一種以冷凍法去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法，包括以下步驟：(1)取經(jīng)過(guò)鵝疫苗強(qiáng)化免疫過(guò)的鵝或鴨所產(chǎn)鮮蛋，清洗消毒；(2)分離蛋白，蛋黃；(3)按體積取分離后的蛋黃1份。加入3倍等體積的蒸餾水稀釋、攪勻，在-18℃條件下凍存24小時(shí)及以上，確保凍實(shí)；(4)取出凍實(shí)的蛋黃經(jīng)解凍、濾過(guò)，得無(wú)色透明的濾液，即可用于免疫球蛋白IgY純化。其中步驟(1)中所述鵝疫苗為小鵝瘟疫苗、鵝鵝副粘病毒或禽流感疫苗。本發(fā)明通過(guò)冷凍物理的分離方法，卵黃沉淀得到充分利用，不用化學(xué)有劑溶劑，能顯著降低成本。
【專利說(shuō)明】一種以冷凍法去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種以冷凍法去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]抗體(免疫球蛋白，Ig)是指機(jī)體受到外來(lái)抗原物質(zhì)刺激后，B細(xì)胞識(shí)別抗原后活化、增殖分化為漿細(xì)胞，由漿細(xì)胞合成和分泌的能與相應(yīng)抗原特異性識(shí)別和結(jié)合的一類球蛋白。經(jīng)特定抗原免疫后的鵝、鴨可產(chǎn)生相應(yīng)的特異性抗體，有研究證實(shí)，家禽的卵黃對(duì)抗體有濃集作用，使其不斷儲(chǔ)存于卵黃中，這種抗體稱為卵黃抗體(Immunoglobulin of yolk,IgY)，卵黃抗體是當(dāng)今生物科學(xué)研究領(lǐng)域的一項(xiàng)重大發(fā)現(xiàn)。
[0003]IgY的分離、提取與純化:分離主要是除去卵黃中高含量的脂肪及脂蛋白，以獲得水溶性組分(Water Soluble Fraction, WSF)。卵黃中的主要成分是蛋白質(zhì)和脂肪,其比例約為1: 2。大部分蛋白質(zhì)是脂蛋白，存在于卵黃顆粒中，不溶于水，只有卵黃球蛋白是水溶性的，IgY是一種C-卵黃球蛋白。因此如何去除高濃度的脂類是IgY提純的關(guān)鍵。IgY分離純化的原則是簡(jiǎn)便、高效、經(jīng)濟(jì)。
[0004]目前常用的分離方法主要有:機(jī)物沉淀法、有劑溶劑沉淀法、有氨基酸鹽或硫酸鈉法、聚乙烯醇(PEG)法、辛酸法、水稀釋法(WD法)、超臨界氣體提取法(SFE法)、去污劑分離法等。
[0005]上述常用的分離方法的缺點(diǎn)主要有以下幾點(diǎn):
[0006]1)有機(jī)物沉淀法、有劑溶劑沉淀法、有氨基酸鹽或硫酸鈉法、聚乙烯醇(PEG)法、辛酸法、水稀釋法(WD法)、超臨界氣體提取法(SFE法)、去污劑分離法，這些方法最大的缺點(diǎn)是消耗大量的機(jī)物、有劑溶劑；
[0007]2)水稀釋法，稀釋倍數(shù)大，分離效果不理想，超臨界氣體提取法需設(shè)備投資大，成本聞等缺點(diǎn)；
[0008]3)有機(jī)物沉淀法、有劑溶劑沉淀法，有機(jī)物存在沉淀物中，不利卵黃沉淀物的進(jìn)一步加工和利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種以冷凍法去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法。該方法無(wú)需使用任何有機(jī)物、有劑溶劑，能顯著降低成本，而且卵黃中分離出來(lái)脂肪及脂蛋白因無(wú)其它有機(jī)物、有劑溶劑可以作為食品原料充分利用。
[0010]為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法，包括以下步驟:
[0011](1)取經(jīng)過(guò)鵝疫苗強(qiáng)化免疫過(guò)的鵝或鴨所產(chǎn)鮮蛋，清洗消毒；
[0012](2)分離蛋白，蛋黃；
[0013](3)按體積取分離后的蛋黃1份。加入3倍等體積的蒸餾水稀釋、攪勻，在_18°C條件下凍存24小時(shí)及以上，確保凍實(shí)；[0014](4)取出凍實(shí)的蛋黃經(jīng)解凍、濾過(guò)，得無(wú)色透明的濾液，即可用于免疫球蛋白IgY純化。
[0015]作為優(yōu)選，步驟⑴中所述鵝疫苗為小鵝瘟疫苗、鵝鵝副粘病毒或禽流感疫苗。
[0016]本發(fā)明的有益效果是:
[0017](I)本分離方法無(wú)需使用任何有機(jī)物、有劑溶劑，能顯著降低成本；
[0018](2)卵黃中分離出來(lái)脂肪及脂蛋白因無(wú)其它有機(jī)物、有劑溶劑可以作為食品原料充分利用。
[0019]通過(guò)冷凍物理的分離方法卵黃沉淀得到充分利用，不用化學(xué)有劑溶劑能顯著降低成本。
【具體實(shí)施方式】 [0020]一種以冷凍法去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法，具體步驟如下:
[0021]將經(jīng)過(guò)小鵝瘟疫苗強(qiáng)化免疫過(guò)的鴨所產(chǎn)鮮蛋清洗消毒，分離蛋白，蛋黃，按體積取1份蛋黃加入3倍等體積的蒸餾水稀釋，攪勻，裝入塑料桶中，_18°C凍存24小時(shí)及以上并確保凍實(shí)，既可拿出解凍，濾過(guò)，得無(wú)色透明的濾液，可用于下一步的免疫球蛋白IgY純化，亦可加入防腐劑做為藥用。
[0022]表1是以100枚鴨蛋為例所得的提取結(jié)果。
[0023]表1鴨蛋加水量與提取液的關(guān)系
[0024]
【權(quán)利要求】
1.一種去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法，包括以下步驟: (1)取經(jīng)過(guò)鵝疫苗強(qiáng)化免疫過(guò)的鵝或鴨所產(chǎn)鮮蛋，清洗消毒； (2)分離蛋白，蛋黃； (3)按體積取分離后的蛋黃1份。加入3倍等體積的蒸餾水稀釋、攪勻，在-18°C條件下凍存24小時(shí)及以上，確保凍實(shí)； (4)取出凍實(shí)的蛋黃經(jīng)解凍、濾過(guò)，得無(wú)色透明的濾液，即可用于免疫球蛋白IgY純化。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的去除鵝、鴨卵黃中的脂蛋白及脂質(zhì)的方法，其特征在于:步驟(I)中所述鵝疫苗為小鵝瘟疫苗、鵝副粘病毒或禽流感疫苗。
【文檔編號(hào)】C07K16/02GK103992403SQ201410223049
【公開(kāi)日】2014年8月20日 申請(qǐng)日期:2014年5月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月23日
【發(fā)明者】寧康健, 呂錦芳 申請(qǐng)人:安徽科技學(xué)院