具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，具體步驟如下：將10ml無水乙醇，1.0mmol2，4-二甲基-5-甲?；?吡咯-3-甲酸乙酯和1.0mmol4-苯基氨基硫脲加入到50ml的圓底燒瓶中，在75℃下回流攪拌3h，生成淡黃色固體，即為配體HL。取1mmo配體HL和1mmol的CuCl2·2H2O加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1∶1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲銅。將上述CuCl2·2H2O替換為NiCl2.2H2O，制備得配合物吡咯縮氨基硫脲鎳。本發(fā)明提供了一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，該化合物的具抗癌活性作用，適合在抗癌領域中推廣應用，具有一定的醫(yī)學價值，為抗癌藥物的開發(fā)、推廣提供了依據(jù)。
【專利說明】具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，屬于配合物合成【技術領域】。
【背景技術】
[0002]縮氨基硫脲具有抗病毒、抗菌、抗真菌等多種藥理活性，尤其是其顯著的抗腫瘤活性，受到化學和醫(yī)藥工作者的關注。而多數(shù)縮氨基硫脲金屬配合物的抗腫瘤活性強于配體?；谶量┉h(huán)優(yōu)異的生物活性，結合活性拼接原理，本發(fā)明提供一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，以便更好地合成出具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物。
[0004]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術方案如下。
[0005]一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，具體步驟如下:
[0006](I)配體HL的合成:將IOml無水乙醇，1.0mmol2,4- 二甲基-5-甲?；鵢批咯-3-甲酸乙酯和1.0mmo14-苯基氨基硫脲加入到50ml的圓底燒瓶中，在75°C下回流攪拌3h，生成淡黃色固體，即為配體HL。進行抽濾，乙醇重結晶。上述配體產(chǎn)率為68%，熔點 113-116°C ;核磁共振檢測結果為=1H NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):7.770 (1H，s，CH=N)；7.363-7.622 (5H,m, Ar-H) ；4.268-4.321 (2H, q, CH2) ；2.454 (3H, s,CH3) ;2.337 (3H，s，CH3)；1.345-1.381 (3H, t, CH3)。
[0007](2)配合物吡咯縮氨基硫脲銅的合成:取Immol配體HL和Immol的CuCl2.2H2O加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1:1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲銅，其為產(chǎn)率82% (基于HL計算)。
[0008](3)配合物吡咯縮氨基硫脲鎳的合成:取Immol配體HL和Immol的NiCl2.2H2O加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1:1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲鎳。
[0009]針對上述所制備的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物進行抗腫瘤活性測試，其具體方法為:
[0010](I)細胞培養(yǎng):將A549人肺癌細胞株和H印G2人肝癌細胞株分別培養(yǎng)在含10%胎牛血清液的RPM1-1640介質中，內含100U/ml青霉素(盤尼西林)和100 μ g/ml鏈霉素，置于飽和濕度、37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)。
[0011] (2)化合物的細胞毒性采用噻唑藍法確定。在96孔塑料培養(yǎng)板中進行，使每孔中細胞數(shù)為5 X IO3個，次日，在每個孔中加入200 μ L溶解在培養(yǎng)液中的梯度濃度的待測物溶液(含體積百分數(shù)I %的DMSO助溶)。48小時后，加入溶解于牛血清中的濃度為0.5mg/ml的20 μ LMTT (噻唑藍)。繼續(xù)培養(yǎng)4小時后，在各培養(yǎng)孔中加入200 μ L 二甲基亞砜用于溶解被還原的MTT的藍紫色晶體，然后用酶標儀測定570nm的吸光度(0D值)，空白組不加待測物，按公式:細胞生長抑制率=[(空白OD值-給藥組的OD值)/空白OD值]XlOO %計算細胞生長抑制率，求出各組濃度的平均抑制率，作圖求出抑制率為50%時的濃度(即半數(shù)抑制濃度IC5tl)。其結果為:配體HL和所制備的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物對A549和Hep G2抑制作用明顯，IC5tl范圍在15.47-38.69 μ mol/ml，是潛在的抗腫瘤藥物。
