抗vla1(cd49a)抗體藥物組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明描述了抗VLA-1抗體的制劑。
【專利說明】抗VLA1 (CD49A)抗體藥物組合物
[0001] 相關(guān)申請
[0002] 本申請要求2012年2月16日提交的美國臨時(shí)申請No. 61/599,827的優(yōu)先權(quán)，其 完整內(nèi)容全部并入本文。
[0003] 序列表
[0004] 本申請含有以ASCII形式經(jīng)由EFS-Web提交的序列表，其通過提述完整并入本文。 所述ASCII拷貝創(chuàng)建于2013年2月13日，命名為C2095-7004W0_SL. txt且大小為35, 968 字節(jié)。
[0005] 發(fā)明背景
[0006] 整聯(lián)蛋白是介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞和細(xì)胞-基質(zhì)粘附的細(xì)胞表面受體的超家族。此類異 二聚體蛋白質(zhì)（由兩個(gè)非共價(jià)連接的多肽鏈α和β鏈構(gòu)成）在發(fā)育和組織修復(fù)過程中為 細(xì)胞生長、遷移和分化提供了固著以及信號。整聯(lián)蛋白還牽涉免疫和炎性過程，所述過程需 要使細(xì)胞外滲出血管，進(jìn)入組織并且朝向感染位置。
[0007] VLA-U也稱為α?β?)屬于稱為VLA("極晚期抗原"）整聯(lián)蛋白的一類整聯(lián)蛋白。 VLA-I結(jié)合膠原（I型和IV型）和層粘連蛋白，其牽涉細(xì)胞在膠原上的粘著和遷移；膠原基 質(zhì)的收縮和重組織；和參與細(xì)胞外基質(zhì)重塑的基因的表達(dá)調(diào)控。
[0008] 已顯示VLA-I參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、與骨質(zhì)吸收相關(guān)的慢性炎性疾病的形成?；颊?的關(guān)節(jié)炎滑膜中的浸潤T細(xì)胞表達(dá)高水平的VLA-1，利用抗體阻斷其顯著地減少動物模型 的炎癥反應(yīng)和關(guān)節(jié)炎的形成。
[0009] 發(fā)明概述
[0010] 本發(fā)明至少部分基于含有高濃度抗VLA-I抗體的制劑（formulation)的開發(fā)。 一些實(shí)施方案尤其適用于通過皮下（SC)投遞對受試者如人，例如人患者的投遞。所述抗 VLA-I抗體可以是例如SAN-300,且所述抗體濃度為約彡lOOmg/mL至約225mg/mL。該制劑 提供針對炎性、免疫性或自身免疫性病癥的治療效果。例如，該制劑能提供針對炎性病癥如 類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA)的治療效果。
[0011] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征為一種水性藥物組合物，如穩(wěn)定的水性藥物組合物，其 含有抗VLA-I抗體，濃度為彡100mg/mL，例如至少約110mg/mL，至少約120mg/mL，至少約 130mg/mL，至少約140mg/mL，至少約150mg/mL，至少約160mg/mL，至少約170mg/mL，至少約 180mg/mL，至少約190mg/mL，或至少約200mg/mL。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度 為低于約200mg/mL，低于約205mg/mL，低于約210mg/mL，低于約215mg/mL，低于約220mg/ mL或低于約225mg/mL的抗VLA-I抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約 155mg/mL 至約 165mg/mL，約 165mg/mL 至約 175mg/mL，約 175mg/mL 至約 185mg/mL，約 180mg/ mL 至約 190mg/mL，約 185mg/mL 至約 195mg/mL，約 195mg/mL 至約 205mg/mL，約 205mg/mL 至 約215mg/mL或約215mg/mL至約225mg/mL的抗VLA-I抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組 合物包含濃度為大于約l〇〇mg/mL至約225mg/mL，如約160mg/mL至約210mg/mL，約175mg/ mL 至約 195mg/mL，或約 180mg/mL 至約 190mg/mL 的抗 VLA-I 抗體。
[0012] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述包含抗VLA-I抗體的水性藥物組合物還包含緩沖劑，如 乙酸鹽、組氨酸、琥珀酸鹽或磷酸鹽緩沖劑。所述緩沖劑可以濃度為約IOmM至約50mM，例如 約20mM至約40mM，如約30mM。例如，所述組合物可以含有濃度為約IOmM至約50mM，例如約 20mM至約40mM，如約30mM的組氨酸緩沖劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物含有濃度為約 IOmM至約50mM，例如約20mM至約40mM，如約30mM的乙酸鹽緩沖劑。
[0013] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物還包含賦形劑，如山梨糖醇、氯化鈉 (NaCl)、蔗糖、海藻糖、或甘露醇。所述組合物可以包含濃度為約IOOmM至約300mM，例如 IlOmM 至約 270mM，約 120mM 至約 230mM，或約 130mM 至約 210mM，約 170mM 至約 200mM，或約 180mM至約200mM的賦形劑。例如，所述組合物可以含有濃度為約180mM至約300mM，例如 約 200mM 至約 300mM，約 200mM 至約 240mM，約 230mM 至約 270mM，或約 240mM 至約 260mM 的 山梨糖醇。在另一個(gè)例子中，所述組合物可以含有濃度為約IOOmM至約200mM，例如約IlOmM 至約190mM，約120mM至約180mM，或約130mM至約170mM的NaCl。在另一個(gè)例子中，所述 組合物可以含有濃度為約200mM至約240mM，約230mM至約270mM，或約240mM至約260mM 的蔗糖。在另一個(gè)例子中，所述組合物可以含有濃度為約200mM至約240mM，約230mM至約 270mM，或約240mM至約260mM的海藻糖。在再一個(gè)例子中，所述組合物可以含有濃度為約 200mM至約240mM，約230mM至約270mM，或約240mM至約260mM的甘露醇。
[0014] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物還包含表面活性劑,如聚山梨醇酯,例 如聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在一個(gè)實(shí)施方案中，表面活性劑的濃度為約0.001 %至 約0. 5%，約0. 001%至約0. 1%，例如約0. 005%至約0. 05%，如約0. 01%的濃度。
[0015] 如本文中使用的，"表面活性劑"是一種降低液體表面張力的物質(zhì)，且用于阻止表 面吸附并充當(dāng)針對蛋白質(zhì)聚集的穩(wěn)定劑。適用于本文中的例示性表面活性劑包括，例如聚 山梨醇酯80 (亦稱為Tween 80)、聚山梨醇酯20 (亦稱為Tween 20)。還可以使用具有類似 強(qiáng)度的其他表面活性劑。
[0016] 在又一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有約4. 5至約7的pH，例如約5至 約7的pH、約5至約6的pH、約5. 5至約7的pH、或約5. 5至約6. 5的pH。在一個(gè)實(shí)施方 案中，所述組合物具有約4. 5的pH、約5的pH、約5. 5的pH、約6的pH、約6. 5的pH或約7 的pH。
[0017] 在一個(gè)實(shí)施方案中,所述水性藥物組合物包含緩沖劑、賦形劑和表面活性劑。例如 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含乙酸鹽、山梨糖醇和聚山梨醇酯80。在一個(gè)實(shí) 施方案中，乙酸鹽濃度為約20mM至約40mM，山梨糖醇濃度為約180mM至約240mM，聚山梨醇 酯80濃度為約0. 005 %至約0. 05%，且所述組合物具有約4. 5至約6的pH。在另一個(gè)實(shí)施 方案中，乙酸鹽濃度為約20mM至約40mM，山梨糖醇濃度為約200mM至約300mM，聚山梨醇酯 80濃度為約0. 0055 %至約0. 05%，且所述組合物具有約4. 5至約5. 5的pH。在一個(gè)實(shí)施 方案中，乙酸鹽濃度為約30mM，山梨糖醇濃度為約180mM至約250mM，聚山梨醇酯80濃度為 約0. 01 %，且所述制劑具有約5. 5的pH。
[0018] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含組氨酸、山梨糖醇和聚山梨醇酯20。例如， 組氨酸濃度為約20mM至約40mM，山梨糖醇濃度為約180mM至約270mM，聚山梨醇酯20濃度 為約0. 005 %至0. 05%，且所述組合物具有約6至約7的pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，組氨酸濃 度為約30禮，山梨糖醇濃度為約1801111至約2501111，聚山梨醇酯20濃度為約0.01%且所述 組合物具有約6. 0的pH。
[0019] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含乙酸鹽、NaCl和聚山梨醇酯80。 在一個(gè)實(shí)施方案中，乙酸鹽濃度為約20mM至約40mM，NaCl濃度為約120mM至約180mM，聚 山梨醇酯80濃度為約0. 005 %至約0. 05%，且所述組合物具有約4. 5至約6的pH。在一個(gè) 實(shí)施方案中，乙酸鹽濃度為約30mM，NaCl濃度為約150mM，聚山梨醇酯80濃度為約0. 01%， 且所述制劑具有約5. 5的pH。
[0020] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含組氨酸、NaCl和聚山梨醇酯20。例如，組 氨酸濃度為約20mM至約40mM，NaCl濃度為約120mM至約180mM，聚山梨醇酯20濃度為約 0. 005 %至約0. 05%，且所述組合物具有約6至約7的pH。一個(gè)實(shí)施方案中，組氨酸濃度為 約30mM，NaCl濃度為約150mM，聚山梨醇酯20濃度為約0. 01 %且所述組合物具有約6. 0的 pH〇
[0021] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物中的抗VLA-I抗體是單克隆抗體。在 另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體是CDR嫁接的抗體。在又一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗 VLA-I抗體是人源化抗體。
[0022] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體是人源化的單克隆抗體，如SAN-300。在 另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體是SAN-300的變體。例如在一些實(shí)施方案中，所述抗 體的輕鏈可變區(qū)具有與SAN-300的輕鏈可變區(qū)有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不同，但不超過2 個(gè)氨基酸殘基，3個(gè)氨基酸殘基，4個(gè)氨基酸殘基，5個(gè)氨基酸殘基，或6個(gè)氨基酸殘基不同的 氨基酸序列，和/或重鏈可變區(qū)具有與SAN-300的重鏈可變區(qū)有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不 同，但不超過2個(gè)氨基酸殘基，3個(gè)氨基酸殘基，4個(gè)氨基酸殘基，5個(gè)氨基酸殘基，或6個(gè)氨 基酸殘基不同的氨基酸序列。在一些實(shí)施方案中，一些或所有的不同是保守性變化。
[0023] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體具有以下一種或兩者：具有SEQ ID N0:4(圖2A)的氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)，和具有SEQ ID N0:5(圖2B)的氨基酸序列的重 鏈可變區(qū)。在其他實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體是這些抗體之一的變體。例如，在一些實(shí) 施方案中，所述輕鏈可變區(qū)具有與SEQ ID NO: 4中的序列有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不同，但 不超過2個(gè)氨基酸殘基，3個(gè)氨基酸殘基，4個(gè)氨基酸殘基，5個(gè)氨基酸殘基，6個(gè)氨基酸殘 基，7個(gè)氨基酸殘基，8個(gè)氨基酸殘基，9個(gè)氨基酸殘基或10個(gè)氨基酸殘基不同的氨基酸序 列，和/或重鏈可變區(qū)具有與SEQ ID N0:5限定的序列有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不同，但不 超過2個(gè)氨基酸殘基，3個(gè)氨基酸殘基，4個(gè)氨基酸殘基，5個(gè)氨基酸殘基，6個(gè)氨基酸殘基，7 個(gè)氨基酸殘基，8個(gè)氨基酸殘基，9個(gè)氨基酸殘基或10個(gè)氨基酸殘基不同的氨基酸序列。在 其他實(shí)施方案中，所述輕鏈可變區(qū)具有與SEQ ID NO:4的序列80%，85%，90%或95%相 同的氨基酸序列，和/或重鏈可變區(qū)具有與SEQ ID NO:5的序列80% ,85% ,90%或95% 相同的氨基酸序列。
[0024] 在再一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體具有以下一種或兩者：SEQ ID NO: 1 (圖 3)的輕鏈氨基酸序列，和SEQ ID N0:2(圖4)的重鏈氨基酸序列。在其他實(shí)施方案中，所述 VLA-I抗體是這些抗體之一的變體。例如，在一些實(shí)施方案中，所述抗體的輕鏈具有與SEQ ID NO: 1的序列有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不同，但不超過2個(gè)氨基酸殘基，3個(gè)氨基酸殘基， 4個(gè)氨基酸殘基，5個(gè)氨基酸殘基，6個(gè)氨基酸殘基，7個(gè)氨基酸殘基，8個(gè)氨基酸殘基，9個(gè)氨 基酸殘基或10個(gè)氨基酸殘基不同的氨基酸序列，和/或抗體的重鏈具有與SEQ ID NO: 2的 序列有一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基不同，但不超過2個(gè)氨基酸殘基，3個(gè)氨基酸殘基，4個(gè)氨基酸 殘基，5個(gè)氨基酸殘基，6個(gè)氨基酸殘基，7個(gè)氨基酸殘基，8個(gè)氨基酸殘基，9個(gè)氨基酸殘基 或10個(gè)氨基酸殘基不同的氨基酸序列。在其他實(shí)施方案中，所述抗體的輕鏈具有與SEQ ID NO:1的序列80%，85%，90%或95%相同的氨基酸序列，和/或抗體的重鏈具有與SEQ ID NO: 2的序列80 %，85 %，90 %或95 %相同的氨基酸序列。
[0025] 當(dāng)氨基酸身份不同（例如將上文所指的SEQ ID N0:4或5中的氨基酸取代為不同 的氨基酸）、有缺失或插入時(shí)，第一氨基酸序列相比于第二氨基酸序列"不同"或展現(xiàn)"不同 /差異"。不同之處可以在，例如框架區(qū)、CDR、鉸鏈或恒定區(qū)中。不同之處可以在蛋白質(zhì)內(nèi) 部或在序列端。在一些實(shí)施方案中，一些或所有的不同相比于所記載的序列是保守性變化。
[0026] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含低于20mM檸檬酸鹽，而在另一個(gè)實(shí)施方案 中，所述組合物基本上沒有檸檬酸鹽。例如，檸檬酸鹽水平包含低于20mM檸檬酸鹽，或檸檬 酸鹽水平為當(dāng)對受試者施用實(shí)施方案時(shí)對本文中描述的特性如注射部位疼痛沒有影響。
[0027] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述包含抗VLA-I抗體的水性藥物組合物穩(wěn)定達(dá)至少6個(gè) 月，至少12個(gè)月，至少18個(gè)月，至少24個(gè)月，至少30個(gè)月，或至少36個(gè)月或更長（例如至 少1年、至少2年，至少3年或更長）。例如所述組合物可以在約2°C至約8°C (例如約4°C、 約5°C )的溫度穩(wěn)定達(dá)至少6個(gè)月，至少12個(gè)月，至少18個(gè)月，至少24個(gè)月，至少30個(gè)月， 至少36個(gè)月或更長（例如至少1年、至少2年，至少3年或更長）。在一個(gè)實(shí)施方案中，所 述組合物在約2°C至約8°C的溫度穩(wěn)定達(dá)至少24個(gè)月（至少2年）。在另一個(gè)實(shí)施方案中， 所述組合物在環(huán)境溫度（約20°C至約30°C，如約25°C )穩(wěn)定達(dá)至少2天，至少3天，至少 4天，至少5天，至少6天，或至少7天或更長（例如至少1周、至少12天或至少14天或更 長）。
