樹脂,活化,得氨基樹脂;取所得氨基樹脂,第一逐步偶聯(lián)胍基保護的L-精氨酸、胍基保護的L-精氨酸、側(cè)鏈氨基保護的L-谷氨酰胺,得三肽樹脂;取所得三肽樹脂,第二逐步偶聯(lián)L-甲硫氨酸、側(cè)鏈羧基保護的L-谷氨酸、側(cè)鏈羧基保護的N-乙酰-L-谷氨酸,得六肽樹脂;裂解所得六肽樹脂,得第一產(chǎn)品;取所得第一產(chǎn)品,純化,即得。本發(fā)明提供的制備方法采用固相合成方法制備阿基瑞林,操作簡單,顯著提高了阿基瑞林的收率和純度,適合工業(yè)化大生產(chǎn),更有利于阿基瑞林的推廣和使用。
【專利說明】一種阿基瑞林的制備方法【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物化學【技術領域】,特別涉及一種阿基瑞林的制備方法。
【背景技術】
[0002]阿基瑞林(Argireline),又名乙酰六勝肽_3、類肉毒素桿菌素,由SNAP-25蛋白(25kDa的突觸小體相關蛋白)的N末端區(qū)衍生而來,由六個氨基酸殘基組成,分子式為C34H6tlN14O12S,分子量888.4,其具有式I所示結(jié)構(gòu),
[0003]
【權(quán)利要求】
1.一種阿基瑞林的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: 步驟1:取樹脂,活化,得氨基樹脂; 步驟2:取所述氨基樹脂,第一逐步偶聯(lián)胍基保護的L-精氨酸、胍基保護的L-精氨酸、側(cè)鏈氨基保護的L-谷氨酰胺,得三肽樹脂; 步驟3:取所述三肽樹脂,第二逐步偶聯(lián)L-甲硫氨酸、側(cè)鏈羧基保護的L-谷氨酸、側(cè)鏈羧基保護的N-乙酰-L-谷氨酸,得六肽樹脂; 步驟4:裂解所述六肽樹脂,得第一產(chǎn)品; 步驟5:取所述第一產(chǎn)品,純化,即得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟I所述樹脂為RinkAmide-MBHAResin0
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟2所述第一逐步偶聯(lián)具體為: 取所述氨基樹脂與N端保護、胍基保護的L-精氨酸在第一偶聯(lián)劑作用下,發(fā)生第一偶聯(lián)反應,經(jīng)第一脫保護,得第一氨基酸樹脂; 取所述第一氨基酸樹脂與N端保護、胍基保護的L-精氨酸在第二偶聯(lián)劑作用下,發(fā)生第二偶聯(lián)反應,經(jīng) 第二脫保護,得二肽樹脂; 取所述二肽樹脂與N端保護、側(cè)鏈氨基保護的L-谷氨酰胺在第三偶聯(lián)劑作用下,發(fā)生第三偶聯(lián)反應,經(jīng)第三脫保護,得三肽樹脂。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟3所述第二逐步偶聯(lián)具體為: 取所述三肽樹脂與N端保護的L-甲硫氨酸在第四偶聯(lián)劑作用下,發(fā)生第四偶聯(lián)反應,經(jīng)第四脫保護,得四肽樹脂; 取所述四肽樹脂與N端保護、側(cè)鏈羧基保護的L-谷氨酸在第五偶聯(lián)劑作用下,發(fā)生第五偶聯(lián)反應,經(jīng)第五脫保護,得五肽樹脂; 取所述五肽樹脂與側(cè)鏈羧基保護的N-乙酰-L-谷氨酸在第六偶聯(lián)劑作用下,發(fā)生第六偶聯(lián)反應,得六肽樹脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,所述第一偶聯(lián)劑為EDCI/HOBT/DIEA或 HOBT/DIC。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,所述第二偶聯(lián)劑為EDCI/HOBT/DIEA或 H0BT/DIC。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法,其特征在于,所述第三偶聯(lián)劑為EDCI/HOBT/DIEA或 HOBT/DIC。
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述第四偶聯(lián)劑為H0BT/DIC。
9.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述第五偶聯(lián)劑為H0BT/DIC。
10.根據(jù)權(quán)利要求4所述的制備方法,其特征在于,所述第六偶聯(lián)劑為H0BT/DIC。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟4所述裂解的裂解試劑包括三氟乙酸、茴香硫醚和水。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備方法,其特征在于,所述裂解試劑還包括苯酚和I, 2-乙二硫醇。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法,其特征在于,步驟5所述純化具體為: 取所述第一產(chǎn)品,經(jīng)第一反相色譜柱第一分離,10mmol/L的SDS水溶液-乙腈系統(tǒng)梯度洗脫,收集特征峰對應的洗脫組分,得第一次純化物;以體積百分比計,所述梯度洗脫為乙腈由15%到21%、10mmol/L的SDS水溶液由85%到79% ;取所述第一次純化物,經(jīng)第二反相色譜柱第二分離,以體積百分比計為5%的乙腈水溶液第一洗脫后,以體積百分比計為40%的乙腈水溶液第二洗脫,收集第二洗脫所得組分,即得。`
【文檔編號】C07K7/06GK103694316SQ201310755456
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月31日
【發(fā)明者】顧含華, 俞保彬, 周天瓊 申請人:杭州華津藥業(yè)股份有限公司