[0012]該發(fā)明的有益效果在于:本發(fā)明提供了一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，并進行了藥理學分析，證明該化合物的具抗癌活性作用，適合在抗癌領域中推廣應用，且找到了一種新的藥物合成方法，具有一定的醫(yī)學價值，為抗癌藥物的開發(fā)、推廣提供了一定依據(jù)。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0013]圖1是本發(fā)明實施例1中所制備的配合物吡咯縮氨基硫脲銅的晶體結構示意圖(圖中，未編號的配體由對稱操作產(chǎn)生，對稱操作碼:-1-x，l_y，1-z)。
[0014]圖2是本發(fā)明實施例2中所制備的配合物吡咯縮氨基硫脲鎳的晶體結構示意圖。
【具體實施方式】
[0015]下面結合附圖和實施例對本發(fā)明的【具體實施方式】進行描述，以便更好的理解本發(fā)明。
[0016]實施例1
[0017]具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅配合物的合成方法，具體步驟如下:
[0018](I)配體HL的合成:將IOml無水乙醇，1.0mmol2,4- 二甲基-5-甲?；鵢批咯-3-甲酸乙酯和1.0mmo14-苯基氨基硫脲加入到50ml的圓底燒瓶中，在75°C下回流攪拌3h，生成淡黃色固體，即為配體HL。進行抽濾，乙醇重結晶。上述配體產(chǎn)率為68%，熔點 113-116°C ;核磁共振檢測結果為=1H NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):7.770 (1H，s，CH=N)；7.363-7.622 (5H, m, Ar-H) ；4.268-4.321 (2H, q, CH2) ;2.454 (3H，s，CH3) ;2.337 (3H，s，CH3)；1.345-1.381 (3H, t, CH3)。
[0019](2)配合物吡咯縮氨基硫脲銅的合成:取Immol配體HL和Immol的CuCl2.2H20加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1:1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲銅，其為產(chǎn)率82% (基于HL計算)，其晶體結構示意圖參見圖1。
[0020]實施例2
[0021]具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲鎳配合物的合成方法，具體步驟如下:
[0022](I)配體HL的合成:將IOml無水乙醇，1.0mmol2,4- 二甲基_5_甲?；?吡咯-3-甲酸乙酯和1.0mmo14-苯基氨基硫脲加入到50ml的圓底燒瓶中，在75°C下回流攪拌3h，生成淡黃色固體，即為配體HL。進行抽濾，乙醇重結晶。上述配體產(chǎn)率為68%，熔點 113-116°C ;核磁共振檢測結果為=1H NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):7.770 (1H，s，CH=N)；
7.363-7.622 (5H, m, Ar-H) ；4.268-4.321 (2H, q, CH2) ;2.454 (3H，s，CH3) ;2.337 (3H，s，CH3)；1.345-1.381 (3H, t, CH3)。
[0023](2)配合物吡咯縮氨基硫脲鎳的合成:取Immol配體HL和Immol的NiCl2.2H20加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1:1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲鎳，其晶體結構示意圖參見圖2。
[0024]實施例3
[0025]針對實施例1、實施例2所制備的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物進行抗腫瘤活性測試，其具體方法為:
[0026](I)細胞培養(yǎng):將A549人肺癌細胞株和H印G2人肝癌細胞株分別培養(yǎng)在含10%胎牛血清液的RPM1-1640介質中，內含100U/ml青霉素(盤尼西林)和100 μ g/ml鏈霉素，置于飽和濕度、37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)。