[0028] 在一個(gè)實(shí)施方案中，抗VLA-I抗體組合物中低于約1%，低于約2%，低于約5%， 低于約10%，或低于約15%的抗體在6個(gè)月，12個(gè)月，18個(gè)月，24個(gè)月，30個(gè)月，或36個(gè)月 或更長的時(shí)段后，如1年、2年或3年或更長的時(shí)段后聚集。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗VLA-I 抗體組合物中低于約1%，低于約2%，低于約5%，低于約10%，或低于約15%的抗體在6 個(gè)月，12個(gè)月，18個(gè)月，24個(gè)月，30個(gè)月，或36個(gè)月或更長的時(shí)段后，如1年、2年、3年或更 長的時(shí)段后碎裂（fragment)。
[0029] 在某些實(shí)施方案中，聚集或蛋白質(zhì)碎裂通過動態(tài)光散射（DLS)、大小排阻層 析（SEC)、顏色/澄清度、UV光散射或大小排阻層析來測量。在一個(gè)實(shí)施方案中，通 過DLS來測量聚集。可通過本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法來實(shí)施DLS，如記載于例 如 Nobbmann 等,"Dynamic Light Scattering as a Relative Tool for Assessing the Molecular Integrity and Stability of Monoclonal Antibodies"Biotech, and Genetic Engineering Rev. 24:117-128, 2007 中的那些。在另一個(gè)實(shí)施方案中， 通過SEC來測量聚集?？赏ㄟ^本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法來實(shí)施SEC，如記載于例 如 Skoog, D. A. !Principles of Instrumental Analysis, 6th ed. ；Thompson Brooks/ Cole:Belmont, CA, 2006, Chapter 28 中的那些。
[0030] 在一個(gè)實(shí)施方案中，水性藥物組合物中低于約I %，低于約2%，低于約5%，低于 約10%，低于約15 %或低于約20%的抗體在6個(gè)月，12個(gè)月，18個(gè)月，24個(gè)月，30個(gè)月，或 36個(gè)月或更長的時(shí)段后（例如1年、2年，3年或更長的時(shí)段后）經(jīng)歷碎裂。
[0031] 在一個(gè)實(shí)施方案中，水性藥物組合物中低于約1%，低于約2%，低于約5%， 低于約10%，低于約15 %或低于約20%的抗體在6個(gè)月，12個(gè)月，18個(gè)月，24個(gè)月， 30個(gè)月，或36個(gè)月或更長的時(shí)段后（例如1年、2年，3年或更長的時(shí)段后）經(jīng)歷脫酰 胺。在另一個(gè)實(shí)施方案中，通過測量蛋白質(zhì)損失，如通過光譜學(xué)，例如UV-Vis( "紫外線 可見（Ultraviolet-visible)"）光譜學(xué)來測定脫酰胺。UV-Vis光譜學(xué)的使用在例如 Schmid, "Biological Macromolecules:UV-visible spectrophotometry，'Encyclopedia of Life Sciences，pp.l_4(2001 年 4 月 19 日網(wǎng)上發(fā)表）中綜述。
[0032] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在將制劑存儲在封閉的容器中于約2°C至約8°C，如約4°C達(dá) 預(yù)選定的時(shí)間段，如在存儲達(dá)至少30天，至少60天，至少90天，至少180天，至少1年，至 少1. 5年，至少2年，至少2. 5年，至少3年或更長后，水性藥物組合物中的抗VLA-I抗體展 現(xiàn)出低于預(yù)選定的聚集水平。在另一個(gè)實(shí)施方案中，在將制劑存儲在封閉的容器中于約2°C 至約8°C，如約4°C達(dá)預(yù)選定的時(shí)間段時(shí)，水性藥物組合物中的抗VLA-I抗體展現(xiàn)出低于預(yù) 選定的蛋白質(zhì)損失（由于聚集所致）水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平 為低于約40%，低于約35%，低于約30%，低于約20%，低于約15%，低于約10%，低于約 8%，低于約5%，低于約3%，低于約1%，或低于約0. 5%。在一個(gè)實(shí)施方案中，在6個(gè)月、 1年、2年或3年后，制劑中低于約1%，低于約2%，低于約5%，低于約10%，低于約15%， 低于約20%，低于約30%，低于約35%，或低于約40%的抗體進(jìn)行聚集。
[0033] 蛋白質(zhì)損失可例如通過光譜學(xué)，如通過UV-Vis光譜學(xué)測量。在某些實(shí)施方案中， 聚集通過動態(tài)光散射（DLS)、顏色/澄清度、UV光散射或大小排阻層析來測量。
[0034] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)制劑經(jīng)過預(yù)選定的凍融（freeze/thaw)循環(huán)數(shù)（例如 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8或更多輪凍融循環(huán)）時(shí)，水性藥物組合物中的抗VLA-I抗體展現(xiàn)出低于 預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)選定的凍融循環(huán)數(shù)是5。"凍融循 環(huán)"是包含其中樣品為凍結(jié)的固體的至少一段時(shí)間繼之以其中樣品是液體的一段時(shí)間的順 序，或包含其中樣品為液體的至少一段時(shí)間繼之以其中樣品是凍結(jié)的固體的一段時(shí)間的順 序。所述時(shí)間段可以等于或長于，例如5分鐘，10分鐘，15分鐘，20分鐘，30分鐘，45分鐘， 60分鐘，或120分鐘，2小時(shí)，3小時(shí)，4小時(shí)，6小時(shí)，24小時(shí)，48小時(shí)，或3天，5天，10天， 或20天。所述液體和固體時(shí)間段不需要同樣長。固體時(shí)間段可以保持于0°C或更低，例 如-10°〇、-201：，-301：、-401：，-601：，或-801：。所述固體時(shí)間段可以至少為例如2小時(shí)， 3小時(shí)，4小時(shí)或更長。所述固體時(shí)間段可繼之以融解，例如在18°C，20°C，23°C或更高，直至 融化。在再次凍結(jié)樣品以開始另一輪凍融之前可將樣品保持融解達(dá)20分鐘，30分鐘，1小 時(shí)、或2小時(shí)或更長?？蓪悠芬詢鋈谘h(huán)之間的冷凍狀態(tài)或融解狀態(tài)存儲。在一個(gè)實(shí)施 方案中，在2, 3, 4, 5, 6, 7, 8或更多輪凍融循環(huán)后預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平是，例如低于約 40%，低于約35%，低于約30%，低于約20%，低于約15%，低于約10%，低于約8%，低于 約5%，低于約3%，低于約1 %，或低于約0. 5%。蛋白質(zhì)損失可通過例如UV-Vis光譜學(xué)測 量。
[0035] 在再一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)制劑受到光應(yīng)激時(shí)，如當(dāng)將組合物存儲于封閉的容器中 于2°C至8°C (例如4°C)，并暴露于1.2勒時(shí)（lux hour)白光和隨后200W/m2UV能量時(shí)，水性 藥物組合物中的抗VLA-I抗體展現(xiàn)出低于預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平。在一個(gè)實(shí)施方案中， 所述預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平為低于約40%，低于約35%，低于約30%，低于約20%，低于 約15%，低于約10%，低于約8%，低于約5%，低于約3%，低于約1%，或低于約0.5%。蛋 白質(zhì)損失可通過例如UV-Vis光譜學(xué)測量。
[0036] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)在室溫對制劑進(jìn)行攪拌，例如以550rpm，600rpm，650rpm， 700rpm，750rpm或更快搖動達(dá)預(yù)選定的時(shí)間段（如達(dá)1天、2天，3天，4天，5天或更長，例如 24小時(shí)，48小時(shí)，72小時(shí)，96小時(shí)，120小時(shí)或更長）時(shí)，水性藥物組合物中的抗VLA-I抗體 展現(xiàn)出低于預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平 為低于約40%，低于約35%，低于約30%，低于約20%，低于約15%，低于約10%，低于約 8%，低于約5%，低于約3%，低于約2%，低于約1. 5%，低于約1%，低于約0. 5%，或低于 約0. 25%。蛋白質(zhì)損失可通過例如UV-Vis光譜學(xué)測量。
[0037] 在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)所述制劑經(jīng)受預(yù)選定的氧化應(yīng)激水平時(shí)，水性藥物組合物 中的抗VLA-I抗體展現(xiàn)出低于預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平。所述預(yù)選定的氧化應(yīng)激水平可由 終濃度為〇. 04% (v/v)的過氧化氫的存在和在37°C溫育達(dá)預(yù)選定的時(shí)間段，如2小時(shí)，3小 時(shí)，4小時(shí)，5小時(shí)，或6小時(shí)或更長來提供。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失 水平為低于約35%，低于約30%，低于約25%，低于約20%，低于約15%，或低于約10%。 蛋白質(zhì)損失可通過例如UV-Vis光譜學(xué)測量。
[0038] 在一個(gè)實(shí)施方案中，當(dāng)所述制劑經(jīng)受預(yù)選定的脫酰胺應(yīng)激水平時(shí)，水性藥物組合 物中的抗VLA-I抗體展現(xiàn)出低于預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平。所述預(yù)選定的脫酰胺水平可通 過將組合物的pH提高至如pH彡9,如在存在Tris (tris (羥甲基）氨基甲烷）緩沖液的情 況下，然后在約25°C溫育組合物達(dá)預(yù)選定的時(shí)間段，如2天，3天，4天，5天，6天或更長來提 供。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)選定的蛋白質(zhì)損失水平為低于約20%，低于約15%，低于約 10%，低于約5%，低于約3%，或低于約1%。蛋白質(zhì)損失可通過例如UV-Vis光譜學(xué)測量。
[0039] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述包含抗VLA-I抗體制劑的水性藥物組合物用于皮下（SC) 施用。
[0040] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有用于患者自身施用于皮下部位的可 注射性（syringeability)。例如,在置于適用于皮下投遞的注射器中時(shí),使用足以壓低栓 塞（depress the plunger)以用于患者自身施用的壓力，可將所述水性組合物排出并由此 注射到患者的皮下部位中。所述壓力或"栓塞力（plunger force)"可以例如等于或小于 41bs。在一個(gè)實(shí)施方案中，該栓塞力將允許在10秒以內(nèi)投遞單位劑量。在另一個(gè)實(shí)施方 案中，使用不超過預(yù)選定量的栓塞力，可將置于具有預(yù)選定型號的針頭的注射器中的約ImL 水性藥物組合物以預(yù)選定的速率排出。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使用不超過預(yù)選定量的栓塞 力，可將置于具有預(yù)選定型號的針頭的注射器中的約2mL水性藥物組合物以預(yù)選定的速率 排出。例如，使用不超過41bs的栓塞力，可將置于具有25號針頭、27號針頭或30號針頭的 注射器中的約ImL水性藥物組合物以IOmL/分鐘排出。
[0041] 如本文中使用的，"單位劑量"是適用于一次性施用的量。單位劑量能提供有效量 的抗VLA-I抗體，例如減輕炎性病癥的一種或多種癥狀，如關(guān)節(jié)炎或IBD的一種或多種癥狀 的抗VLA-I抗體的量。
[0042] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述包含抗VLA-I抗體的水性藥物組合物具有適用于以注射 器皮下投遞的粘度，如低于21cP (厘泊），低于18cP，低于15cP，低于14cP，如3rpm，5rpm， 7rpm，或9rpm的粘度。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物具有約IOcP至約20cP，約IOcP至約 15cP，約 IOcP 至約 14cP，或例如 IOcP 至 13cP 的粘度，例如 3rpm，5rpm，7rpm，或 9rpm。
[0043] "粘度"是對由剪切應(yīng)力或拉伸應(yīng)力變形的流體的阻力的量度。更厚的物質(zhì)具有比 更薄的物質(zhì)更高的阻力，如此具有更高的粘度。
[0044] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物用于由醫(yī)護(hù)專業(yè)人員施用。
[0045] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種水性藥物組合物，其包含抗VLA-I抗體，所述抗 體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO:2的序列的重鏈；濃度為約IOmM 至約50mM的乙酸鹽；濃度為約180mM至約275mM的山梨糖醇；0. 005%至0. 5%的聚山梨醇 酯80 ;約4. 5至約6. 0的pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體濃度為彡100mg/mL至約225mg/mL, 例如約120mg/mL至約210mg/mL,約140mg/mL至約200mg/mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，抗體 濃度為約 155mg/mL 至約 195mg/mL，約 160mg/mL 至約 190mg/mL，或約 170mg/mL 至約 180mg/ mL。在一些實(shí)施方案中，抗體濃度為約160mg/mL，約165mg/mL，約175mg/mL，約180mg/mL或 約 190mg/mL。
[0046] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約20mM至約40mM，例如 約30mM的乙酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約180mM至約 275mM，例如約200mM至約240mM的山梨糖醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含 有濃度為約250mM的山梨糖醇。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約 0. 005%至約0. 05%，如約0. 01 %的聚山梨醇酯80。在又一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組 合物具有約5. 5的pH。
[0047] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述包含抗VLA-I抗體的水性藥物組合物具有約80m0sm/kg 至約 500m0sm/kg，例如約 100m0sm/kg 至約 450m0sm/kg，約 150m0sm/kg 至約 400m0sm/kg，約 200m0sm/kg 至約 350m0sm/kg，例如約 280m0sm/kg 至約 350m0sm/kg，例如約 300m0sm/kg 至 約325m0sm/kg的滲透度（osmolality)。在一個(gè)例子中，所述包含抗VLA-I抗體的水性藥物 組合物具有低于約500m0sm/kg，低于約455m0sm/kg，低于約405m0sm/kg，低于約355m0sm/ kg，低于約305m0sm/kg，或低于約255m0sm/kg的滲透度。
[0048] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約170mg/mL至約210mg/ mL的抗VLA-I抗體，該抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物還包含濃度為約25mM至約35mM的乙酸鹽，濃度 為約180mM至約275mM的山梨糖醇，濃度為約0. 005 %至約0. 02 %的聚山梨醇酯80,和約 5. 5 的 pH。
