防止血小板活化的裝置和方法
【專利摘要】抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的方法包含通過(guò)將CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域附著于所述生物材料表面，以減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量，或抑制血小板活化。本發(fā)明的方法抑制生物材料上或其附近的血栓形成，所述生物材料位于移植物、醫(yī)學(xué)裝置、管道或治療遞送工具的表面上。還提供了實(shí)施這些方法的試劑盒和修飾的生物材料。
【專利說(shuō)明】防止血小板活化的裝置和方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明主要涉及抑制血小板活化和繼發(fā)的血栓形成事件。在具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及保護(hù)生物材料以免形成血栓的方法。
技術(shù)背景
[0002]使用生物材料，例如心血管裝置，意味著將外源性表面引入受試者的循環(huán)系統(tǒng)。血栓形成往往是與醫(yī)學(xué)裝置相關(guān)的并發(fā)癥，從而當(dāng)體內(nèi)的移植裝置與血液接觸時(shí)，形成血栓或血凝塊。血細(xì)胞和生物材料之間的相互作用能夠觸發(fā)復(fù)雜的一連串事件，包括血小板活化和粘附。
[0003]在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，由生物醫(yī)學(xué)裝置誘導(dǎo)的血栓形成應(yīng)答仍然是嚴(yán)重的問(wèn)題。特別是，心血管裝置帶來(lái)血栓形成并發(fā)癥的嚴(yán)重風(fēng)險(xiǎn)，并已知會(huì)導(dǎo)致多種類(lèi)型的有潛在致命后果的并發(fā)癥，例如動(dòng)脈支架、導(dǎo)管和人工瓣膜的阻塞，以及心肺分流術(shù)和血管形成術(shù)過(guò)程中的并發(fā)癥。盡管使用抗血小板治療，伴隨心血管裝置的血栓并發(fā)癥還是能發(fā)生。改進(jìn)心血管裝置的血液相容性成果有限，且對(duì)抑制生物材料相關(guān)的血栓形成的方法有顯著的未滿足的醫(yī)學(xué)需要。
[0004]發(fā)明概述
[0005]本發(fā)明提供了靶向信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α (SIRP-α)以抑制血小板結(jié)合和活化的方法，其總體目標(biāo)是抑制血小板介導(dǎo)的血栓形成事件而不系統(tǒng)地?fù)p害血小板的功能。
[0006]本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式提供抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的方法，其包括通過(guò)將CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域附著于所述生物材料的表面，減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量，和/或抑制血小板活化。例如，本發(fā)明的方法抑制生物材料上或其附近的血栓形成，所述生物材料位于移植物、醫(yī)學(xué)裝置、管道或治療遞送工具的表面上。
[0007]本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式提供一種生物材料，該生物材料包含以減少與生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量和抑制血小板活化的有效量附著于生物材料表面的CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域。本發(fā)明還提供抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的試劑盒，其包含CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0008]圖1A:使用抗人SIRP-α抗體(SE7C2)，由流式細(xì)胞術(shù)顯示的人血小板中的SIRP-a 表達(dá)。
[0009]圖1B:代表性的人SIRP- a的免疫染色確定血小板中的SIRP- a表達(dá)。
[0010]圖2A:通過(guò)Chandler環(huán)裝置，從在暴露于⑶47修飾的和對(duì)照的PVC管3小時(shí)后采樣的全血來(lái)評(píng)估，由于暴露于⑶47，血小板附著顯著降低。
[0011]圖2B:從暴露于⑶47修飾的和對(duì)照的PVC管3小時(shí)后采樣的全血來(lái)評(píng)估非附著的血小板活化，使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板活化的表面標(biāo)志物CD62P(*表示與PCV比較P< 0.01)
