N,n-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物及其用途
【專利摘要】本發(fā)明主要涉及N,N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物及其用途。所述N,N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物為式I所示化合物，或其與可藥用酸或堿所成的鹽。本發(fā)明所提供的化合物對(duì)與心腦血管疾病密切相關(guān)的RhoA蛋白酶表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制活性。這表明本發(fā)明化合物有望開發(fā)成RhoA蛋白酶小分子抑制劑類心腦血管疾病治療藥物。
【專利說明】N, N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物及其用途
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及藥物化學(xué)和藥物治療學(xué)領(lǐng)域，更具體涉及N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物及其制備方法和用途。
【背景技術(shù)】
[0002]心腦血管疾病是一種嚴(yán)重威脅人類，特別是50歲以上中老年人健康的常見病，在我國尤為突出。我國心腦血管疾病的總發(fā)病率和死亡率已經(jīng)接近或超過許多發(fā)達(dá)國家，而且仍呈上升趨勢(shì)。統(tǒng)計(jì)資料表明，我國城市人口心腦血管疾病病死率為200/10萬，農(nóng)村為142/10萬,分別占死亡構(gòu)成的37%和28%,居死亡原因的首位。因此,心腦血管疾病已經(jīng)是危害人類特別是老年人生命的第一大殺手。
[0003]據(jù)目前研究，血管痙攣是心腦血管疾病重要的病理生理機(jī)制之一。開發(fā)針對(duì)新靶標(biāo)和具有新作用機(jī)制的解除血管痙攣的治療藥物具有重要的市場前景和科學(xué)意義。血管痙攣的主要途徑是通過細(xì)胞內(nèi)鈣濃度升高導(dǎo)致細(xì)胞收縮，臨床上通過抑制該途徑可達(dá)到降血壓、抑制血管痙攣等作用，該類藥物即為被廣泛應(yīng)用的鈣通道阻滯劑。上世紀(jì)九十年代初研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)尚存在不依賴于細(xì)胞內(nèi)鈣濃度變化的Rho (主要是RhoA) /ROCK介導(dǎo)途徑，在細(xì)胞收縮中也起著重要作用。鈣依賴的細(xì)胞收縮是通過鈣離子內(nèi)流后，促使鈣調(diào)素(CaM)途徑激活肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)，導(dǎo)致MLC磷酸化，繼而肌球蛋白與肌動(dòng)蛋白結(jié)合，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架，引起血管平滑肌細(xì)胞收縮。而RhoA/ROCK則一方面通過抑制肌球蛋白輕鏈磷酸酶(MLCP)活性，降低了對(duì)磷酸化的MLC的去磷酸化作用，間接增加磷酸化MLC (MLC-P)的濃度，另一方面利 用其自身磷酸激酶活性直接磷酸化MLC，雙重上調(diào)磷酸化MLC (MLC-P)水平，從而達(dá)到調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架，引起血管平滑肌細(xì)胞收縮的作用。
[0004]Rho家族蛋白質(zhì)是小G蛋白的Ras超家族成員，是一組具有GTP酶活性的鳥苷酸結(jié)合蛋白，于1985年作為Ras同源物被首次克隆出來，包含RhoA、RhoB和RhoC三種異構(gòu)體，其中RhoA被研究的最廣泛。RhoA含有所有小GTP結(jié)合蛋白中高度保守的GDP/GTP結(jié)合區(qū)和GTP酶活性區(qū)，有兩種可相互轉(zhuǎn)換的構(gòu)像，即與GDP結(jié)合的非活化態(tài)和與GTP結(jié)合的活化態(tài)，兩種狀態(tài)之間的轉(zhuǎn)換使其能夠發(fā)揮一種類似“分子開關(guān)”的作用。這種轉(zhuǎn)換主要受到三類細(xì)胞內(nèi)蛋白的調(diào)節(jié):(1)鳥核苷酸交換因子(guanosine nucleotide exchangefactors, GEFs)，它能促進(jìn)⑶P/GTP交換反應(yīng)，激活RhoA蛋白，是RhoA蛋白的正調(diào)控因子；
(2)GTP 酶活化蛋白(GTPase - activating proteins,GAPs),它能通過增加 RhoA 內(nèi)在的 GTP酶活性而使其失活轉(zhuǎn)為無活性的GDP結(jié)合形式，是負(fù)調(diào)控因子；(3) GDP解離抑制因子(GDPdissociation inhibitors,⑶Is),它能阻抑⑶P從GTP酶上分離，則可穩(wěn)定RhoA與⑶P的結(jié)合，從而使其保持非活性狀態(tài)，也是負(fù)調(diào)控因子。在上述三類蛋白的整體作用下，通過調(diào)節(jié)RhoA與GTP/⑶P結(jié)合的比率，共同調(diào)節(jié)RhoA的功能。
[0005]RhoA的主要功能是調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架，肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架在細(xì)胞形狀改變、遷移、黏附以及胞質(zhì)分裂中起重要作用。RhoA分子功能的多樣性與其下游效應(yīng)分子的多樣性有關(guān)，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的RhoA的下游效應(yīng)分子包括Rho激酶(Rho-associated coiled-coilforming protein serine/threonine kinase, ROCK)、p21 活化激酶(p21_activatedkinase，PAK)、PKN、Citron、PI3K等，這些分子介導(dǎo)了 RhoA的作用。其中ROCK是目前功能研究最為清楚的RhoA下游靶效應(yīng)分子，屬于絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族成員，它以兩種同源性極高的異構(gòu)體形式存在(Roka/ROCK II和RokP/ROCK I)。近年來研究表明RhoA/ROCK通路在心腦血管疾病中起重要作用，特別是參與了高血壓的發(fā)生與發(fā)展過程。