[0049] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約185mg/mL至約195mg/mL 的抗VLA-I抗體，該抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序列 的重鏈；濃度為約30mM的乙酸鹽；濃度為約250mM的山梨糖醇；濃度為約0. 01 %的聚山梨 醇酯80 ;和約5. 5的pH。
[0050] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約190mg/mL的抗VLA-I抗 體。
[0051] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種水性藥物組合物，其包含抗VLA-I抗體，所述抗 體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO:2的序列的重鏈；濃度為約IOmM 至約50禮的乙酸鹽；濃度為約1201111至約1801111的似(：1;濃度為約0.005%至約0.05%的 聚山梨醇酯80 ;和約4. 5至約6. 0的pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體濃度為彡100mg/mL 至約 225mg/mL，例如約 120mg/mL 至約 210mg/mL，約 140mg/mL 至約 200mg/mL。在另一個(gè)實(shí) 施方案中，所述抗體濃度為約155mg/mL至約195mg/mL，約160mg/mL至約190mg/mL，或約 170mg/mL至約180mg/mL。在一些實(shí)施方案中，所述抗體濃度為約160mg/mL，約165mg/mL, 約 175mg/mL，約 180mg/mL 或約 190mg/mL。
[0052] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約20mM至約40mM，例如 約30mM的乙酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約130mM至約 170mM，例如約HOmM至約160mM的NaCl。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃 度為約150mM的NaCl。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約0. 005%至 約0. 05%，如約0. 01 %的聚山梨醇酯80。在再一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有 約5. 5的pH。
[0053] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述包含抗VLA-I抗體的水性藥物組合物具有80m0sm/kg至 350m0sm/kg的滲透度。
[0054] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約170mg/mL至約210mg/ mL的抗VLA-I抗體，所述抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的 序列的重鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物還包含濃度為約25mM至約35mM的乙酸鹽，濃 度為約120禮至約1801111的似(：1，濃度為約0.005%至約0.02%的聚山梨醇酯80，和約5.5 的pH。
[0055] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物含有濃度為約185mg/mL至約195mg/mL 的抗VLA-I抗體，所述抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重鏈；濃度為約30mM的乙酸鹽；濃度為約150mM的NaCl ;約0. 01 %的聚山梨醇酯80 ; 和約5. 5的pH。
[0056] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約190mg/mL的抗VLA-I抗 體。
[0057] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種水性藥物組合物，其包含抗VLA-I抗體，所述 抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID N0:2的序列的重鏈；濃度為約 10禮至約501111的組氨酸；濃度為約1801111至約3001111的山梨糖醇 ；濃度為約0.005%至 約0. 05%的聚山梨醇酯20 ;和約5. 5至約7. 0的pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體濃度 為 > lOOmg/mL 至約 225mg/mL，例如約 120mg/mL 至約 210mg/mL，約 140mg/mT,至約 200mg/ mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體濃度為約155mg/mL至約195mg/mL,約160mg/mL至約 190mg/mL，或約170mg/mL至約180mg/mL。在一些實(shí)施方案中，所述抗體濃度為約160mg/mL, 約 165mg/mL，約 175mg/mL，約 180mg/mL 或約 190mg/mL。
[0058] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為20mM至40mM，如濃度為約30mM的組氨 酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為220mM至280mM，例如240mM至260mM，如 約250mM的山梨糖醇。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約0. 005 %至0. 05%， 如約0.01 %的聚山梨醇酯20。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物具有約6.0的pH，而在再 一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物具有約280m0sm/kg至約350m0sm/kg的滲透度。
[0059] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約160mg/mL至約200mg/mL 的抗VLA-I抗體，所述抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重鏈；濃度為約25mM至約35mM的組氨酸；濃度為約240mM至約260mM的山梨糖醇；濃 度為約0. 005%至約0. 02%的聚山梨醇酯20 ;和約6的pH。
[0060] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約170mg/mL至約180mg/mL的抗 VLA-I抗體，所述抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序列的重 鏈；濃度為約30mM的組氨酸；濃度為約250mM的山梨糖醇；濃度為約0. 01 %的聚山梨醇酯 20 ;和約6的pH。
[0061] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約180mg/mL的抗體。
[0062] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種水性藥物組合物，其包含抗VLA-I抗體，所述抗 體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO:2的序列的重鏈；濃度為約IOmM 至約50禮的組氨酸；濃度為約1201111至約1801111的似(：1;濃度為約0.005%至約0.05%的 聚山梨醇酯20 ;和約5. 5至約7. 0的pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗體濃度為彡100mg/mL 至約 225mg/mL，例如約 120mg/mL 至約 210mg/mL，或約 140mg/mL 至約 200mg/mL。在另一個(gè) 實(shí)施方案中，所述抗體濃度為約155mg/mL至約195mg/mL，約160mg/mL至約190mg/mL，或約 170mg/mL至約180mg/mL。在一些實(shí)施方案中，所述抗體濃度為約160mg/mL，約165mg/mL, 約 175mg/mL，約 180mg/mL 或 190mg/mL。
[0063] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約20mM至約40mM，如濃度為約30mM的 組氨酸。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約130mM至約170mM，例如約HOmM 至約160mM，如約150mM的NaCl。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約0. 005% 至約0. 05%，如約0. 01 %的聚山梨醇酯20。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物具有約6. 0 的pH,而在再一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物具有約280m0sm/kg至約350m0sm/kg的滲透度。
[0064] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含濃度為約160mg/mL至約200mg/mL 的抗VLA-I抗體，所述抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序 列的重鏈；濃度為約25mM至約35mM的組氨酸；濃度為約HOmM至約160mM的NaCl ;濃度為 約0· 005%至約0· 02%的聚山梨醇酯20 ;和約6的pH。
[0065] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約170mg/mL至約180mg/mL的抗 VLA-I抗體，所述抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和具有SEQ ID NO: 2的序列的重 鏈；濃度為約30mM的組氨酸；濃度為約150mM的NaCl ;約0. 01 %的聚山梨醇酯20 ;和約6 的pH。
[0066] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含濃度為約180mg/mL的抗體。
[0067] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種水性藥物組合物，其含有對治療炎性疾病有效 的抗VLA-I抗體的量；和用于投遞適用于皮下投遞的制劑中的有效量抗體的工具。
[0068] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于單位劑量形式的本文中所述的水性藥物組合物。在 一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含約200mg的抗VLA-I抗體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述 組合物包含約155mg至約165mg，約165mg至約175mg，約175mg至約185mg，約185mg至約 195mg，約 195mg 至約 205mg，約 205mg 至約 215mg，或約 215mg 至約 225mg 的抗 VLA-1 抗體。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物以約160mg至約210mg的抗體，例如約180mg或約190mg包 含抗VLA-I抗體。
[0069] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述含有抗VLA-I抗體的水性藥物組合物在對人施用時(shí)將對 人投遞約2. Omg抗體每kg體重至約4. Omg抗體每kg體重。
[0070] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有約0. 25mL至約I. 5mL，如約 0. 5mL,約0. 75mL,或約I. OmL的體積。在一個(gè)實(shí)施方案中，單位劑量以約80mg至約315mg， 如約 IOOmg,約 160mg，約 180mg，約 190mg，約 210mg，約 250mg，或約 300mg 投遞抗 VLA-I 抗 體。
[0071] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于單位劑量的抗VLA-I抗體的水性制劑，其中所述 單位劑量的施用將以約〇. 〇3mg每kg體重至約IOmg每kg體重，約0. 03mg每kg體重至約 6mg每kg體重，約0. Img每kg體重至約6mg每kg體重，約0. 3mg每kg體重約6mg每kg體 重，約0. 3mg每kg體重至約3mg每kg體重，約Img每kg體重約3mg每kg體重，約2. Omg 每kg體重至約4. Omg每kg體重投遞抗VLA-I抗體。例如，對人施用的單位劑量將以約 2. lmg/kg，約 2. 2mg/kg，約 2. 3mg/kg，約 2. 5mg/kg，約 2. 8mg/kg，約 3. Omg/kg，約 3. lmg/kg, 約 3. 2mg/kg，約 3. 3mg/kg，約 3. 4mg/kg，或約 3. 6mg/kg 投遞。
[0072] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于本文中所述水性藥物組合物的多種單位劑量形式。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多種是兩種。
[0073] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多種單位劑量形式合起來包含至少約160mg抗VLA-I抗 體，至少約170mg抗VLA-I抗體，至少約180mg抗VLA-I抗體，至少約190mg抗VLA-I抗體， 至少約200mg抗VLA-I抗體，至少約300mg抗VLA-I抗體，至少約400mg抗VLA-I抗體，至 少約500mg抗VLA-I抗體，至少約600mg抗VLA-I抗體，至少約700mg抗VLA-I抗體，至少 約800mg抗VLA-I抗體，至少約900mg抗VLA-I抗體，至少約IOOOmg抗VLA-I抗體。在另 一個(gè)實(shí)施方案中，所述多種單位劑量形式合起來包含約155mg抗VLA-I抗體至約165mg抗 VLA-I抗體，約165mg抗VLA-1抗體至約175mg抗VLA-1抗體，約175mg抗VLA-1抗體至約 185mg抗VLA-1抗體，約185mg抗VLA-1抗體至約195mg抗VLA-1抗體，約195mg抗VLA-1 抗體至約205mg抗VLA-1抗體,約205mg抗VLA-1抗體至約215mg抗VLA-1抗體,約215mg 抗VLA-I抗體至約225mg抗VLA-I抗體。在又一個(gè)實(shí)施方案中，所述多種單位劑量形式合 起來包含約160mg抗VLA-I抗體至約210mg抗VLA-I抗體，例如約180mg抗VLA-I抗體，或 約190mg抗VLA-I抗體。
[0074] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多種單位劑量形式合起來對人施用時(shí)，將投遞約0. 03mg 抗VLA-I抗體每kg體重至約10. Omg抗VLA-I抗體每kg體重。
[0075] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述多種單位劑量形式的每一種具有約0. 25mL至約3mL，例 如約ImL,約I. 5mL，約2mL，或約2. 5mL的體積。
[0076] 在一個(gè)實(shí)施方案中，每種劑量形式可含有等量的抗體。
[0077] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種包含如本文中描述的單位劑量形式的試劑盒。
[0078] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種容器，其中置有本文中所述的水性藥物組合物。 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述容器其中置有如本文中描述的單位劑量制劑。
[0079] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述容器是投遞裝置，如注射器。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述 容器適用于皮下施用。
[0080] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種施用本文中描述的水性藥物組合物的方法，其 通過激活投遞裝置，然后對患者施用置于所述投遞裝置中的抗VLA-I抗體。
[0081] 在一個(gè)實(shí)施方案中，激活所述裝置包括以下一項(xiàng)或多項(xiàng)：從包裝取出裝置，從裝置 的針頭或孔取下蓋，或搖動該裝置。在另一個(gè)實(shí)施方案中，激活裝置還包括檢查裝置中沉淀 物、帶色材料的存在、或池度、或乳光（opalescence)。