[0012]發(fā)明詳述
[0013]信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α (SIRP-α)是在骨髓來(lái)源細(xì)胞，例如來(lái)源于巨噬細(xì)胞的單核細(xì)胞，中表達(dá)的跨膜蛋白。SIRP-α信號(hào)傳導(dǎo)由定位于胞質(zhì)尾區(qū)的酪氨酸抑制基序(ITIMs)介導(dǎo)。SIRP IHMs激活含有Src同源結(jié)構(gòu)域2的磷酸酶I (SHP-1)和2 (SHP-2)。SIRP-α也可以稱為 CD172A、SHPS1、P84、MYD-1、BIT、PTPNSI 或 SIRP-1 α。
[0014]驚人地， 申請(qǐng)人:發(fā)現(xiàn)SIRP-α表達(dá)于血小板的表面。之前沒(méi)有在血小板背景下研宄SIRP-α，也沒(méi)有記錄SIRP-α在血小板中表達(dá)。因此，靶向SIRP-α是抑制血小板結(jié)合和活化的新策略，其總體目標(biāo)是抑制血小板介導(dǎo)的血栓形成事件而不系統(tǒng)地?fù)p害血小板的功能。本發(fā)明的實(shí)施方式提供抑制生物材料相關(guān)的血小板介導(dǎo)的血栓形成事件的新方法?？偟膩?lái)說(shuō)，該方法包括通過(guò)將CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域附著于生物材料的表面，抑制血小板的附著和/或活化。CD47固定化的表面在防止血小板細(xì)胞附著和活化方面具有顯著的治療潛力。
[0015]CD47，也稱為整合素相關(guān)蛋白，是廣泛表達(dá)的跨膜蛋白。它是膜蛋白免疫球蛋白超家族的成員，在N末端具有單個(gè)、可變Ig結(jié)構(gòu)域。已經(jīng)將CD47的Ig結(jié)構(gòu)域鑒定為SIRP- α的配體(Brown，EJ等(2001)Trends Cell B1lll:130-5 ;^/01'11011-們180114卩等(2000^111'.J.1mmunol.30:2130-7 ；Takizawa, H 等(2007)Nat.Tmmunol 8:1287-9 ；和 Subramanian，S等(2006)Bloodl07:2548-56)。如下文更詳細(xì)地描述， 申請(qǐng)人:證明了生物材料表面上SIRP- α和⑶47之間的相互作用，能夠通過(guò)減少粘附于所述生物材料的血小板數(shù)量和減少血小板活化，賦予生物材料血栓抵抗性。
[0016]血小板在血液中循環(huán)，并參與血凝塊(也稱作血栓)的形成。血栓形成是在血管內(nèi)形成血凝塊，阻塞血液流過(guò)循環(huán)系統(tǒng)。血凝塊(血栓)的形成可阻塞血管并導(dǎo)致例如中風(fēng)、心肌梗塞、肺栓塞或身體其他部位的血管堵塞的事件。
[0017]本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式包括抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的方法，所述方法包括通過(guò)將CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域附著于所述生物材料的表面，來(lái)減少與生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量和/或抑制血小板活化(優(yōu)選兩者)。血栓形成事件可以包括血栓形成或?qū)е卵ㄐ纬伞⑴c血栓形成有關(guān)、由血栓形成引起或表征的身體內(nèi)的任何其它事件。生物材料相關(guān)的血栓形成事件的非限制性實(shí)例包括血小板聚集、血液凝結(jié)、生物材料上或附近的血栓形成(血栓形成)、阻塞血流通過(guò)血管和/或包含生物材料的醫(yī)療裝置(例如，血液導(dǎo)管)和栓塞。
[0018]抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件是指完全地或基本上防止生物材料相關(guān)的血栓形成事件發(fā)生。減少與包含CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域的生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量是指與和對(duì)照生物材料(即，不包含CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域的生物材料)結(jié)合的血小板數(shù)量相比，減少與包含⑶47或其Ig結(jié)構(gòu)域的生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量。例如，與對(duì)照生物材料相比，與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量可以減少100%，或減少約10%到約95%之間，約25%到約90 %之間，約50 %到約85 %之間，或約70 %到約80 %之間。