一種人血白蛋白的生產(chǎn)方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種人血白蛋白的生產(chǎn)方法，其特點在于包括以下步驟：1、四步法蛋白質(zhì)分離工藝，即第一步分離Cohn組分I、組分Ⅱ、組分Ⅲ。第二步分離Cohn組分Ⅳ-1，第三步分離Cohn組分Ⅳ-4，第四步分離Cohn組分V，組分V沉淀經(jīng)純化過濾即得人血白蛋白；2超濾生產(chǎn)；3、配制與巴氏病毒滅活；4、灌裝與后加溫；5、包裝檢驗。
【專利說明】一種人血白蛋白的生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種血液制品生產(chǎn)的工藝，具體是一種人血白蛋白的生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]國內(nèi)血液制品生產(chǎn)的主要工藝是Cohn低溫乙醇分步分離工藝。該工藝自初創(chuàng)以來，已經(jīng)有70多年的歷史了。70多年間，在生產(chǎn)和研究中有著不同的改進，雖然都是通過控制乙醇濃度、分離的溫度、pH、蛋白質(zhì)濃度、離子強度等五大要素進行血漿蛋白質(zhì)的分離，但現(xiàn)有專利技術(shù)存在白蛋白得率低、原料利用率較低的局限。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]為克服上述缺陷，本發(fā)明提出一種4步法分離生產(chǎn)人血白蛋白的方法，增加了Cohn組分IV -UCohn組分IV _4的分離，為提高原料的利用率提供了工業(yè)化生產(chǎn)的條件。
[0004]該方法的基本原理為血漿蛋白Cohn低溫乙醇分步分離。本發(fā)明所述的人血白蛋白的生產(chǎn)包括一下步驟:
1、四步法蛋白質(zhì)分離工藝:
本步驟為以下4步，分別為:第一步分離Cohn組分1、組分I1、組分III ;第二步分離Cohn組分IV-1 ;第三步分離Cohn組分IV-4 ;第四步分離Cohn組分V，組分V沉淀經(jīng)純化過濾即得人血白蛋白。
[0005]2、超濾生產(chǎn):
超濾的目的在于濃縮制品，通過超濾透析去除小分子物質(zhì)，也包括組分分離過程中高達40%以上的乙醇，超濾選擇的超濾膜的截留量為大于10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析2至6次，等體積的注射用水透析2至5次，超濾透析的溫度為O至10°C。
[0006]3、配制與巴氏病毒滅活:
按照既定的白蛋白成分配方配制完成后，進行58°C至62°C恒溫10小時(600分鐘)的巴氏病毒滅活。
[0007]4、灌裝與后加溫:
在產(chǎn)品灌裝-軋蓋操作完成后，對所有產(chǎn)品進行55至62°C，90至300分鐘的后加溫處理。
[0008]5、包裝檢驗:
經(jīng)包裝檢驗即為人血白蛋白成品，檢驗標(biāo)準(zhǔn)為中國藥典最新的人血白蛋白標(biāo)準(zhǔn)，也可以參考?xì)W洲藥典、美國藥典等進行成品檢驗。
[0009]所述的四步法蛋白質(zhì)分離工藝的特點在于。
[0010](I)、第一步分離(分離Cohn組分1、組分I1、組分III)的工藝參數(shù)為印11為6.5至7.8、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:4.0%至
7.8%。
[0011](2)、第二步分離(分離Cohn組分IV -1)的工藝參數(shù)為:pH為3.5至6.8、乙醇含量為12%至24%、溫度控制為-5.(TC至-2.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:2.0%至5.8%。
[0012](3)、第三步分離(分離Cohn組分IV-4)的工藝參數(shù)為:pH為4.5至6.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:1.0%至4.8%。
[0013](4)、第四步分離(分離Cohn組分V)的工藝參數(shù)為:pH為3.5至5.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-10.(TC至-4.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:0.6%至4.8%。
[0014]所述的超濾生產(chǎn)的特點在于:人血白蛋白生產(chǎn)工藝中采用超濾工序來濃縮人血白蛋白，超濾膜的截留量為大于10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析3至6次，等體積的注射用水透析3至6次，超濾透析的溫度為O至10°C。
[0015]所述的配制與巴氏病毒滅活的特點在于:采用兩步病毒處理措施，其中第一步為配制完成后采用10小時(600分鐘)的巴氏病毒滅活處理,第二步滅活為在灌裝軋蓋后進行55至62°C，90至300分鐘后加溫處理。
[0016]該法生產(chǎn)的人血白蛋白產(chǎn)品符合中國藥典的質(zhì)量要求。
【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合【具體實施方式】，對本發(fā)明作進一步描述。通過實施實例I說明本發(fā)明的技術(shù)方案及操作過程。
[0018]實施實例1:
1、四步法蛋白質(zhì)分離工藝:
步驟為以下4步，分別為:第一步分離Cohn組分1、組分I1、組分III ;第二步分離Cohn組分IV-1 ;第三步分離Cohn組分IV-4 ;第四步分離Cohn組分V，組分V沉淀經(jīng)純化過濾即得人血白蛋白。`
[0019](1A)、分離 Cohn 組分 I+ II + III:
工藝參數(shù)為:pH為7.0、乙醇含量為23%、溫度控制為-2.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為6.8%。
[0020]組分沉淀制作完畢，按照5克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉淀。壓濾液用于分離Cohn組分V1-1。