[0082] 在一個(gè)實(shí)施方案中，患者例如患有炎性病癥的患者，實(shí)施施用所述組合物的一個(gè) 或兩個(gè)步驟。
[0083] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述患者患有關(guān)節(jié)炎，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；炎性腸病；狼瘡； 移植排斥；或銀屑病。
[0084] 本發(fā)明特征在于優(yōu)化對患者提供抗VLA-I抗體如SAN-300的液體制劑的方法。
[0085] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法允許提供的抗體濃度的逐漸增加。這允許抗體濃度 的上升且能允許監(jiān)測患者在濃度增加時(shí)的耐受性、反應(yīng)等。例如，所述方法可通過以一或多 種初始或相對較低的濃度對患者提供SAN-300開始，接著以最終、更高的濃度對患者提供 SAN-300。針對起始濃度的例示性制劑將通常具有低于約80 %，低于約70 %，低于約50 %， 低于約30%，低于約20 %或低于約10%的最終更高濃度的抗體濃度。典型的初始濃度可 以為，例如約20mg/mL，約30mg/mL，或約40mg/mL。典型的最終濃度將為，例如約150mg/mL 至約 225mg/mL，例如約 160mg/mL，約 170mg/mL，約 175mg/mL，約 180mg/mL，約 190mg/mL，或 約200mg/mL。在一些實(shí)施方案中，患者將以一種或多種初始濃度接受一次或多次施用。例 如，在一個(gè)實(shí)施方案中，患者將在許多次施用中接受遞增濃度。在一些實(shí)施方案中，在達(dá)到 最終濃度之前，患者將以一種或多種初始濃度接受2, 3, 4, 5, 6, 7或8次施用。例如，患者將 以第一初始濃度接受一次或多次施用，并以第二種更高濃度接受一次或多次施用。在一些 實(shí)施方案中，在一次或多次施用后評估患者的癥狀，包括不良癥狀。在一些實(shí)施方案中，僅 在確定患者對先前的施用不具有不可接受的不良反應(yīng)后，才對該患者施用具有增加濃度的 SAN-300的制劑。
[0086] 在一個(gè)實(shí)施方案中，提供包裝在容器中的抗VLA-I抗體組合物，所述容器可以是 例如投遞裝置，如注射器。
[0087] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種指導(dǎo)需要抗VLA-I抗體療法的患者如何施用 本文中所述制劑的方法。所述方法包括（i)向患者提供至少一個(gè)單位劑量的本文中所述的 抗VLA-I抗體制劑；并（ii)指導(dǎo)該患者自己皮下施用至少一個(gè)單位劑量。本發(fā)明包括的另 一種方法是包括以下的治療方法：（i)向患者提供至少兩個(gè)單位劑量的抗VLA-I抗體制劑； 并（ii)指導(dǎo)該患者自己皮下施用所述單位劑量，例如皮下，一次一劑。
[0088] 在一個(gè)實(shí)施方案中，患者患有炎性、免疫性或自身免疫性病癥，如關(guān)節(jié)炎病癥 如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年型關(guān)節(jié)炎（juvenile arthritis)、銀屑病關(guān)節(jié)炎（psoriatic arthritis),或強(qiáng)直性脊柱炎（ankylosing spondylitis);組織或器官移植排斥或移 植物抗宿主??；急性CNS損傷，如中風(fēng)或脊髓損傷；慢性腎??；過敏反應(yīng)，如過敏性哮 喘；1型糖尿??；炎性腸病，如克羅恩?。–rohn' s disease)和潰瘍性結(jié)腸炎；重癥肌 無力（myasthenia gravis);纖維肌痛（fibromyalgia);炎性/免疫性皮膚病癥，如銀 屑病、白癜風(fēng)、皮炎或扁平苔蘚（lichen planus);系統(tǒng)性紅斑狼瘡；斯耶格倫氏綜合征 (Sjogren's Syndrome);血液癌，如多發(fā)性骨髓瘤、白血病或淋巴瘤；實(shí)體瘤，如肉瘤或 癌，如肺、乳腺、前列腺或腦的；或纖維化病癥，如肺纖維化、骨髓纖維化、肝硬化、系膜增 生性腎小球腎炎（mesangial proliferative glomerulonephritis)、新月體腎小球腎炎 (crescentic glomerulonephritis)、糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy)或腎間質(zhì)纖維 化（interstitial fibrosis) 〇
[0089] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種通過對患者施用用于皮下施用的制劑中含 有抗VLA-I抗體的組合物，例如如本文中描述的組合物來治療患者的方法。在一個(gè)實(shí)施 方案中，所述患者患有炎性病癥，如關(guān)節(jié)炎例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA);炎性腸??；狼瘡；移 植排斥；銀屑?。焕w維化；或克羅恩病。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物作為治療方案 (regimen)施用。在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包括選擇適用于用該組合物治療的患 者。適用于治療的患者例如顯示出指示疾病開始的癥候或癥狀，如指示RA的癥候或癥狀。 在又一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包括對患者施用第二治療劑，如抗炎劑、抗組胺劑、鎮(zhèn)痛 劑或皮質(zhì)甾類。
[0090] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述患者患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,且在該患者已顯示對針對類 風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的在前備選治療（(prior alternate treatment))的不充分響應(yīng)的基礎(chǔ)上選 擇。"在前備選治療"指除了包含如本文中所述抗VLA-I抗體的治療以外的任何治療。針 對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的在前備選治療可以是，例如DMARD(疾病調(diào)理性抗風(fēng)濕藥物（Disease Modifying Antirheumatic Drug))或 TNF-α (腫瘤壞死因子-α)抑制劑。DMARD 可以 是，例如甲氨蝶呤、來氟米特（Ieflunomide)、柳氮磺批陡（sulfasalazine)或輕化氯喹 (hydroxychloroquine)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述TNF- α抑制劑是抗體，如英夫利昔單抗 (infliximab)、阿達(dá)木單抗（adalimumab)、培化舍珠單抗（certolizumab pegol)或戈利木 單抗（golimumab);或融合蛋白，如依那西普（etanercept)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，第一治 療劑是VLA-2的抑制劑，如抗VLA-2抗體例如GBR 500。
[0091] 在一個(gè)實(shí)施方案中，治療患者的方法還包括對患者施用第二治療劑，如皮質(zhì)甾類、 抗炎劑、抗組胺劑或鎮(zhèn)痛劑，如對乙酰氨基酚（acetaminophen)。
[0092] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二治療劑是B細(xì)胞消耗劑，如抗CD20抗體，例如利 妥昔單抗(rituximab) (Rituxan, Genentech, Inc. , South San Francisco, CA ；and IDEC Pharmaceutical, San Diego, CA)。在再一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二治療劑是Janus激酶 (JAK)家族成員或脾酪氨酸激酶（SYK)家族成員的抑制劑。JAK家族成員包括JAKUJAK2、 JAK3和TYK2,并且SYK家族成員包括SYK和ZAP-70。在一個(gè)實(shí)施方案中，第二治療劑是 JAK3的抑制劑，如小分子抑制劑CP-690, 550(托法替尼（tofacitinib))。在另一個(gè)實(shí)施方 案中，第二治療劑是SYK抑制劑，如小分子抑制劑R406或其前藥R788。
[0093] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述患者患有炎性腸?。↖BD),且在該患者已顯示對針 對IBD的在前備選治療的不充分響應(yīng)的基礎(chǔ)上選擇。針對IBD的在前備選治療可以 是，例如整聯(lián)蛋白的抑制劑，例如MAdCAM-I (粘膜血管地址素細(xì)胞粘附分子-I (Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule-1)，α4β7 整聯(lián)蛋白）。MAdCAM-I 抑 制劑可以是抗-MAdCAM-I抗體，例如維多珠單抗（vedolizumab) (MLN0002, Millennium Pharmaceuticals, Cambridge, ΜΑ)〇
[0094] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，在接受抗VLA-I抗體療法如抗VLA-I療法的輸注之前， 用一種或多種治療劑治療受試者，如以預(yù)防或改善對抗VLA-I施用的不良反應(yīng)，例如 以預(yù)防或減輕與抗VLA-I抗體輸注有關(guān)的不良事件。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，預(yù)處 理/治療包括施用一種或多種鎮(zhèn)痛劑如對乙酰氨基酚、抗組胺劑、或皮質(zhì)留類如甲強(qiáng)龍 (methylprednisolone) 〇
[0095] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在施用所述抗VLA-I抗體之前，如在抗VLA-I抗體輸注之前， 所述預(yù)處理/治療施用15分鐘至1小時(shí)或更長，例如15分鐘，30分鐘，45分鐘，或1小時(shí) 或更長。
[0096] 在一個(gè)實(shí)施方案中，在施用所述抗VLA-I抗體之前，如在用抗VLA-I抗體輸注之 前，對受試者如RA患者施用以下一種或兩者：對乙酰氨基酚和抗組胺劑。在一個(gè)實(shí)施方案 中，在用抗VLA-I抗體治療之前，對RA患者施用皮質(zhì)留類（亦稱為糖皮質(zhì)激素），如甲強(qiáng)龍。
[0097] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)處理/治療以約50mg每75kg人至約150mg每75kg人 的劑量施用。例如，所述預(yù)處理/治療如甲強(qiáng)龍施用以約50mg每75kg人，約75mg每75kg 人，約IOOmg每75kg人，約125mg每75kg人，或約150mg每75kg人的劑量投遞。
[0098] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，在施用所述抗VLA-I抗體之前，如在抗VLA-I抗體輸注之 前，所述預(yù)處理/治療施用15分鐘至1小時(shí)或更長，例如15分鐘，30分鐘，45分鐘，或1小 時(shí)或更長。
[0099] 所述預(yù)處理/治療可通過例如靜脈內(nèi)投遞，如通過輸注施用。
[0100] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種通過確定患者是否滿足預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)來評估 患者的方法，并且如果患者滿足預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)，則對該患者批準(zhǔn)、提供、處方或施用本文中 描述的抗VLA-I抗體制劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)是患者不能適宜地響應(yīng) 在前的備選治療處理或方案，如針對RA治療。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該標(biāo)準(zhǔn)如2011年6月 17日提交的共有申請流水號61/498, 263中描述的，其通過提述完整并入本文。
[0101] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種指導(dǎo)接受者施用SAN-300制劑的方法。該方 法包括指導(dǎo)接受者，如終端用戶，應(yīng)當(dāng)對患者皮下施用所述藥物。在一些實(shí)施方案中，所述 終端用戶是患者、醫(yī)師、零售或批發(fā)藥房、經(jīng)銷商、或醫(yī)院的藥劑科、療養(yǎng)院臨床（nursing home clinic)或 HMO(Health Maintenance Organization)。
[0102] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種制備包含約彡lOOmg/mL至約225mg/mL的抗 VLA-I抗體的水性組合物，例如本文所述水性組合物的方法其通過按比例組合抗體、緩沖 齊U、賦形劑和表面活性劑以獲得包含彡l〇〇mg/mL至約225mg/mL的抗VLA-I抗體的水性組 合物。
[0103] 如本文中使用的，術(shù)語"賦形劑"是一種藥理學(xué)無活性的物質(zhì)，其用作藥物活性成 分的載體。
[0104] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述緩沖劑是組氨酸，而在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述緩沖劑是 乙酸鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，賦形劑是山梨糖醇，而在另一個(gè)實(shí)施方案中，賦形劑是氯化 鈉。在再一個(gè)實(shí)施方案中，表面活性劑是聚山梨醇酯80,而在另一個(gè)實(shí)施方案中，表面活性 劑是聚山梨醇酯20。在一個(gè)實(shí)施方案中，表面活性劑是聚山梨醇酯80,而在另一個(gè)實(shí)施方 案中，表面活性劑是聚山梨醇酯20。
[0105] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗VLA-I抗體包含具有SEQ ID NO: 1的序列的輕鏈和 具有SEQ ID N0:2的序列的重鏈。
[0106] 在另一個(gè)方面，提供一種分配本文所述組合物的方法。所述組合物含有SAN-300 的制劑且適用于皮下施用。該方法包括向接受者如終端用戶提供含有足以治療患者達(dá)至少 6個(gè)月，至少12個(gè)月，至少24個(gè)月，或至少36個(gè)月的單位劑量藥物的包。在一些實(shí)施方案 中，所述終端用戶是患者、醫(yī)師、零售或批發(fā)藥房、經(jīng)銷商、或醫(yī)院的藥劑科、療養(yǎng)院臨床或 HMO0
[0107] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種評估組合物的包裝或包裝批次的質(zhì)量的方 法，所述組合物如本文中描述的含有抗VLA-I抗體。該方法包括，例如評估包裝是否已過 期。到期日為從預(yù)選定的事件如制造、測定或包裝起至少6個(gè)月，至少12個(gè)月，至少18個(gè) 月，至少24個(gè)月，至少36個(gè)月，或至少48個(gè)月，例如超過24個(gè)月或超過36個(gè)月。在一些實(shí) 施方案中，將決策或步驟作為分析的結(jié)果。例如，根據(jù)產(chǎn)品是否已過期，使用或丟棄、分類、 選擇、釋放或扣留、載運(yùn)（ship)、移動到新位置、釋放到貿(mào)易中（released into commerce)、 銷售、或供應(yīng)銷售、從貿(mào)易退出或不再供應(yīng)銷售包裝中的抗體。
[0108] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于含有至少2劑單位劑量的水性組合物（含有抗 VLA-I抗體）的包裝。在一個(gè)實(shí)施方案中，所有單位劑量含有相同量的抗體，而在其他實(shí)施 方案中，單位劑量有兩種或更多種強(qiáng)度，或兩種或更多種不同的配制。例如，不同的配制可 能有不同的強(qiáng)度或釋放特性。在一個(gè)實(shí)施方案中，至少一個(gè)劑量含有約80mg至約315mg，例 如約 lOOmg，約 160mg，約 180mg，約 190mg，約 210mg，約 250mg，約 300mg，約 325mg，約 350mg， 約 360mg，約 400mg，約 450mg，或約 500mg 的抗 VLA-I 抗體。
