一種從水柏枝中提取槲皮素的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種從水柏枝中提取槲皮素的方法，具體涉及一種利用生物酶酶解與大孔吸附樹脂相結(jié)合的方法。其處理步驟：將水柏枝烘干、粉碎→酶解→加提取溶劑回流提取→減壓濃縮→純化、濃縮。本發(fā)明工藝簡單、提取效率高、成本低、適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種從水柏枝中提取槲皮素的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種天然藥用植物中活性成分的提取技術(shù)，具體涉及一種利用生物酶酶解技術(shù)與大孔吸附樹脂相結(jié)合的方法提取天然植物中的有效成分。

【背景技術(shù)】
[0002]水柏枝，其主要含有的化學(xué)成分為:黃酮、槲皮苷、槲皮素、山奈酚、沒食子酸等。水柏枝是一種藏藥，可用于解表透疹，祛風(fēng)止癢，主治麻疹不透，風(fēng)濕痹痛，癬癥。分布于湖北巴東、秭歸和四川巫山，生于低山河岸邊及路旁。
[0003]槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，分子式C15HltlO7，分子量302.23。溶于冰醋酸，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水、乙醇溶液；味很苦。可作為藥品，具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。此外還有降低血壓、增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴(kuò)張冠狀動脈，增加冠脈血流量等作用。用于治療慢性支氣管炎。對冠心病及高血壓患者也有輔助治療作用。
[0004]目前槲皮素提取的材料來源主要是以銀杏葉和蘆丁為主，本發(fā)明提供了從另外一種植物中提取槲皮素的方法，從而使得槲皮素的植物來源更為廣泛。本發(fā)明采用的是醇溶液回流提取法、在生物酶解的條件下提取水柏枝中的槲皮素以及采用大孔吸附樹脂對槲皮素的純化，使得槲皮素的出率和純度都得到了很大的提高。在申請公開的專利“一種從杜仲葉中提取槲皮素的方法”(專利號201210126236.0)中公開了一種提取槲皮素的方法，其步驟主要為采用醇溶液回流提取、濃縮、純化即得槲皮素，其中材料處理的過程不充分，使得材料里面有效成分的出率大大降低了。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明是針對現(xiàn)有制備水柏枝槲皮素的方法所存在的缺陷而進(jìn)行的研究，主要是為了提供一種操作簡單、提取效率高、成本低、可工業(yè)化實(shí)現(xiàn)的提取方法。
[0006]本發(fā)明的步驟如下:
a、將新鮮水柏枝材料在溫度為60-70°C的烘箱中干燥1-3小時(shí)，粉碎過40-60目篩，收集粗粉備用；
b、稱取一定量的粗粉置于提取器中，加入粗粉重量0.5-1倍的水浸潤，然后加入粗粉重量0.5%-3%的生物酶試劑進(jìn)行酶解反應(yīng)，在30-45°C的條件下讓其酶解反應(yīng)40-80min，收集酶解原料；
C、然后在粗粉混合液中加入提取溶劑，采用醇溶液回流提取方法；
d、過濾，收集濾液，濾渣重復(fù)提取2-4次，合并提取液減壓濃縮至原體積的1/4-1/2；
e、將濃縮液上大孔吸附樹脂，用洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮至原體積的1/4-1/2。
[0007]步驟b所述的生物酶為纖維素酶、淀粉酶、半纖維素酶和果膠酶中的一種。
[0008]步驟c中所述加入的提取溶劑為30%鹽酸和75%甲醇的混合液，且體積比為1:1-4。
[0009]步驟c中所述加入的原材料與提取溶劑的料液比為1:4_10，每次回流提取的時(shí)間為 60_120min。
[0010]步驟e中所述的大孔吸附樹脂為AB-8、D-1OU D_101_1、DA-20中一種，所述的洗脫過程為:先用柱體積6-8倍的去離子水洗脫，再用4-8倍柱體積、濃度為75%-85%的乙醇洗脫。
[0011]本發(fā)明先對材料進(jìn)行酶解處理，使得水柏枝中有效成分的出率得到了很大的提高，其操作步驟簡單易行，對環(huán)境無污染；而且本發(fā)明采用醇跟酸的混合液作為提取溶劑，可以很大程度上提高槲皮素的提取率；大孔吸附樹脂的使用，讓所得槲皮素的純度更高，并且大孔吸附樹脂可以重復(fù)使用，從而降低了生產(chǎn)的成本，具有工業(yè)化意義。
[0012]下面將結(jié)合【具體實(shí)施方式】進(jìn)一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明要求保護(hù)的范圍并不局限于下列實(shí)施方式。
[0013]【具體實(shí)施方式】:
實(shí)施例1:
將新鮮的水柏枝放在溫度設(shè)定為70°c的烘箱中干燥I小時(shí)，干燥完畢，將其粉碎過篩40目，收集粗粉備用，稱取10g水柏枝粗粉于提取器中，加入50mL水，同時(shí)加入2g的纖維素酶在35°C的條件下酶解60min，收集酶解原料，然后加入400mL的提取溶劑(提取溶劑為V30%鹽酸:V75%甲醇=1:3)回流提取60min，過濾，收集濾液，濾渣重復(fù)回流提取2次，合并提取液減壓濃縮至原體積的1/3。將濃縮液上AB-8大孔吸附樹脂柱，先用柱體積6倍的去離子水洗脫，再用5倍柱體積、濃度為75%的乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮至原體積的1/4，即得水柏枝槲皮素樣品。經(jīng)HPLC檢測，所得原材料中槲皮素的含量為89.5%，槲皮素的提取率為60.41%。
【權(quán)利要求】
1.一種從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于采用以下操作步驟: a、將新鮮水柏枝材料在溫度為60-70°C的烘箱中干燥1-3小時(shí)，粉碎過40-60目篩，收集粗粉備用； b、稱取一定量的粗粉置于提取器中，加水浸潤并加入生物酶試劑進(jìn)行酶解反應(yīng)，收集酶解原料； C、然后在粗粉混合液中加入提取溶劑，采用回流提取方法； d、.過濾，收集濾液，濾渣重復(fù)提取2-4次，合并提取液減壓濃縮至原體積的1/4-1/2； e、將濃縮液上大孔吸附樹脂，用洗脫液洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮至原體積的1/4-1/2。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于:步驟b中所述的粗粉與水的料液比為1:0.5-1，加入生物酶的量為粗粉重量的0.5%-3%。
3.根據(jù)權(quán)利要 求1所述的從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于:步驟b所述的生物酶為纖維素酶、淀粉酶、半纖維素酶和果膠酶中的一種，酶解時(shí)的溫度設(shè)定在30-45°C，酶解反應(yīng)的時(shí)間為40-80min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于:步驟c中加入的提取溶劑為30%鹽酸和75%甲醇的混合液，且體積比為1:1_4。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于:步驟c中回流提取的固液比為1:4_10，每次回流提取的時(shí)間為60-120min。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于:步驟e中所述的大孔吸附樹脂為AB-8、D-101、D-101-1、DA-20中的一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從水柏枝中提取槲皮素的方法，其特征在于:步驟e中所述的洗脫過程為先用柱體積6-8倍的去離子水洗脫，再用4-8倍柱體積、濃度為75%-85%的乙醇洗脫。
【文檔編號】C07D311/30GK104072463SQ201410266358
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年6月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月16日
【發(fā)明者】劉東鋒, 楊成東 申請人:南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司