[0021](1B)、分離 Cohn 組分V1-1:
工藝參數(shù)為印11為5.8、乙醇含量為18%、溫度控制為-3.2°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:
3.8%,
組分沉淀制作完畢，按照6克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉淀。壓濾液用于分離Cohn組分VI _4。
[0022](IC)、分離 Cohn 組分VI _4:
工藝參數(shù)為:pH為5.5、乙醇含量為48%、溫度控制為-4.(TC，蛋白質(zhì)濃度范圍為:
2.8%，組分沉淀制作完畢，按照4克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉淀。壓濾液用于分離Cohn組分V。
[0023](ID)、分離 Cohn 組分 V:
工藝參數(shù)為:pH為4.2、乙醇含量為44%、溫度控制為-9.8°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:1.6%。
[0024]組分沉淀制作完畢，按照6克/L加入硅藻土，壓濾分離組分沉淀。壓濾所得的沉淀即為組分V，純化過濾后用于生產(chǎn)人血白蛋白。[0025]2、超濾生產(chǎn):
超濾的目的在于濃縮制品，通過超濾透析去除小分子物質(zhì)，也包括組分分離過程中高達40%以上的乙醇，超濾選擇的超濾膜的截留量為大于10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析6次，等體積的注射用水透析5次，超濾透析的溫度為9°C。
[0026]3、配制與巴氏病毒滅活:
按照既定的白蛋白成分配方配制完成后，進行58°C至62°C恒溫10小時的巴氏病毒滅活。
[0027]4、灌裝與后加溫:
在產(chǎn)品灌裝-軋蓋操作完成后，對所有產(chǎn)品進行55至62°C，300分鐘的后加溫處理。
[0028]5、包裝檢驗:
經(jīng)包裝檢驗即為人血白蛋白成品，檢驗標(biāo)準(zhǔn)為中國藥典最新的人血白蛋白標(biāo)準(zhǔn)，也可以參考?xì)W洲藥典、美國藥典 等進行成品檢驗。
【權(quán)利要求】
1.一種人血白蛋白生產(chǎn)方法，該生產(chǎn)方法的原理是血漿蛋白Cohn低溫乙醇分步分離，其特點在于包含以下幾個步驟:1、四步法蛋白質(zhì)分離工藝；2、超濾生產(chǎn)；3、配制與巴氏病毒滅活；4、灌裝與后加溫；5、包裝檢驗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于蛋白質(zhì)分離的步驟為4步，即第一步分離Cohn組分1、組分I1、組分III ;第二步分離Cohn組分IV -1，第三步分離Cohn組分IV _4，第四步分離Cohn組分V，組分V沉淀經(jīng)純化過濾即得人血白蛋白。
3.根據(jù)權(quán)利要求1，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于超濾生產(chǎn)步驟中，超濾膜的截留量為大于10KD，超濾的工藝為:等體積的無菌生理鹽水透析3至6次，等體積的注射用水透析3至6次，超濾透析的溫度為O至10°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于配制與巴氏病毒滅活步驟中采用兩步病毒處理措施，其中第一步為配制完成后采用600分鐘的巴氏病毒滅活處理，第二步滅活為在灌裝軋蓋后進行55至62°C，90至300分鐘后加溫處理。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于在蛋白質(zhì)的分離中，第一步分離(分離Cohn組分1、組分I1、組分III)的工藝參數(shù)為:pH為6.5至7.8、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:4.0%至7.8%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1、2，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于在蛋白質(zhì)的分離中，第二步分離(分離Cohn組分IV -1)的工藝參數(shù)為:pH為3.5至6.8、乙醇含量為12%至24%、溫度控制為-5.(TC至-2.50C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:2.0%至5.8%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1、2，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于在蛋白質(zhì)的分離中，第三步分離(分離Cohn組分IV -4)的工藝參數(shù)為:pH為4.5至6.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-6.(TC至-2.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:1.0%至4.8%。`
8.根據(jù)權(quán)利要求1、2，所述的人血白蛋白生產(chǎn)方法的特征在于在蛋白質(zhì)的分離中，第四步分離(分離Cohn組分V)的工藝參數(shù)為:pH為3.5至5.8、乙醇含量為35%至54%、溫度控制為-10.(TC至-4.5°C，蛋白質(zhì)濃度范圍為:0.6%至4.8%。
【文檔編號】C07K1/34GK103833844SQ201410078075
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年3月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月5日
【發(fā)明者】孔維權(quán), 張庭喜, 王連群, 石正國, 朱瑞芳, 張帆, 侯彩霞, 呂紹玉 申請人:貴州中泰生物科技有限公司