[0109] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明包括一種指導(dǎo)接受者施用含有抗VLA-I抗體的水性制劑的 方法。該方法包括指導(dǎo)接受者（例如終端用戶、患者、醫(yī)師、零售或批發(fā)藥房、經(jīng)銷商、或醫(yī) 院的藥劑科、療養(yǎng)院臨床或ΗΜ0)應(yīng)當(dāng)在到期日之前對患者施用該抗體。到期日為從從預(yù)選 定的事件如制造、測定或包裝事件起至少6個(gè)月，至少12個(gè)月，至少18個(gè)月，至少24個(gè)月， 至少36個(gè)月，或至少48個(gè)月，例如超過18個(gè)月，超過24個(gè)月或超過36個(gè)月。在一個(gè)實(shí)施 方案中，接受者還接受抗體的供應(yīng)，如抗體單位劑量的供應(yīng)。
[0110] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于使用一種方法或系統(tǒng)，其用于分配本文中所述制 齊IJ、監(jiān)測或追蹤本文所述制劑到藥房、輸注中心或患者的提供、監(jiān)測一名或多名患者、選擇 患者、或匯編或報(bào)告關(guān)于使用本文所述制劑的數(shù)據(jù)。
[0111] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于中分析產(chǎn)品或工藝如制造工藝的方法。該方法 包括提供抗VLA-I抗體組合物的水性制劑，例如通過本文所述工藝制備的制劑，并通過評 估溶液參數(shù)來提供對制劑的評估，所述溶液參數(shù)如顏色（例如無色到淺黃色，或無色到黃 色）、澄清度（例如清澈到微乳白色或清澈到乳白色）、或粘度（例如在周圍環(huán)境溫度如約 20°C至約30°C，例如約25°C測量時(shí)，約5cP至約30cP (例如約IOcP或約20cP))。該評估可 包括對一個(gè)或多個(gè)溶液參數(shù)的評估。任選地，確定溶液參數(shù)是否滿足預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)，例如確 定預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)是否存在或存在于預(yù)選定的范圍中，由此分析工藝。
[0112] 在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括對抗VLA-I抗體制劑的穩(wěn)定性的量度。抗體制劑 的穩(wěn)定性可例如通過聚集形成來測量，聚集形成通過例如如本文中描述的大小排阻高壓液 相層析（HPLC)、顏色、澄清度或粘度來測定。如果測定參數(shù)中的變化在預(yù)設(shè)定的時(shí)間段內(nèi)低 于約10%，低于約5%，低于約3%，低于約2%，低于約1%，低于約0. 5%，低于約0.05%， 或低于約0. 005%或更低，且任選地在給定溫度，那么可確定制劑是穩(wěn)定的，因此可接受進(jìn) 一步加工或分配。在一個(gè)實(shí)施方案中，液體抗VLA-I抗體制劑在室溫如約18°C，約19°C，約 20°C，約21°C，約22°C，約23°C，約24°C，或約25°C穩(wěn)定達(dá)1天，2天，3天，4天，或5天。
[0113] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包括將測定的值與參照值比較以由此分析制造工 藝。
[0114] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包括至少部分基于分析維持制造工藝。在一個(gè)實(shí) 施方案中，所述方法還包括基于分析改變制造工藝。
[0115] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括評估由選定工藝制備的抗VLA-I抗體的水性 制劑的工藝，如制造工藝，其包括基于本文所述方法或分析對工藝進(jìn)行確定。在一個(gè)實(shí)施方 案中，所述方法還包括至少部分基于方法或分析維持或改變制造工藝。如此，在另一個(gè)實(shí)施 方案中，進(jìn)行評估的一方并不實(shí)踐本文所述方法或分析，而是僅依賴于通過本文所述方法 或分析獲得的結(jié)果。
[0116] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括在監(jiān)測或控制批次之間變化的方法中比較兩 種或更多種制備物，或?qū)⒅苽湮锱c參照標(biāo)準(zhǔn)比較。
[0117] 在再一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法可進(jìn)一步包括進(jìn)行決策，如對于分類、選擇、接受 或丟棄、釋放或扣留、加工成藥物產(chǎn)品、載運(yùn)、移動到不同位置、配制、貼標(biāo)簽（label)、包裝、 釋放到貿(mào)易中、銷售或供應(yīng)銷售制備物的決策，其至少部分基于所述測定。
[0118] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種存儲、分配或使用本文中描述的抗VLA-I抗 體制劑，如SAN-300制劑的方法。該方法包括 ：
[0119] 在適宜溫度如2°C至8°C存儲該制劑；
[0120] 向接受者例如終端用戶，如例如患者或醫(yī)護(hù)提供者，提供該制劑；
[0121] 指導(dǎo)接受者在適宜溫度如2°C至8°C存儲該制劑；并
[0122] 在接受者接受之后，將制劑在適宜溫度如2°至8°C存儲長達(dá)24個(gè)月，36個(gè)月，或 48個(gè)月。
[0123] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種符合法規(guī)要求，如管理機(jī)構(gòu)如FDA的批準(zhǔn)后 要求（post approval requirement)的方法。該方法包括提供對抗體制劑的溶液參數(shù)的評 估，所述溶液參數(shù)如顏色（例如無色到淺黃色，或無色到黃色）、澄清度（例如清澈到微乳白 色或清澈到乳白色）、或粘度（例如在環(huán)境溫度如20°C至30°C測量時(shí)約5cP至約30cP)。批 準(zhǔn)后要求可包括測量一種或多種上述參數(shù)。該方法任選地還包括，測定所觀察的溶液參數(shù) 是否滿足預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)，或者該參數(shù)是否在預(yù)選定的范圍內(nèi)；任選地，記錄（memorialize) 分析的值或結(jié)果，或與機(jī)構(gòu)交流，如通過將值或結(jié)果傳送到該管理機(jī)構(gòu)。
[0124] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種制備一批具有預(yù)選定特性的抗VLA-I抗體的 水性制劑的方法，所述特性為例如滿足釋放規(guī)格、標(biāo)簽要求、或藥典（compendial)要求，例 如本文中描述的特性。該方法包括提供測試抗體制備物；依照本文所述方法分析測試抗體 制備物；確定測試抗體制備物是否滿足預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)，如具有與參照值如本文公開的一個(gè) 或多個(gè)參照值的預(yù)選定的關(guān)系，并選擇測試抗體制備物以制備一批產(chǎn)品。
[0125] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于多批次的抗VLA-I抗體的水性制劑，其中每批的 一個(gè)或多個(gè)溶液參數(shù)（例如通過本文所述方法測定的值或溶液參數(shù)）從預(yù)選定的期望參照 值或標(biāo)準(zhǔn)（例如本文中描述的范圍或標(biāo)準(zhǔn)）以低于預(yù)選定的范圍變化。在一些實(shí)施方案中， 測定抗體制劑的一批或多批的一個(gè)或多個(gè)參數(shù)，并且作為測定的結(jié)果選擇一批或多批。一 些實(shí)施方案包括將測定的結(jié)果與預(yù)選定的值或標(biāo)準(zhǔn)，如參照標(biāo)準(zhǔn)比較。其他實(shí)施方案包括 調(diào)整要施用的批次的劑量，如基于對值或參數(shù)的測定結(jié)果。
[0126] 在另一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于以下一項(xiàng)或多項(xiàng)的方法：向報(bào)告接受單位提供報(bào) 告，評估抗VLA-I抗體的水性制劑的樣品與參照標(biāo)準(zhǔn)如FDA要求的依從性，從另一方尋求抗 VLA-I抗體的制備物滿足一些預(yù)限定要求的指示，或向另一方提交關(guān)于抗VLA-I抗體制備 物的信息。例示性的接受單位或其他方包括政府如美國聯(lián)邦政府，政府機(jī)構(gòu)如FDA。所述方 法包括以下一項(xiàng)或多項(xiàng)（或所有）步驟：在第一個(gè)國家如美國制備和/或測試抗VLA-I抗 體的水性制劑；將樣品的至少一份等分試樣送到第一國家以外的第二國家，例如送到美國 以外；準(zhǔn)備或接受報(bào)告，其包括關(guān)于抗VLA-I抗體的制備物的結(jié)構(gòu)的數(shù)據(jù)，例如與本文所述 結(jié)構(gòu)和/或鏈有關(guān)的數(shù)據(jù)，如通過本文所述的一種或多種方法生成的數(shù)據(jù)；并向報(bào)告接受 單位提供所述報(bào)告。
[0127] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述報(bào)告接受單位能確定數(shù)據(jù)是否滿足預(yù)確定的要求或參照 值，任選地，如抗VLA-I抗體水性制劑的制造商、經(jīng)銷商或銷售商接受來自報(bào)告接受單位的 響應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方案中，在接受來自報(bào)告接受單位的批準(zhǔn)后，選擇、包裝抗VLA-I抗體的 制備物或?qū)⑵渲糜谫Q(mào)易中。
[0128] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種評估本文所述組合物的質(zhì)量的方法，其中該方 法包括針對預(yù)選定的參數(shù)對組合物進(jìn)行評估，并測定該值是否滿足預(yù)選定的標(biāo)準(zhǔn)。響應(yīng)該 評估，可將組合物分類、選擇、接受或丟棄、釋放或扣留、加工成藥物產(chǎn)品、載運(yùn)、移動到不同 位置、配制、貼標(biāo)簽、包裝、釋放到貿(mào)易中、或銷售或供應(yīng)銷售。在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供單 位劑量形式的所述評估的組合物。
[0129] 在一個(gè)實(shí)施方案中，預(yù)選定的參數(shù)選自聚集、穩(wěn)定性、顏色、澄清度、粘度或栓塞 力。
[0130] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括提供對于參數(shù)測定的值與參照值的比較以由此 評估樣品。該比較可包括，例如測定測試值是否與參照值具有預(yù)選定的關(guān)系，例如測定其是 否滿足參照值。該值不需要是數(shù)值，可以僅僅是受試者方是否存在的指示。
[0131] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法包括測定測試值是否等于或大于參照值，是否低于 或等于參照值，或是否落入范圍（包含或排除一個(gè)或兩個(gè)端點(diǎn)）內(nèi)。
[0132] 在一些實(shí)施方案中，可將測試值，或是否滿足預(yù)選定關(guān)系的指示記載到如計(jì)算機(jī) 可讀記錄中。
[0133] 在一些實(shí)施方案中，根據(jù)是否滿足預(yù)選定關(guān)系，進(jìn)行決策或步驟，例如將樣品分 類、選擇、接受或丟棄、釋放或扣留、加工成藥物產(chǎn)品、載運(yùn)、移動到不同位置、配制、貼標(biāo)簽、 包裝、釋放到貿(mào)易中、或銷售或供應(yīng)銷售。例如，基于測定的結(jié)果，或基于與參照標(biāo)準(zhǔn)的比 較，可以如剛才描述的處理取樣品的那個(gè)批次。
[0134] 在一個(gè)方面，本發(fā)明特征在于一種評估抗VLA-I抗體的水性制劑的方法。該方法 包括關(guān)于抗VLA-I抗體的存在或水平接受數(shù)據(jù)；提供記錄，其包括所述數(shù)據(jù)且任選地包括 一批抗VLA-I抗體的標(biāo)識符；將所述記錄提交到?jīng)Q策制定者，例如政府機(jī)構(gòu)如FDA ;任選地， 從決策制定者接受信息；任選地，基于來自決策制定者的信息決定是否將該批抗VLA-I抗 體釋放或上市。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法還包括釋放樣品。
[0135] 例示性制劑包含以下：
[0136] I. SAN-300 濃度為 > 100mg/mL 至約 210mg/mL，或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例如 約 180mg/mL ;
[0137] 組氨酸緩沖液濃度為約ImM至約lOOmM，約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例 如約30mM ;
[0138] 山梨糖醇濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約290mM，或約200mM至約280mM， 例如約250mM ;
[0139] 聚山梨糖醇酯20濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08%，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0140] 約 6.0 的 pH;
[0141] 2. SAN-300 濃度為 > 100mg/mL 至約 210mg/mL 或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例如 約 190mg/mL ;
[0142] 乙酸鹽緩沖劑濃度為約ImM至約IOOmM,約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例 如約30mM ;
[0143] 山梨糖醇濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約280mM，或約200mM至約250mM， 例如約220mM或約250mM ;
[0144] 聚山梨糖醇酯80濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08 %，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0145] 約 5. 5 的 pH ;
[0146] 3.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0147] 組氨酸緩沖液濃度為約ImM至約lOOmM，約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例 如約30mM ;
[0148] 250mM的山梨糖醇；
[0149] 0. 01 %的聚山梨醇酯20,和
[0150] pH 6. 0 ；
[0151] 4. 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0152] 乙酸鹽緩沖劑為ImM至100mM，5mM至50mM，或5mM至40mM，例如30mM ;
[0153] 約220mM的山梨糖醇；
[0154] 約0. 01 %的聚山梨醇酯80,和
[0155] pH 5. 5 ；
[0156] 5.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0157] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0158] 山梨糖醇濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約290mM，或約200mM至約280mM， 例如約250mM ;
[0159] 約0. 01%聚山梨醇酯20 ;和
[0160] pH 6. 0 ；
[0161] 6.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0162] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0163] 山梨糖醇濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約280mM，或約200mM至約250mM， 例如約220mM ;
[0164] 約0· 01%的聚山梨醇酯80 ;和
[0165] pH 5. 5 ；
[0166] 7.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0167] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0168] 約250mM的山梨糖醇；
[0169] 聚山梨糖醇酯20濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08%，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0170] pH 6. 0 ；
[0171] 8.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0172] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0173] 約220mM的山梨糖醇；