與包含⑶47或其Ig結(jié)構(gòu)域的生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量可以長(zhǎng)期或短期測(cè)量(例如，在生物材料的整個(gè)使用期測(cè)量，生物材料引入到個(gè)體血流后立即測(cè)量，或生物材料放入受試者血流后幾小時(shí)或幾天內(nèi)，例如約I小時(shí)后，約3小時(shí)后，約12小時(shí)后，約24小時(shí)后，或約48小時(shí)后測(cè)量)。與生物材料“結(jié)合”的血小板包括結(jié)合、附著、貼附、或粘附于生物材料的血小板。
[0019]類(lèi)似地，通過(guò)包含⑶47或其Ig結(jié)構(gòu)域的生物材料抑制血小板活化指的是，與使用對(duì)照生物材料時(shí)活化的血小板數(shù)量相比，減少了活化的血小板數(shù)量。這可以通過(guò)，例如，CD62P表面標(biāo)志物的表達(dá)來(lái)評(píng)估。CD62P是血小板顆粒膜蛋白，當(dāng)血小板活化時(shí)由血小板表面表達(dá)。例如，與對(duì)照生物材料相比，所述生物材料活化的血小板可以減少100%，或減少約10 %到約95 %之間，約25%到約75 %之間，或約40%到約60%之間?；罨难“鍞?shù)量可以長(zhǎng)期或短期檢測(cè)，如上所述。
[0020]本發(fā)明的實(shí)施方式提供生物材料，其經(jīng)修飾以減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量，和/或抑制血小板活化(優(yōu)選兩者皆具)。例如，本發(fā)明的生物材料包含CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域，所述CD4或其Ig結(jié)構(gòu)域以減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量和/或抑制血小板活化的有效量附著于所述生物材料的表面。“有效量”包括與對(duì)照相比，減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量和/或抑制血小板活化的任何量。
[0021]本文描述和示例的方法適于保護(hù)任何生物材料。生物材料包括適于生物學(xué)的、生物醫(yī)學(xué)的或醫(yī)學(xué)應(yīng)用的任何材料。生物材料的非限制性實(shí)例包括纖維織物、陶瓷、聚合物、熱塑性塑料(例如聚芳基醚酮和聚醚酮酮)、粘合劑、骨水泥、金屬等等。聚合物是最優(yōu)選的。生物材料聚合物非限制性地包括聚丙烯、聚乙烯、聚酯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氨酯、聚四氟乙烯或聚乙烯化合物(包括聚氯乙烯)、聚乙烯亞胺、聚酰胺、聚丙烯腈、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚原酸酯、聚醚酯、聚內(nèi)酯、聚氰基丙烯酸烷酯、聚乙烯醋酸乙烯酯、聚羥基丁酸酯、聚四氟乙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚乙二醇等等，或其混合物。特別優(yōu)選的聚合物包括聚氨酯和聚氯乙烯。
[0022]生物材料用于各種生物學(xué)的、生物醫(yī)學(xué)的或醫(yī)學(xué)的應(yīng)用。這些應(yīng)用包括組合物、產(chǎn)品和裝置，所裝置例如人工關(guān)節(jié)、移植物、支架、牙齒移植物、骨水泥、導(dǎo)管、管道、人工肌腱和韌帶、人工皮膚、人工心臟瓣膜、治療劑遞送工具、治療顆粒遞送工具等等。在優(yōu)選的方面，所述方法適用于保護(hù)用于制造這些組合物、產(chǎn)品和裝置的生物材料和/或涂覆于這些組合物、產(chǎn)品和裝置的表面的生物材料。于是，在優(yōu)選的方面，所述方法適用于保護(hù)包含生物材料的組合物、產(chǎn)品和裝置。優(yōu)選地，所述方法用于保護(hù)包含生物材料的移植物、管道、導(dǎo)管、和治療劑遞送工具。例如，所述方法可以用于保護(hù)選自支架(例如，動(dòng)脈支架)、導(dǎo)管、心肺旁道(bypass)、人工心臟瓣膜和血液導(dǎo)管的包含生物材料的裝置。本發(fā)明的包含生物材料的組合物、產(chǎn)品和裝置可以長(zhǎng)期使用(例如永久移植物)、短期使用(例如臨時(shí)移植物)或臨時(shí)使用，例如在一程序的過(guò)程中(例如，血管形成術(shù)或心肺分流術(shù))。