[0027](2)化合物的細胞毒性采用噻唑藍法確定。在96孔塑料培養(yǎng)板中進行，使每孔中細胞數(shù)為5 X IO3個，次日，在每個孔中加入200 μ L溶解在培養(yǎng)液中的梯度濃度的待測物溶液(含體積百分數(shù)I %的DMSO助溶)。48小時后，加入溶解于牛血清中的濃度為0.5mg/ml的20 μ LMTT (噻唑藍)。繼續(xù)培養(yǎng)4小時后，在各培養(yǎng)孔中加入200 μ L 二甲基亞砜用于溶解被還原的MTT的藍紫色晶體，然后用酶標儀測定570nm的吸光度(OD值)，空白組不加待測物，按公式:細胞生長抑制率=[(空白OD值-給藥組的OD值)/空白OD值]XlOO %計算細胞生長抑制率，求出各組濃度的平均抑制率，作圖求出抑制率為50%時的濃度(即半數(shù)抑制濃度IC5tl)。其結果為:配體HL和所制備的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物對A549和Hep G2抑制作用明顯，IC5tl范圍在15.47-38.69 μ mol/ml，是潛在的抗腫瘤藥物。
[0028]以上所述是 本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應當指出，對于本【技術領域】的普通技術人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進和潤飾，這些改進和潤飾也視為本發(fā)明的保護范圍。
【權利要求】
1.一種具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，其特征在于:具體步驟如下: (1)配體HL的合成:將IOml無水乙醇，1.0mmol2,4- 二甲基-5-甲酰基-吡咯_3_甲酸乙酯和1.0mmol4-苯基氨基硫脲加入到50ml的圓底燒瓶中，在75°C下回流攪拌3h，生成淡黃色固體，即為配體HL，進行抽濾，乙醇重結晶；上述配體產(chǎn)率為68%，熔點113-116°C ;核磁共振檢測結果為=1H NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):7.770 (1H，s，CH=N) ；7.363-7.622 (5H,m, Ar-H) ；4.268-4.321 (2H, q, CH2) ;2.454 (3H，s，CH3) ;2.337 (3H，s，CH3) ; 1.345-1.381 (3H，t，CH3)； (2)配合物批咯縮氨基硫脲銅的合成:取Immol配體HL和Immol的CuCl2.2H20加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1:1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲銅，其為產(chǎn)率82% (基于HL計算)； (3)配合物吡咯縮氨基硫脲鎳的合成:取Immol配體HL和Immol的NiCl2.2H20加入到5ml乙醇和四氫呋喃(體積比1:1)的混合溶液中，攪拌使其溶解，常溫下靜置一周，出現(xiàn)棕色塊狀晶體，即制得配合物吡咯縮氨基硫脲鎳。
2.根據(jù)權利要求1所述的具有抗腫瘤活性的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物的合成方法，其特征在于:針對上述所制備的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物進行抗腫瘤活性測試，其具體方法為: (1)細胞培養(yǎng):將A549人肺癌細胞株和H印G2人肝癌細胞株分別培養(yǎng)在含10%胎牛血清液的RPM1-1640介質中，內含100U/ml青霉素(盤尼西林)和100 μ g/ml鏈霉素，置于飽和濕度、37°C、5% CO2培養(yǎng)箱中傳代培養(yǎng)； (2)化合物的細胞毒性采用噻唑藍法確定。在96孔塑料培養(yǎng)板中進行，使每孔中細胞數(shù)為5 X 103個，次日，在每個孔中加入200 μ L溶解在培養(yǎng)液中的梯度濃度的待測物溶液(含體積百分數(shù)1%的DMSO助溶);48小時后，加入溶解于牛血清中的濃度為0.5mg/ml的.20 μ LMTT (噻唑藍)。繼續(xù)培養(yǎng)4小時后，在各培養(yǎng)孔中加入200 μ L 二甲基亞砜用于溶解被還原的MTT的藍紫色晶體，然后用酶標儀測定570nm的吸光度(OD值)，空白組不加待測物，按公式:細胞生長抑制率=[(空白OD值-給藥組的OD值)/空白OD值]X100%計算細胞生長抑制率，求出各組濃度的平均抑制率，作圖求出抑制率為50%時的濃度(即半數(shù)抑制濃度IC5tl);其結果為:配體HL和所制備的吡咯縮氨基硫脲銅、鎳配合物對A549和H印G2抑制作用明顯，IC5tl范圍在15.47-38.69 μ mol/ml，是潛在的抗腫瘤藥物。
【文檔編號】C07D207/34GK103951602SQ201410112350
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年3月19日 優(yōu)先權日:2014年3月19日
【發(fā)明者】閆玲玲, 李明, 楊學峰, 武蘋蘋, 殷月紅, 楊中娟 申請人:河南理工大學