[0174] 聚山梨糖醇酯80為約0. 001%至約0. 1%，約0. 005%至約0. 08%，或約0. 008% 至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0175] pH 5. 5 ；
[0176] 9. SAN-300 濃度為約 160mg/mL 至約 210mg/mL，或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例如 約 180mg/mL ;
[0177] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0178] 約250mM的山梨糖醇；
[0179] 約0. 01 %的聚山梨醇酯20 ;
[0180] pH 6. 0 ；
[0181] 10. SAN-300 濃度為約 160mg/mL 至約 210mg/mL 或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例 如約 190mg/mL ;
[0182] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0183] 約220mM的山梨糖醇；
[0184] 約0. 01%的聚山梨醇酯80 ;和
[0185] pH 5. 5 ；
[0186] 11.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0187] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0188] 約250mM的山梨糖醇；
[0189] 約0. 01%的聚山梨醇酯20 ;和
[0190] pH 6. 0 ；
[0191] 12.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0192] 約30mM乙酸鹽緩沖劑；
[0193] 約220mM山梨糖醇；
[0194] 約0. 01%聚山梨醇酯80 ;和
[0195] pH 5. 5。
[0196] 13. SAN-300 濃度為 > 100mg/mL 至約 210mg/mL，或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例 如約 180mg/mL ;
[0197] 組氨酸緩沖劑為約ImM至約IOOmM,約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例如約 30mM ；
[0198] NaCl濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約200mM，或約140mM至約160mM，例 如約150mM ;
[0199] 聚山梨糖醇酯20濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08%，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0200] pH 6. 0 ；
[0201] 14. SAN-300 濃度為 > 100mg/mL 至約 210mg/mL 或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例 如約 190mg/mL ;
[0202] 乙酸鹽緩沖劑濃度為約ImM至約lOOmM，約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例 如約30mM ;
[0203] NaCl濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約200mM，或約140mM至約160mM，例 如約150mM ;
[0204] 聚山梨糖醇酯80濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08%，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0205] pH 5. 5 ；
[0206] 15.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0207] 組氨酸緩沖劑濃度為約ImM至約IOOmM,約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例 如約30mM ;
[0208] 約 150mM 的 NaCl ;
[0209] 約0· 01%的聚山梨醇酯20,和
[0210] pH 6. 0 ；
[0211] 16.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0212] 乙酸鹽緩沖劑濃度為約ImM至約IOOmM,約5mM至約50mM，或約5mM至約40mM，例 如約30mM ;
[0213] 約 150mM 的 NaCl;
[0214] 約0· 01 %的聚山梨醇酯80,和
[0215] pH 5. 5 ；
[0216] 17.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0217] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0218] NaCl濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約200mM，或約HOmM至約160mM，例 如約150mM ;
[0219] 約0. 01%的聚山梨醇酯20 ;和
[0220] pH 6. 0 ；
[0221] 18.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0222] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0223] NaCl濃度為約50mM至約300mM，約IOOmM至約200mM，或約HOmM至約160mM，例 如約150mM ;
[0224] 約0. 01 %的聚山梨醇酯80 ;和
[0225] pH 5. 5 ；
[0226] 19.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0227] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0228] 約 150mM 的 NaCl ;
[0229] 聚山梨糖醇酯20濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08%，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0230] pH 6.0 ；
[0231] 20.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0232] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0233] 約 150mM 的 NaCl ;
[0234] 聚山梨糖醇酯80濃度為約0. 001 %至約0. 1 %，約0. 005 %至約0. 08%，或約 0. 008%至約0. 04%，例如約0. 01%，和
[0235] pH 5. 5 ；
[0236] 21. SAN-300 濃度為約 160mg/mL 至約 210mg/mL，或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例 如約 180mg/mL ;
[0237] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0238] 約 150mM 的 NaCl ;
[0239] 約0. 01%的聚山梨醇酯20 ;
[0240] pH 6. 0 ；
[0241] 22. SAN-300 濃度為約 160mg/mL 至約 210mg/mL 或約 180mg/mL 至約 200mg/mL，例 如約 190mg/mL ;
[0242] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0243] 約 150mM 的 NaCl ;
[0244] 約0· 01 %的聚山梨醇酯80 ;和
[0245] pH 5. 5 ；
[0246] 23.約 180mg/mL 的 SAN-300 ;
[0247] 約30mM的組氨酸緩沖劑；
[0248] 約 150mM 的 NaCl ;
[0249] 約0· 01%聚山梨醇酯20 ;和
[0250] pH 6. 0 ；
[0251] 24.約 190mg/mL 的 SAN-300 ;
[0252] 約30mM的乙酸鹽緩沖劑；
[0253] 約 150mM 的 NaCl ;
[0254] 約0. 01 %的聚山梨醇酯80 ;和
[0255] pH 5. 5。
[0256] 在一些實(shí)施方案中，上述制劑1-24的任一種可以基本上沒有氨基酸，如精氨酸。
[0257] 本文中公開的方法和組合物可在混合物中一種或多種結(jié)構(gòu)的存在、分布、或量可 能擁有生物學(xué)活性或影響生物學(xué)活性的情況下使用。所述方法從結(jié)構(gòu)活性角度（以評估或 確保生物等通性）來看也是有用的。
[0258] 如本文中使用的，"抗VLA-I抗體制劑"指含有抗VLA-I抗體如SAN-300的水性制 齊U，其濃度為 > l〇〇mg/mL 至約 225mg/mL，例如約 110mg/mL，約 120mg/mL，約 130mg/mL，約 140mg/mL，約 150mg/mL，約 160mg/mL，約 170mg/mL，約 180mg/mL，約 190mg/mL，約 200mg/mL， 約 205mg/mL，約 210mg/mL，約 215mg/mL，約 220mg/mL。
[0259] "適用于皮下施用"意指作為例如單位劑量提供的組合物以足以允許來自能通過 皮下注射投遞的量（通常從約〇.5mL至約3mL)的治療效果的濃度提供抗體。它可以沒有 導(dǎo)致不想要的注射部位癥狀如灼傷（burning)或刺痛的組分，如檸檬酸鹽。
[0260] 術(shù)語"治療"指以統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的程度或以本領(lǐng)域技術(shù)人員可檢測的程度有效改善 與病癥有關(guān)的狀況、癥狀、參數(shù)或預(yù)防病癥的進(jìn)展的量、方式和/或模式施用療法。有效量、 方式或模式可隨受試者變化，并且可對于受試者定制。
[0261] 抗VLA-I抗體的"穩(wěn)定"制劑在預(yù)確定的時(shí)間段內(nèi)極少或不展現(xiàn)以下任意一項(xiàng)或 多項(xiàng)的跡象：聚集、沉淀、碎裂、脫酰胺、氧化、變性、大小修飾、化學(xué)改變、或生物活性的變 化，如結(jié)合VLA-I的能力。所述預(yù)確定的時(shí)間段可以是，例如等于或超過4天，10天，14天， 21天，30天或更長，如達(dá)6個(gè)月，12個(gè)月，24個(gè)月，36個(gè)月，1年，2年，3年，例如當(dāng)在適宜條 件下存儲時(shí)。例示性的適宜條件包括，例如約2°C至約8°C，例如約4°C的溫度，在黑暗中， 在封閉的容器中。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述容器與將組合物提供給終端用戶的是相同類型。 在另一個(gè)實(shí)施方案中，穩(wěn)定的制劑將滿足制造商或監(jiān)管機(jī)構(gòu)（如食品和藥物管理局（FDA)， 或FDA在外國的對應(yīng)機(jī)構(gòu)）釋放或包裝標(biāo)簽或插頁要求，如對于上文提及的時(shí)間和狀況。 例如在一個(gè)實(shí)施方案中，低于約1%，低于約2%，低于約5%，低于約10%，或低于約15% 的組合物在預(yù)確定的時(shí)間段結(jié)束時(shí)或者在評估穩(wěn)定性時(shí)聚集、碎裂或氧化?？赏ㄟ^已知的 方法來評估聚集、沉淀和/或變性，如視覺檢查顏色和/或澄清度，或通過UV光散射，大小 排阻層析，動態(tài)光散射（DLS)，或差示掃描量熱法（differential scanning calorimetry) (DSC)。可通過檢測和量化抗體的化學(xué)改變形式來評估蛋白質(zhì)保留其生物學(xué)活性的能力?？?使用例如大小排阻層析、SDS-PAGE和/或基質(zhì)輔助激光解吸電離（matrix-assisted laser desorption ionization)/飛行時(shí)間質(zhì)譜術(shù)（MALDI/TOF MS)、或?qū)?jīng)內(nèi)蛋白酶處理的抗體 的肽映射來評估大小修改，如剪短。化學(xué)改變的其他類型包括電荷改變，如可能作為脫酰胺 結(jié)果發(fā)生的，可通過例如離子交換層析來評估。如果在給定的時(shí)間時(shí)抗體的生物學(xué)活性是 在制備藥物制劑時(shí)所展現(xiàn)的生物學(xué)活性的約1%，約2%，約5%，約10%，或約15%內(nèi)（如 例如在抗原結(jié)合測定法中測定），則稱該抗體在該藥物制劑中"保留其生物學(xué)活性"。
[0262] 如本文中使用的，"聚集"指從完全或部分未折疊的多肽如抗VLA-I抗體形成不溶 性結(jié)構(gòu)。如本文中使用的，"碎裂"指部分降解的蛋白質(zhì)，如抗VLA-I抗體。"脫酰胺"指從 多肽如抗VLA-I抗體除去酰胺基團(tuán)。脫酰胺通常發(fā)生在谷氨酰基或天冬酰胺?；被釟?基，且能引起蛋白質(zhì)中的結(jié)構(gòu)變化，其影響蛋白質(zhì)功能，如對VLA-I配體的結(jié)合親和力。
[0263] 如本文中使用的，"可注射性"指組合物對于用注射器投遞的適宜性?？勺⑸湫缘?一個(gè)組成部分是組合物如抗VLA-I抗體組合物被自己施用的患者或被醫(yī)護(hù)提供者從注射 器排出的能力?；颊叩淖约菏┯每梢允抢缤ㄟ^皮下施用。壓力或"栓塞力"可以為例如 使得患者，如年長或虛弱的患者，能自己施用該組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，栓塞力等于或 低于41bs。
[0264] 在一個(gè)實(shí)施方案中，栓塞力將允許在10秒以內(nèi)投遞單位劑量。在另一個(gè)實(shí)施方 案中，使用不超過預(yù)選定量的栓塞力，可將置于具有預(yù)選定型號的針頭的注射器中的約ImL 水性藥物組合物以預(yù)選定的速率排出。在另一個(gè)實(shí)施方案中，使用不超過預(yù)選定量的栓塞 力，可將置于具有預(yù)選定型號的針頭的注射器中的約2mL水性藥物組合物以預(yù)選定的速率 排出。例如，使用不超過41bs的栓塞力，可將置于具有25號針頭、27號針頭或30號針頭的 注射器中的約ImL水性藥物組合物以IOmL/分鐘排出。
[0265] 在一個(gè)實(shí)施方案中，適宜的栓塞力，如等于或低于41bs的力，將允許在預(yù)選定的 時(shí)間段內(nèi)，如在10秒以內(nèi)投遞單位劑量。
[0266] 可注射性還指蛋白質(zhì)經(jīng)得住通過針頭而沒有超過約1 %，超過約2%，超過約5%， 超過約10 %或超過約15 %碎裂的能力。
[0267] "抗VLA-I抗體"指結(jié)合VLA-I整聯(lián)蛋白的抗體，如結(jié)合VLA-I整聯(lián)蛋白的a 1亞 基，并至少部分抑制VLA-I的活性，特別是VLA-I整聯(lián)蛋白的結(jié)合活性，或信號傳導(dǎo)活性， 如轉(zhuǎn)換VLA-I介導(dǎo)的信號的能力。例如，抗VLA-I抗體可以抑制VLA-I對VLA-I的同類 (cognate)配體，例如胞外基質(zhì)組分，如膠原蛋白例如膠原蛋白I或膠原蛋白IV，或?qū)诱尺B 蛋白的結(jié)合?？筕LA-I抗體可以結(jié)合a 1亞基或β 1亞基或兩者。在一個(gè)實(shí)施方案中，該抗 體結(jié)合α 1的I域上的表位?？筕LA-I抗體可以以低于約ΚΓ6,低于約ΚΓ7,低于約ΚΓ8,低 于約ΚΓ 9,低于約KT1Q，或低于約KT11M的Kd結(jié)合VLA-I。VLA-I亦稱為α 1/ β 1和CD49a/ CD29。
[0268] 如本文中使用的，術(shù)語"抗體"指包含至少一個(gè)免疫球蛋白可變區(qū)（如提供免疫球 蛋白可變域或免疫球蛋白可變域序列的氨基酸序列）的蛋白質(zhì)。例如，抗體可以包含重（H) 鏈可變區(qū)（本文中縮寫為VH)，和輕（L)鏈可變區(qū)（本文中縮寫為VL)。在另一個(gè)例子中， 抗體包含兩個(gè)重（H)鏈可變區(qū)和兩個(gè)輕（L)鏈可變區(qū)。術(shù)語"抗體"涵蓋抗體的抗原結(jié)合 片段（如單鏈抗體、Fab片段片段、F (ab'）2片段、Fd片段、Fv片段、和dAb片段）以及完整 抗體，例如IgA，IgG，IgE，IgD，IgM類（以及其亞型）的完整免疫球蛋白。免疫球蛋白的輕 鏈可以是κ或λ型。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是糖基化的?？贵w對于抗體依賴性細(xì)胞毒 性和/或補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞毒性可能是功能性的，或者可以對于這一種或兩種活性是非功能 性的。
[0269] 免疫球蛋白可變域序列是形成免疫球蛋白可變域的結(jié)構(gòu)的氨基酸序列。例如，所 述序列可以包含天然存在可變域的全部或部分氨基酸序列。例如，序列可以缺失一個(gè)、兩個(gè) 或更多個(gè)N或C端氨基酸、內(nèi)部氨基酸，可以包含一個(gè)或多個(gè)插入或另外的末端氨基酸，或 者可以包含其他改變。在一個(gè)實(shí)施方案中，包含免疫球蛋白可變域序列的多肽可以與另一 個(gè)免疫球蛋白可變域序列聯(lián)合以形成靶物結(jié)合結(jié)構(gòu)（或"抗原結(jié)合位點(diǎn)")，例如與VLA-I相 互作用的結(jié)構(gòu)。