[0023]所述方法可以使用⑶47或其任何同種型。本發(fā)明的方法也可以使用⑶47的任意合適的亞結(jié)構(gòu)域，包括其細(xì)胞外Ig結(jié)構(gòu)域或亞結(jié)構(gòu)域。CD47的合適的亞結(jié)構(gòu)域或其Ig結(jié)構(gòu)域優(yōu)選能夠與SIRP-α結(jié)合，或與SIRP-α相互作用的那些。⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或其它合適的亞結(jié)構(gòu)域可以來(lái)自任何物種，包括小鼠、大鼠、兔、馬、豬、羊、牛、貓、狗、人類(lèi)等。特別優(yōu)選豬、?；蛉薈D47。
[0024]本文描述的方法適于在體外減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量，和/或抑制血小板活化，所述生物材料例如通常用于細(xì)胞培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)的生物材料。所述方法也適于在體內(nèi)減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量，和/或抑制血小板活化，所述生物材料例如永久性或暫時(shí)性移植、施用、插入或存在于動(dòng)物體內(nèi)的生物材料。
[0025]⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或適宜的亞結(jié)構(gòu)域可以根據(jù)本領(lǐng)域任何適宜的方法附著于生物材料。例如，⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或合適的亞結(jié)構(gòu)域可以生產(chǎn)在包含生物材料的組合物、產(chǎn)品或裝置的過(guò)程中與所述生物材料混合，從而CD47、其Ig結(jié)構(gòu)域或合適的亞結(jié)構(gòu)域散布于全部生物材料，包括由生物材料生產(chǎn)制備的特定組合物、產(chǎn)品或裝置的表面上?；蛘?，⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或適宜的亞結(jié)構(gòu)域涂覆于產(chǎn)品或裝置的部分或全部之上。在一些方面，⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或適宜的亞結(jié)構(gòu)域可以附著于所述生物材料，例如，通過(guò)生物材料和⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或適宜的亞結(jié)構(gòu)域之間的非共價(jià)分子間吸引力，或離子或共價(jià)鍵。
[0026]在一些優(yōu)選的方面，⑶47、Ig結(jié)構(gòu)域或其合適的亞結(jié)構(gòu)域可以通過(guò)連接分子附著于所述生物材料。所述連接分子可以與生物材料和/或CD47、Ig結(jié)構(gòu)域或其合適的亞結(jié)構(gòu)域復(fù)合或綴合。連接分子是能夠介導(dǎo)或幫助CD47、Ig結(jié)構(gòu)域或其合適的亞結(jié)構(gòu)域附著于所述生物材料的任何分子。連接分子可以是任何有機(jī)或無(wú)機(jī)化學(xué)品、蛋白質(zhì)、多肽、多核苷酸、多糖、脂質(zhì)、硫醇等。連接分子是本領(lǐng)域已知的，并且能夠根據(jù)實(shí)踐者的需要進(jìn)行選擇。一些連接分子對(duì)的非限制性實(shí)例包括親和素或鏈霉親和素和生物素，硫醇和3-(2-吡啶二巰基)_丙酸-羥基琥珀酰亞胺酯(STOP)或4-(N-馬來(lái)酰亞胺基甲基)環(huán)己烷-1-羧酸琥珀酰亞胺酯(SMCC)或其合適的變體或同種型，以及葉酸與葉酸受體。
[0027]本發(fā)明的實(shí)施方式包括使用本文描述和示例的方法保護(hù)生物材料的試劑盒。在一些方面，所述試劑盒包含CD47、CD47的Ig結(jié)構(gòu)域或其亞結(jié)構(gòu)域，和在保護(hù)生物材料的方法中使用試劑盒的說(shuō)明書(shū)。在一些方面，所述試劑盒進(jìn)一步包含一個(gè)或多個(gè)能夠附著于生物材料表面，和/或能夠附著于CD47、CD47的Ig結(jié)構(gòu)域或其亞結(jié)構(gòu)域的連接分子，并可以進(jìn)一步包含適于使連接分子附著于⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或亞結(jié)構(gòu)域的試劑。在一些方面，⑶47、其Ig結(jié)構(gòu)域或亞結(jié)構(gòu)域與連接分子復(fù)合。
[0028]提供下述實(shí)施例以更詳細(xì)地描述本發(fā)明的實(shí)施方式，所述實(shí)施例意在說(shuō)明而不是限制本發(fā)明。
實(shí)施例
[0029]實(shí)施例1:SIRP_a在血小板中表達(dá)
[0030]下述實(shí)驗(yàn)使用流式細(xì)胞術(shù)和蛋白質(zhì)印記檢測(cè)了人血小板中的SIRP-α表達(dá)。利用與SIRP-α的細(xì)胞外區(qū)域結(jié)合的SIRPa抗體(SEC72)完成使用磁珠純化的血小板的流式細(xì)胞術(shù)。如圖1A所示，接近90%的純化血小板在表面上表達(dá)SIRP-α。