[0006]進(jìn)一步的研究表明，鈣依賴收縮是血管平滑肌細(xì)胞收縮的主要觸發(fā)因素，而非鈣依賴RhoA/ROCK收縮在血管平滑肌細(xì)胞收縮的持久階段更為重要，這直接導(dǎo)致RhoA/ROCK途徑在血管舒縮以及調(diào)節(jié)血壓的過程中起著重要的作用。通過調(diào)控RhoA/ROCK途徑，可改善許多血管疾病的發(fā)生及病程，諸如高血壓、肺動(dòng)脈高壓、動(dòng)脈粥樣硬化、腦缺血等。
[0007]目前有關(guān)RhoA/ROCK調(diào)控途徑的藥物開發(fā)主要針對(duì)的是RhoA下游信號(hào)蛋白R(shí)OCK(包括ROCK I和ROCK II)，相關(guān)抑制劑已有許多文獻(xiàn)報(bào)道，當(dāng)前已有一個(gè)此類抑制劑fasudil在包括中國在內(nèi)的多個(gè)國家批準(zhǔn)上市，同時(shí)還有5個(gè)此類抑制劑(INS-117548、K-1152、SNJ-1656、SAR407899和DE-104)正在進(jìn)行臨床I/II研究，這些臨床候選藥物的適應(yīng)癥集中在心血管疾病治療、青光眼治療和神經(jīng)保護(hù)等。最初在日本上市的fasudil被用于治療腦血管痙攣，其后的研究表明fasudil對(duì)包括心絞痛、高血壓、冠狀動(dòng)脈痙攣、冠脈再通手術(shù)后再狹窄和動(dòng)脈粥樣硬化在內(nèi)的心血管疾病均有良好的治療作用。但由于其腦穿透能力較低，因此最近科學(xué)家正在研究將其制成脂質(zhì)體治療蛛網(wǎng)膜下腔出血引發(fā)的腦血管痙攣，希望通過定向給藥增加局部藥物濃度，減少不良反應(yīng)，提高治療效果。
[0008]由于已有的RhoA激酶(ROCK)抑制劑有種種不理想之處，尋找其上游蛋白R(shí)hoA抑制劑成為另一種方向，目前僅有的RhoA抑制劑是一類叫做外酶C3轉(zhuǎn)移酶(exoenzymeC3transferase,C3)的大分子或其衍生物，由于它極差的膜通透性和易于體內(nèi)降解的缺陷，限制了它的治療用途，Tremblay等人發(fā)展的透膜性好的C3融合蛋白BA-210作為神經(jīng)保護(hù)藥正在進(jìn)行II期臨床研究，Lee等人發(fā)展了透膜性好的重組蛋白TAT-C3，用于神經(jīng)再生治療。這些研究從實(shí)驗(yàn)上支持了 RhoA抑制劑發(fā)展成治療藥物的可能。如果我們針對(duì)RhoA蛋白的GTP結(jié)合域設(shè)計(jì)一些小分子競爭性抑制劑，可以阻止RhoA活化成RhoA-GTP形式，而只有后者才能與ROCK的RhoA蛋白結(jié)合域結(jié)合，暴露ROCK的催化活性中心，將ROCK激活，同時(shí)發(fā)生定向轉(zhuǎn)位與MLC靠近。因此小分子抑制劑可以起到類似于大分子C3相同的RhoA抑制效果，同時(shí)小分子抑制劑可以克服大分子成藥性差的缺陷。發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一類取代苯并氮雜環(huán)類衍生物作為小分子RhoA抑制劑，本發(fā)明人已就該類化合物申請(qǐng)專利(專利授權(quán)號(hào):ZL201010244757.7)，本申請(qǐng)的化合物為苯并氮雜環(huán)類化合物的新穎結(jié)構(gòu)衍生物，結(jié)構(gòu)類型突破了苯并氮雜環(huán)類化合物，而且RhoA抑制活性也有一定的提高。
[0009]綜上所述,針對(duì)RhoA/ROCK通路設(shè)計(jì)治療心血管疾病藥物是可行的，考慮到目前國際國內(nèi)有關(guān)直接針對(duì)RhoA蛋白GTP結(jié)合域的抑制劑研究報(bào)道很少的狀況?；赗hoA-GTP結(jié)合域設(shè)計(jì)心血管疾病治療藥物具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]本發(fā)明所涉及的化合物具有全新的N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類結(jié)構(gòu)，對(duì)RhoA蛋白酶抑制活性的測(cè)試結(jié)果顯示，本發(fā)明部分化合物對(duì)RhoA有較強(qiáng)的抑制活性，為今后進(jìn)一步設(shè)計(jì)開發(fā)新型RhoA蛋白酶小分子抑制劑類心腦血管疾病治療藥物奠定了結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。[0011]本發(fā)明的一個(gè)目的是，提供一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物。所述的N, N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物為式I所示化合物，或其在藥學(xué)上可接受的(與可藥
用酸或堿所成的)鹽。
[0012]
【權(quán)利要求】
1.一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，所述的N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物為式I所示化合物，或其在藥學(xué)上可接受的鹽；
2.如權(quán)利要求1所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中R1為C1~C4直鏈或支鏈的烷基，取代的C1~C4直鏈或支鏈的烷基；Χ為CH或N ;Α為取代的苯基； 其中，所述取代的C1~C4的直鏈或支鏈的烷基的取代基選自:苯基，羥基，羧酸基，酰胺基，環(huán)丙基，環(huán)戍基，環(huán)己基，吡啶基，
3.如權(quán)利要求2所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中R1為甲基，乙基，異丙基，正丁基，芐基，由羧酸基、環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基、羥基、吡啶基或酰胺基取代的甲基，或由羥基、