[0270] 還可將VH和VL區(qū)域細(xì)分為高變區(qū)（稱為"互補(bǔ)決定區(qū)""⑶R"）），其間散布有 更保守的區(qū)域（稱為"構(gòu)架區(qū)"（FR))。FR和⑶R的界限已被精確地界定（參見，Kabat，E. A.等人，Sequences of Proteins of Immunological Interest,第 5 版，U. S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242;和 Chothia，C.等人，J. Mol. Biol. 196:901-917) 〇在本文中使用Kabat的定義。每一個(gè)VH和VL通常由以下列順 序從氨基末端至羧基末端排列的3個(gè)CDR和4個(gè)FR組成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、 FR4。
[0271] 抗體的VH或VL鏈還可包括重鏈或輕鏈恒定區(qū)的全部或部分，從而分別形成免疫 球蛋白重鏈或輕鏈。在一個(gè)實(shí)施方案中，抗體是兩條免疫球蛋白重鏈和兩條免疫球蛋白輕 鏈的四聚體。免疫球蛋白重鏈與輕鏈可通過二硫鍵連接。重鏈恒定區(qū)通常包括3個(gè)恒定結(jié) 構(gòu)域CHI、CH2和CH3。輕鏈恒定區(qū)通常包括CL結(jié)構(gòu)域。重鏈和輕鏈的可變區(qū)包含與抗原 相互作用的結(jié)合結(jié)構(gòu)域?？贵w的恒定區(qū)通常介導(dǎo)抗體與宿主組織或因子（包括免疫系統(tǒng)的 各種細(xì)胞（如效應(yīng)器細(xì)胞）和經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)的第一補(bǔ)體（CIq))的結(jié)合。
[0272] 抗體的一個(gè)或多個(gè)區(qū)域可以是人的，有效地人的或人源化的。例如，可變區(qū)的一個(gè) 或多個(gè)可以是人的或有效地人的。例如，一個(gè)或多個(gè)⑶R，如HCXDRUHC⑶R2、HC⑶R3、LC ⑶RU LC⑶R2和LC⑶R3,可以是人的（HC，重鏈；IX，輕鏈）。在一個(gè)實(shí)施方案中，每個(gè)輕 鏈CDR可以是人的。在一個(gè)實(shí)施方案中，HC⑶R3是人的。一個(gè)或多個(gè)框架區(qū)，如HC或LC 的FR1、FR2、FR3和/或FR4,可以是人的。在一個(gè)實(shí)施方案中，全部框架區(qū)都是人的，例如 來源于人體細(xì)胞，例如產(chǎn)生免疫球蛋白的造血細(xì)胞或非造血細(xì)胞。在一個(gè)實(shí)施方案中，人序 列是種系序列，例如由種系核酸編碼。恒定區(qū)的一個(gè)或多個(gè)可以是人的，有效地人的或人源 化的。在另一個(gè)實(shí)施方案中，至少約70%，至少約75%，至少約80%，至少約85%，至少約 90 %，至少約92 %，至少約95 %，或至少約98 %的框架區(qū)（例如，總體地FRl、FR2和FR3,或 總體地FR1、FR2、FR3和FR4)或完整抗體可以是人的，有效地人的，或人源化的。例如，F(xiàn)R1、 FR2和FR3總體地可與由人種系區(qū)段編碼的人序列至少約70%，至少約75%，至少約80%， 至少約85%，至少約90%，至少約92%，至少約95%，至少約98%，或至少約99 %相同。
[0273] 有效地人的免疫球蛋白可變區(qū)是這樣的免疫球蛋白可變區(qū)，其包括充足數(shù)量的人 框架氨基酸位置，以便免疫球蛋白可變區(qū)不引發(fā)正常人的免疫原性反應(yīng)。"有效地人的"抗 體是這樣的抗體，其包括充足數(shù)量的人氨基酸位置，以便抗體不引發(fā)正常人的免疫原性反 應(yīng)。
[0274] 人源化的免疫球蛋白可變區(qū)是這樣的免疫球蛋白可變區(qū)，所述可變區(qū)經(jīng)修飾以便 修飾形式在人中引發(fā)比非修飾形式更小的免疫反應(yīng)，例如，人源化的免疫球蛋白可變區(qū)可 經(jīng)修飾以包括充足數(shù)量的人框架氨基酸位置以便免疫球蛋白可變區(qū)不引發(fā)正常人的免疫 原性反應(yīng)。對人源化免疫球蛋白的描述包括，例如美國專利No. 6, 407, 213和5, 693, 762。在 一些實(shí)施方案中，人源化免疫球蛋白包括在一個(gè)或多個(gè)框架氨基酸位置處的非人氨基酸。
[0275] 整個(gè)或部分抗體可由免疫球蛋白基因或其區(qū)段編碼。例示性的人免疫球蛋白基因 包括 κ、λ、a (IgAl 和 IgA2)、Y (IgGl、IgG2、IgG3、IgG4)、δ、ε 和 μ 恒定區(qū)基因，以及 眾多免疫球蛋白可變區(qū)基因。全長免疫球蛋白"輕鏈"（約25Kd或214個(gè)氨基酸）在ΝΗ2 端（約110個(gè)氨基酸）由可變區(qū)基因編碼，且在COOH端由κ或λ恒定區(qū)基因編碼。全長 免疫球蛋白"重鏈"（約50Kd或446個(gè)氨基酸）類似地由可變區(qū)基因（約116個(gè)氨基酸） 和其他前述恒定區(qū)基因之一，如Y (編碼約330個(gè)氨基酸）編碼。
[0276] 術(shù)語全長抗體的"抗原結(jié)合片段"指全長抗體的一個(gè)或多個(gè)片段，其保留特異性結(jié) 合感興趣靶物如VLA-I的能力。術(shù)語全長抗體的抗原結(jié)合片段涵蓋的結(jié)合片段的例子包括 (i)Fab片段，由VL、VH、CL和CHl域組成的單價(jià)片段；（ii)F(ab'） 2片段，包含通過二硫鍵 在鉸鏈區(qū)連接的兩個(gè)Fab片段的二價(jià)片段；（iii)Fd片段，由VH和CHl域組成；（iv)Fv片 段，由抗體單臂的VL和VH域組成；（V) dAb片段（Ward等，（1989) Nature 341:544-546)，其 由VH域組成；和（vi)保留功能性的分離的互補(bǔ)性決定區(qū)（CDR)。此外，盡管Fv片段的兩 個(gè)域VL和VH由分別的基因編碼，但可使用重組方法，通過合成接頭將其連接，該接頭使其 能制備為單一蛋白質(zhì)，其中VL和VH區(qū)配對以形成稱為單鏈Fv(ScFv)的單價(jià)分子。參見， 例如 Bird 等（1988) Science 242:423-426 ;和 Huston 等（1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883。
[0277] 如下進(jìn)行對兩條序列之間的同源性或序列同一性（該術(shù)語在本文中可交換使用） 的計(jì)算。將序列比對用于最佳比較目的（例如可在第一和第二氨基酸或核酸序列之一或兩 者中引入缺口以最佳比對，并且可無視非同源性序列以用于比較目的）。最佳比對測定為使 用GCG軟件包中的GAP程序，用Blossum62打分矩陣和缺口罰分12、缺口延伸罰分4、和移 框缺口罰分5的最佳得分。然后比較在相應(yīng)氨基酸位置或核苷酸位置處的氨基酸殘基或核 苷酸。當(dāng)?shù)谝恍蛄兄械奈恢门c第二序列中相應(yīng)位置處的氨基酸殘基或核苷酸被相同的氨基 酸殘基或核苷酸占據(jù)時(shí)，分子在該位置是相同的（如本文中使用的氨基酸或核酸"同一性" 等同于氨基酸或核酸"同源性"）。兩條序列之間的百分比同一性是序列所共享的相同位置 數(shù)目的函數(shù)。
[0278] 實(shí)施雜交反應(yīng)的指導(dǎo)可見于 Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley&Sons，N. Y. (1989)，6. 3. 1-6. 3. 6,其通過提述并入。在該參考文獻(xiàn)中記載了水性和非 水性方法，可使用任一種。高嚴(yán)格性雜交條件包括在6X SSC中于約45°C雜交，接著在0.2X SSC，0. 1% SDS中于65°C進(jìn)行一次或多次清洗，或基本上相似的條件。
[0279] 本發(fā)明的實(shí)施方案提供了特定的優(yōu)點(diǎn)。在一些情況中，難以制備高濃度的蛋白質(zhì) 如抗體的制劑以用于藥物組合物。本文中呈現(xiàn)了制備這類制劑的方法。含有高濃度蛋白質(zhì) 如抗VLA-I抗體的藥物組合物對于在較短時(shí)間范圍內(nèi)的施用可能是有用的。例如抗VLA-I 抗體的制劑還可通過簡單化的方法（例如皮下）施用。
[0280] 在一個(gè)方面，本公開提供包含以下的水性藥物組合物：
[0281] (a) 150 至 210mg/mL，155 至 205mg/mL，160 至 200mg/mL，或 165 至 190mg/mL 的抗 VLA-I抗體，其具有
[0282] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0283] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0284] (b) 25至35mM的乙酸鹽或25至35mM的組氨酸；
[0285] (c) 170至288mM的山梨糖醇；和
[0286] (d)0. 008至0. 012 %的聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80 ;
[0287] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。
[0288] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0289] (a) 150至210mg/mL的抗VLA-I抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO:2的重鏈序列；
[0290] (b) 25至35mM的乙酸鹽或25至35mM的組氨酸；
[0291] (c) 170至288mM的山梨糖醇；和
[0292] (d)0. 008至0. 012 %的聚山梨醇酯，其中所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山 梨醇酯80 ;
[0293] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。在實(shí)施方案中，所述組合物包含組氨 酸且聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20。在實(shí)施方案中，所述組合物包含乙酸鹽且聚山梨醇酯是 聚山梨醇酯80。
[0294] 在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有270m0sm/kg至380m0sm/kg的滲透 度。
[0295] 在實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有低于15cP或低于HcP的粘度。在實(shí)施 方案中，本文中描述的水性藥物組合物具有10至14cP，11至14cP，13至HcP或11至12cP 的粘度。
[0296] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0297] (a) 165 至 190mg/mL 的抗 VLA-I 抗體，其具有
[0298] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0299] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0300] (b) 25至35禮組氨酸；
[0301] (c) 170至288mM山梨糖醇；和
[0302] (d)0. 008至0. 012 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0303] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。
[0304] 在某個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0305] (a) 180mg/mL 的抗 VLA-I 抗體，其具有
[0306] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0307] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0308] (b) 30mM 組氨酸；
[0309] (c) 250mM山梨糖醇；和
[0310] (d)0. 01 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0311] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。
[0312] 在實(shí)施方案中，允許在上述實(shí)施方案的一種或多種組分的量中的可變性，例如1 至5%，5至10%，10至15%，或15至20%的可變性。在一些這類實(shí)施方案中，所述水性藥 物組合物包含：
[0313] (a) 180mg/mL±l%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的抗體；
[0314] (b)30mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的組氨酸；
[0315] (c)250mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的山梨糖醇；和
[0316] (d)0.01% ±1%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或20%的聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0317] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。各組分中允許的可變性是獨(dú)立選擇 的（例如抗體可以濃度為180mg/mL±10%存在，組氨酸濃度為30mM±5%，山梨糖醇濃度為 250mM±7%，而聚山梨醇酯20為0.01% ±2% )。在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合 物具有5. 5至6. 5的pH。在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有5. 6至6. 4, 5. 7至 6. 3, 5. 8至6. 2,或5. 9至6. 1的pH。在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有6. 0的 pH〇
[0318] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0319] (a) 165 至 200mg/mL 的抗 VLA-I 抗體，其具有
[0320] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0321] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0322] (b) 25 至 35mM 乙酸鹽；
[0323] (c) 170至253mM山梨糖醇；和
[0324] (d)0. 008至0. 012 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80 ;
[0325] 其中所述水性藥物組合物具有4. 5至6. 5的pH。
[0326] 在某個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0327] 190mg/mL的抗VLA-I抗體，其具有
[0328] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9,或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0329] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9,或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0330] (b) 30mM 乙酸鹽；
[0331] (c)220mM山梨糖醇；和
[0332] (d)0. 01 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80 ;
[0333] 其中所述水性藥物組合物具有4. 5至6. 5的pH。
[0334] 在實(shí)施方案中，允許在上述實(shí)施方案的一種或多種組分的量中的變化性，例如1 至5%，5至10%，10至15%，或15至20%的變化。在一些這類實(shí)施方案中，所述水性藥物 組合物包含：
[0335] (a) 190mg/mL±l%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的抗體；
[0336] (b)30mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的乙酸鹽；
[0337] (c)220mM±l %，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或 20% 的山梨糖醇；和
[0338] (d) 0· 01 % ±1%，2%，3%，4%，5%，6%，7%，8%，9%，10%，11%，12%，13%， 14%，15%，16%，17%，18%，19%，或20%的聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯80 ;