[0031]由于膜受體可以脫落到血漿中，并被血小板捕捉(take up)，因此針對(duì)SIRP-α的細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域檢測(cè)抗體。在含有去污劑的緩沖液中裂解純化的血小板并通過(guò)蛋白質(zhì)印記進(jìn)行分析。SIRP-a (C-20)抗體特異地測(cè)量細(xì)胞內(nèi)SIRP-α并且在SIRP-α的正確分子量位置顯示了強(qiáng)條帶(圖1Β)。這些發(fā)現(xiàn)提示很大百分比的血小板表達(dá)SIRP-α。
[0032]實(shí)施例2:當(dāng)全血暴露于⑶47修飾的表面時(shí)，血小板活化和附著降低。
[0033]將人全血暴露于生物素化的⑶47 (⑶47Β)或賴氨酸標(biāo)記的⑶47 (⑶47L)修飾的聚氯乙烯(PVC)。將人全血暴露于⑶47修飾的和對(duì)照的PVC管三小時(shí)后，使用EDTA-HEPES緩沖液將附著的血細(xì)胞從管腔表面移除(Tabuchi N，Shibamiya A，Koyama T，F(xiàn)ukuda Τ，Oeveren Wv W，Sunamori M.Activated leukocytes adsorbed on the surface of anextracorporeal circuit.Artif Organs，2003 ；27 (6):591-4)，評(píng)估附著且活化的血小板的存在。如圖2A和2B所不，管樣品用環(huán)氧乙燒(EtO)殺囷。圖2A顯不由于暴露于CD47，來(lái)自通過(guò)ChandlerLoop Apparatus暴露于0)47修飾聚合物的全血的血小板附著顯著下降。類(lèi)似地，來(lái)自非附著血細(xì)胞的血小板活化(圖2B)也顯著下降，所述活化通過(guò)⑶62P表面標(biāo)志物的表達(dá)進(jìn)行評(píng)估。通過(guò)暴露于環(huán)氧乙烷殺菌的、⑶47修飾的血液導(dǎo)管顯示相似的結(jié)果。這些數(shù)據(jù)表明CD47修飾表面的血液相容性，以及它們臨床應(yīng)用的潛力。綜上，上述發(fā)現(xiàn)表明，很大比例的血小板表達(dá)SIRP- α，修飾的生物材料表面上SIRP- α和⑶47之間的相互作用可以減少粘著于修飾的血液導(dǎo)管上的血小板數(shù)量。
[0034]盡管本發(fā)明的描述與特定的實(shí)施方式相關(guān)聯(lián)，但應(yīng)當(dāng)理解的是，本發(fā)明不應(yīng)過(guò)度地限制于這樣特定的實(shí)施方式。事實(shí)上，所描述的本發(fā)明的組合物和方法的各種修飾和變型方式對(duì)于所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是明顯的，并且在所附權(quán)利要求的范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的方法，其包括通過(guò)將CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域附著于所述生物材料的表面來(lái)減少與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量。
2.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料相關(guān)的血栓形成事件包括在所述生物材料上或附近形成血栓。
3.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料包括聚合物。
4.權(quán)利要求3的方法，其中所述聚合物是聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氨酯、聚四氟乙烯或聚乙烯化合物，或其混合物。
5.權(quán)利要求3的方法，其中所述聚合物是聚氯乙烯。
6.權(quán)利要求3的方法，其中所述聚合物是聚氨酯。
7.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料位于移植物的表面上。
8.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料位于醫(yī)學(xué)裝置的表面上。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料位于管道的表面上。
10.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料位于治療遞送工具的表面上。
11.權(quán)利要求7的方法，其中所述移植物包含所述生物材料。
12.權(quán)利要求8的方法，其中所述醫(yī)學(xué)裝置包含所述生物材料。
13.權(quán)利要求9的方法，其中所述管道包含所述生物材料。
14.權(quán)利要求10的方法，其中所述治療劑遞送工具包含所述生物材料。