4.如權(quán)利要求2所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中A為取代的苯基； 其中，所述取代的苯基的取代基選自:由羧酸基取代的乙烯基或乙基中一種。
5.如權(quán)利要求4所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中 A 為
6.如權(quán)利要求1所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中R1為H ;Χ為CH或N ;Α為取代的C6~Cltl芳環(huán)基；所述取代的C6~Cltl芳環(huán)基的取代基選自:羧酸基，三唑基，或由磺酸基、
7.如權(quán)利要求6所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中A為取代的苯基或萘基； 所述的取代的苯基或萘基的取代基選自:羧酸基，三唑基，或由磺酸基、
8.如權(quán)利要求7所述的一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，其中A為
9.一種N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物，其特征在于，所述的N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物是:3-{3-[N-乙基-N-(喹喔啉-2-基)氨基]苯基}丙酸；(E) -3- {3- [N-乙基-N-(喹喔啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E) -3- {3- [N-乙基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；3-{3-[N-乙基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙酸；N-[3-(4-H-l，2，4-三唑-3-基)苯基]喹喔啉-2-胺；N-[3-(4-H-1, 2，4-三唑-3-基)苯基]喹啉-2-胺；6_ [N-(喹喔啉-2-基)氨基]萘-2-甲酸；6_ [N-(喹啉-2-基)氨基]萘-2-甲酸；(E)-3-{3-[N-羧甲基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-羧甲基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙酸；(E)-3-{3-[N-羧甲基-N-(喹喔啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-羧甲基-N-(喹喔啉-2-基)氨基]苯基}丙酸；(E)-N-羥基-3-{3-[N’ _(喹喔啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酰胺；(E)-N-羥基-3-{3-[N’ -(喹喔啉-2-基)氨基]苯基}丙酰胺；(E)-N-羥基-3-{3-[N’ -(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酰胺；(E)-N-羥基-3-{3-[N’-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙酰胺；2-[3-N-(喹喔啉-2-基)氨基]苯基乙磺酸；2- [3-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基乙磺酸；(E) -3- {3- [N-異丙基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-芐基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-氨甲酰甲基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-甲基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-(2-羥乙基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-(2-叔丁基二甲基硅氧基乙基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；3_ [N-(喹喔啉-2-基)氨基]苯甲氧基磷酸二乙酯；3_[N-(喹啉-2-基)氨基]苯甲氧基磷酸二乙酯；(E)-3-{3-[N-(3-羥丙基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E) -3- {3- [N- (2-(哌啶-1-基)乙基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-正丙基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-正丁基-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-(環(huán)丙基甲基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-(環(huán)戊基甲基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸；(E)-3-{3-[N-(環(huán)己基甲基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸或(E)-3-{3-[N-((吡啶-2-基)甲基)-N-(喹啉-2-基)氨基]苯基}丙烯酸。
10.如權(quán)利要求1~9中任意一項(xiàng)所述的N，N-雙取代苯并氮雜環(huán)-2-胺類化合物或其藥學(xué)上可接受的 鹽在制備預(yù)防或治療RhoA介導(dǎo)的疾病的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】C07D241/44GK103787992SQ201410027159
【公開日】2014年5月14日 申請(qǐng)日期:2014年1月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年1月21日
【發(fā)明者】李劍, 繆麗燕, 李秀江, 馬晟, 閆兆威 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué), 蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院