[0339] 其中所述水性藥物組合物具有4. 5至6. 5的pH。各組分中允許的變化性是獨(dú)立選 擇的（例如抗體可以濃度為180mg/mL±10%存在，乙酸鹽濃度為30mM±5%，山梨糖醇濃度 為220mM±7%，而聚山梨醇酯80為0.01% ±2% )。在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組 合物具有5. 0至6. 0的pH。在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有5. 1至5. 9, 5. 2 至5. 8, 5. 3至5. 7,或5. 4至5. 6的pH。在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物具有5. 5 的pH。
[0340] 在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物具有低于15cP或低于14cP的粘度。 在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物具有10至HcP的粘度。
[0341] 在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物（例如本文中描述的包含組氨酸、 山梨糖醇和聚山梨醇酯（例如聚山梨醇酯20)的水性藥物組合物）具有13至14cP的粘度。 在實(shí)施方案中，這類水性藥物組合物具有低于12cP的粘度。在實(shí)施方案中，這類水性藥物 組合物具有11至12cP的粘度。
[0342] 在實(shí)施方案中，ImL的本文中描述的水性藥物組合物具有> 10 μ M的彡6000個(gè)顆 粒和/或具有彡25 μ M的< 600個(gè)顆粒。
[0343] 在實(shí)施方案中，包含在本文所述水性藥物組合物中的抗體顯示對整聯(lián)蛋白α II 域的結(jié)合，如使用ELISA評估的。在實(shí)施方案中，包含在本文所述水性藥物組合物中的抗體 顯示參照標(biāo)準(zhǔn)（例如來自同一批次（例如生產(chǎn)批次）但不配制在水性藥物組合物中的抗 體）的80% -125%的效力。
[0344] 在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物通過還原性CE-SDS顯示〈15%的雜 質(zhì)。
[0345] 在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物顯示< 10%的總聚集，如通過大小 排阻層析評估的。
[0346] 在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物具有彡90. OEU/mL的內(nèi)毒素。
[0347] 在實(shí)施方案中，ImL本文中描述的水性藥物組合物具有> 10 μ M的彡6000個(gè)顆粒。 在實(shí)施方案中，ImL本文中描述的水性藥物組合物具有> 25 μ M的< 600個(gè)顆粒。在實(shí)施方 案中，ImL本文中描述的水性藥物組合物具有彡10 μ M的彡6000個(gè)顆粒和彡25 μ M的彡600 個(gè)顆粒。在實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物符合USP〈71>。
[0348] 在一些實(shí)施方案中，本文中描述的水性藥物組合物（例如組氨酸制劑）滿足表32 中描述的一項(xiàng)或多項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)。
[0349] 在一個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0350] (a) 165 至 190mg/mL 的抗 VLA-I 抗體，其具有
[0351] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0352] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0353] (b) 25 至 35mM 組氨酸；
[0354] (c) 170至288mM山梨糖醇；和
[0355] (d)0. 008至0. 012 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0356] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。
[0357] 在某個(gè)實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物包含：
[0358] (a) 180mg/mL 的抗 VLA-I 抗體，其具有
[0359] 本文中所述的輕鏈序列，例如SEQ ID NO: 1的序列或與SEQ ID NO: 1有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；和
[0360] 本文中所述的重鏈序列，例如SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2有至少一個(gè) 但不超過2, 3,4, 5,6, 7,9或10個(gè)氨基酸殘基不同的序列；
[0361] (b) 3〇mM 組氨酸；
[0362] (c)250mM山梨糖醇；和
[0363] (d)0. 01 %聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20 ;
[0364] 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。
[0365] 在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物置于具有最終填充體積為ImL的容器 中。在實(shí)施方案中，所述容器是2mL USP 1型硼硅酸鹽玻璃管形瓶，其具有13_的基于氯 化丁基的塞子，在塞子（plug)上有flourotech涂層，在頂端有B2涂層和鋁密封的倒裝蓋 (aluminum over seal with flip top cap) 〇
[0366] 在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物在生產(chǎn)后立即地或在本文所述條件下存 儲后（如本文實(shí)施例中記載的，例如在存儲長達(dá)12個(gè)月之后（例如在存儲1個(gè)月、3個(gè)月、 6個(gè)月、9個(gè)月或12個(gè)月之后），例如在-75°C、2至8°C、30°C和65% RH、或在40°C和75% RH存儲）滿足屬性A到M中1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13或14項(xiàng)的標(biāo)準(zhǔn)（見表32)。 在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物滿足對于所有屬性A至M的標(biāo)準(zhǔn)。在一些實(shí)施方 案中，所述水性藥物組合物滿足組1至4每組中至少一個(gè)屬性的標(biāo)準(zhǔn)。在一些實(shí)施方案中， 所述水性藥物組合物滿足組1至4每組中至少兩個(gè)屬性的標(biāo)準(zhǔn)。
[0367] 在一些實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物滿足對于屬性G和/或H、K、和I和/或 J的標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物滿足對于屬性G、K和I ;對于屬性H、K和I ; 對于屬性G、K和J ;或?qū)τ趯傩訦、K和J的標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物滿足 對于屬性G、H、K和I ;對于屬性G、H、K和J ;對于屬性G、K、I和J ;或?qū)τ趯傩驭?、K、I和J 的標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)施方案中，所述水性藥物組合物滿足對于屬性G、H、K、I和J的標(biāo)準(zhǔn)。
[0368] 表32 :液體制劑（例如組氨酸制劑）的標(biāo)準(zhǔn)
[0369]
[0370]
【權(quán)利要求】
1. 一種水性藥物組合物，其包含： (a) 150至210mg/mL的抗VLA-1抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO: 2 的重鏈序列； (b) 25至35mM乙酸鹽或25至35mM組氨酸； (c) 170至288mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯（polysorbate)，其中所述聚山梨糖醇酯是聚山梨 糖醇酯20或聚山梨糖醇酯80 ;且 其中所述水性藥物組合物具有4. 5至7的pH。
2. 權(quán)利要求1的水性藥物組合物，其中所述水性藥物組合物包含： (a) 165至190mg/mL的抗VLA-1抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO: 2 的重鏈序列； (b) 25至35mM組氨酸； (c) 170至288mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯20 ;且 其中所述水性藥物組合物具有5至7的pH。
3. 權(quán)利要求2的水性藥物組合物，其中所述水性藥物組合物包含： (a) 180mg/mL的抗VLA-l抗體，具有SEQIDN0:l的輕鏈序列和SEQIDN0:2的重鏈序 列； (b) 30mM組氨酸； (c) 250mM山梨糖醇；和 (d) 0.01 %聚山梨糖醇酯20 ;且 其中所述水性藥物組合物具有6. 0的pH。
4. 權(quán)利要求1的水性藥物組合物，其中所述水性藥物組合物包含： (a) 165至200mg/mL的抗VLA-1抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO: 2 的重鏈序列； (b) 25至35mM乙酸鹽； (c) 170至253mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯80 ;且 其中所述水性藥物組合物具有4. 5至6. 5的pH。
5. 權(quán)利要求4的水性藥物組合物，其中所述水性藥物組合物包含： (a) 190mg/mL的抗VLA-1抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO: 2的重鏈 序列； (b) 30mM乙酸鹽； (c) 220mM山梨糖醇；和 (d) 0.01 %聚山梨糖醇酯80 ;且 其中所述水性藥物組合物具有5. 5的pH。
6. 權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)的水性藥物組合物，其中所述水性藥物組合物具有 270m0sm/kg 至 380m0sm/kg 的滲透度（osmolality)。
7. 權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)的水性藥物組合物，其中根據(jù)（a)通過使用液體顆粒計(jì)數(shù) 器對大于10 μ Μ顆粒的累積計(jì)數(shù)（cumulative count) /mL評估，低于2600個(gè)顆粒/mL和/ 或（b)通過使用液體顆粒計(jì)數(shù)器對大于25 μ Μ顆粒的累積計(jì)數(shù)/mL評估，低于250個(gè)顆粒 /mL的存在指示，所述水性藥物組合物在存儲于2至8°C達(dá)12個(gè)月后是穩(wěn)定的。
8. 權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)的水性藥物組合物，其中根據(jù)使用還原性SDS-PAGE評估的 完整IgG的低于10%相對損失指示，所述水性藥物組合物在存儲于2至8°C達(dá)12個(gè)月后是 穩(wěn)定的。
9. 權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)的水性藥物組合物，其中根據(jù)使用大小排阻層析評估的低 于5%碎裂（fragmentation)指示，所述水性藥物組合物在存儲于2至8°C達(dá)12個(gè)月后是 穩(wěn)定的。
10. 權(quán)利要求1至9中任一項(xiàng)的水性藥物組合物，其中所述水性藥物組合物具有低于 15cP 的粘度（viscosity)。
11. 一種治療需要抗VLA-1療法的患者的方法，包括對所述患者施用有效量的權(quán)利要 求1至10中任一項(xiàng)的水性藥物組合物。
12. 權(quán)利要求11的方法，其中所述患者患有選自下組的病癥：關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、狼瘡、 移植排斥、銀屑病、和結(jié)節(jié)病（sarcoidosis)，且其中所述方法對于治療所述病癥是有效的。
13. 權(quán)利要求11的方法，其中所述患者患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎且所述方法對于治療類風(fēng) 濕性關(guān)節(jié)炎是有效的。
14. 權(quán)利要求11-13中任一項(xiàng)的方法，其中皮下施用所述水性藥物組合物。
15. 權(quán)利要求11-14中任一項(xiàng)的方法，其中每周施用所述水性藥物組合物，且任選其中 施用所述水性藥物組合物至少6周。
16. 權(quán)利要求11-15中任一項(xiàng)的方法，其中以0. 5mg/kg至6mg/kg的劑量施用所述水性 藥物組合物。
17. 權(quán)利要求11-16中任一項(xiàng)的方法，其中所述治療減輕癥候（sign)或癥狀、延緩結(jié)構(gòu) 性損傷的進(jìn)展或改善軀體功能。
18. 權(quán)利要求11-17中任一項(xiàng)的方法，其中所述患者患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎且先前進(jìn) 行過針對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的在前備選治療（prior alternate treatment);任選其中所 述針對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的在前備選治療包括施用選自英夫利昔單抗（infliximab)、阿達(dá) 木單抗（adalimumab)、培化舍珠單抗（certolizumab pegol)、戈利木單抗（golimumab)、 依那西普阿巴他塞（etanercept abatacept)、利妥昔單抗（rituximab)、托珠單抗 (tocilizumab)、托法替尼（tofacitinib)、甲氨蝶呤、來氟米特（leflunomide)、柳氮磺批 P定（sulfasalazine)和輕化氯喹（hydroxychloroquine)的藥劑；且任選其中所述患者對于 所述在前備選治療已經(jīng)具有不充分的響應(yīng)。
19. 權(quán)利要求18的方法，其中如果基于ACR標(biāo)準(zhǔn)評估，例如所述患者在所述在前備選治 療后沒有實(shí)現(xiàn)ACR20、ACR50或ACR70,則對所述在前備選治療的響應(yīng)是不充分的。
20. -種治療患有中度到嚴(yán)重活性類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的成人患者的方法，所述患者對在 前備選治療，例如使用生物劑的在前備選治療已經(jīng)具有不充分的響應(yīng)，所述方法包括每周 一次地對所述患者皮下施用液體制劑（例如水性藥物組合物），所述液體制劑包含： (i) (a) 165至190mg/mL的抗VLA-1抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO: 2 的重鏈序列； (b) 25至35mM組氨酸； (c) 170至288mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯20 ; 其中所述液體制劑（例如所述水性藥物組合物）具有5至7的pH ; 或 (ii) (a) 165至200mg/mL的抗VLA-1抗體，其具有SEQ ID NO: 1的輕鏈序列和SEQ ID NO: 2 的重鏈序列； (b) 25至35mM乙酸鹽； (c) 170至253mM山梨糖醇；和 (d) 0. 008至0. 012%聚山梨糖醇酯80 ; 其中所述液體制劑（例如所述水性藥物組合物）具有4. 5至6. 5的pH ; 且其中所述方法減輕類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的癥候或癥狀、延緩與類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有關(guān)的結(jié) 構(gòu)性損傷的進(jìn)展、或改善軀體功能。
【文檔編號】C07K16/28GK104271122SQ201380019988
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2013年2月14日 優(yōu)先權(quán)日:2012年2月16日
【發(fā)明者】A.J.福勒, C.M.鮑, W.C.揚(yáng)特, N.J.科布, T.M.凱利 申請人:桑塔魯斯股份有限公司