15.權(quán)利要求1的方法，其中包含所述生物材料的裝置選自支架、導(dǎo)管、心肺旁道、人工心臟瓣膜和血液導(dǎo)管。
16.權(quán)利要求1的方法，其中所述生物材料的表面包含至少一種連接分子。
17.權(quán)利要求16的方法，其中所述CD47或其Ig結(jié)構(gòu)域與所述連接分子復(fù)合。
18.權(quán)利要求1的方法，其中所述血小板表達(dá)SERP-α。
19.權(quán)利要求1的方法，其中與對(duì)照生物材料相比，與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量下降約10%到約95%之間。
20.權(quán)利要求1的方法，其中與對(duì)照生物材料相比，與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量下降約50 %到約90 %之間。
21.權(quán)利要求1的方法，其中與對(duì)照生物材料相比，與所述生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量下降約70 %到約80 %之間。
22.—種抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的方法，其包括通過(guò)將⑶47或其Ig結(jié)構(gòu)域附著于生物材料的表面來(lái)抑制血小板活化。
23.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料相關(guān)的血栓形成事件包括在所述生物材料上或附近形成血栓。
24.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料包括聚合物。
25.權(quán)利要求24的方法，其中所述聚合物是聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚氨酯、聚四氟乙烯或聚乙烯化合物，或其混合物。
26.權(quán)利要求24的方法，其中所述聚合物是聚氯乙烯。
27.權(quán)利要求24的方法，其中所述聚合物是聚氨酯。
28.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料位于移植物的表面上。
29.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料位于醫(yī)學(xué)裝置的表面上。
30.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料位于管道的表面上。
31.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料位于治療遞送工具的表面上。
32.權(quán)利要求28的方法，其中所述移植物包含所述生物材料。
33.權(quán)利要求29的方法，其中所述醫(yī)學(xué)裝置包含所述生物材料。
34.權(quán)利要求30的方法，其中所述管道包含所述生物材料。
35.權(quán)利要求31的方法，其中所述治療劑遞送工具包含所述生物材料。
36.權(quán)利要求22的方法，其中包含所述生物材料的裝置選自支架、導(dǎo)管、心肺旁道、人工心臟瓣膜、和血液導(dǎo)管。
37.權(quán)利要求22的方法，其中所述生物材料的表面包含至少一種連接分子。
38.權(quán)利要求37的方法，其中所述0)47或其結(jié)構(gòu)域與所述連接分子復(fù)合。
39.權(quán)利要求22的方法，其中所述血小板表達(dá)3。
40.權(quán)利要求22的方法，其中與對(duì)照生物材料相比，由所述生物材料活化的血小板數(shù)量下降約10%到約95%之間。
41.權(quán)利要求22的方法，其中與對(duì)照生物材料相比，由所述生物材料活化的血小板數(shù)量下降約25%到約75%之間。
42.權(quán)利要求22的方法，其中與對(duì)照生物材料相比，由所述生物材料活化的血小板數(shù)量下降約40 %到約60 %之間。
43.一種抑制生物材料相關(guān)的血栓形成事件的試劑盒，其包含⑶47或其18結(jié)構(gòu)域以及根據(jù)權(quán)利要求1的方法使用所述試劑盒的說(shuō)明書(shū)。
44.權(quán)利要求43的試劑盒，其進(jìn)一步包含能夠附著于所述生物材料表面的連接分子。
45.一種生物材料，其包含降低與生物材料結(jié)合的血小板數(shù)量和抑制血小板活化的有效量附著于生物材料表面的⑶47或其結(jié)構(gòu)域。
46.權(quán)利要求45的生物材料，其進(jìn)一步包含位于所述生物材料表面的至少一種連接分子。
【文檔編號(hào)】C07K14/745GK104507493SQ201380015533
【公開(kāi)日】2015年4月8日 申請(qǐng)日期:2013年3月15日 優(yōu)先權(quán)日:2012年3月19日
【發(fā)明者】S·J·施塔赫爾克, M·J·芬利, R·J·利維 申請(qǐng)人:費(fèi)城兒童醫(yī)院