一種從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，步驟如下：(1)將魔芋粉碎成細(xì)粉，然后加入乙醇，料液比為1.5:500-1200Kg/ml，然后制粒；(2)將步驟(1)制備的魔芋顆粒加入超臨界CO2萃取設(shè)備的萃取釜中，對(duì)萃取釜、分離釜Ⅰ、分離釜Ⅱ進(jìn)行加熱，并對(duì)冷機(jī)及儲(chǔ)罐制冷，當(dāng)萃取釜溫度為30-70℃，分離釜Ⅰ溫度為40-65℃，分離釜Ⅱ溫度為30-60℃時(shí)，開(kāi)啟二氧化碳?xì)馄?，通過(guò)高壓泵對(duì)萃取釜、分離釜進(jìn)行加壓，當(dāng)萃取釜壓力為20-40MPa，分離釜Ⅰ壓力為6-18MPa，分離釜Ⅱ壓力為4-7MPa時(shí)，關(guān)閉二氧化碳，開(kāi)啟循環(huán)閥，進(jìn)行萃取循環(huán)，每循環(huán)30min，分別從分離釜Ⅰ、Ⅱ放料，循環(huán)萃取1-2h。本發(fā)明的方法提取的C6-神經(jīng)酰胺的收率高，且萃取產(chǎn)物品質(zhì)較好。
【專利說(shuō)明】一種從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及提取分離【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方 法。

【背景技術(shù)】
[0002] 魔芋（konjac)屬于天南星科（Araceae)魔芋屬（Amorphophallus B1. ex Decne.) 草本植物的塊莖，又名磨芋、鬼芋、鬼頭、花蓮桿、蛇六谷等，主要產(chǎn)于東半球熱帶、亞熱帶， 在我國(guó)有較廣泛的分布。魔芋性寒、辛，有毒；可活血化瘀，解毒消腫，寬腸通便，化痰軟堅(jiān)； 主治降血壓、降血糖、瘰疬痰核、損傷瘀腫、便秘腹痛、咽喉腫痛、牙齦腫痛等癥。
[0003] 神經(jīng)酰胺類(lèi)化合物（Ceramide)，即N-脂酰神經(jīng)鞘氨醇，是由神經(jīng)鞘氨醇 (sphingosine)和長(zhǎng)鏈脂肪酸縮合而成的一類(lèi)化合物，是鞘脂類(lèi)化合物中最重要的一種。神 經(jīng)酰胺是最近幾年新興的一種活性成分，魔芋中含有比較豐富的神經(jīng)酰胺，其神經(jīng)酰胺的 含量高達(dá)0. 15?0.2%，是目前所采用的原料如米糠、大豆、小麥等原料的10倍。
[0004] 提取神經(jīng)酰胺最常用的是有機(jī)溶劑提取，通常采用異丙醇、乙酸乙酯或氯仿提取。 劉仁萍等在探索回流提取法提取魔芋神經(jīng)酰胺時(shí)，發(fā)現(xiàn)在相同條件下中等極性溶劑乙酸乙 酯的提取效果最理想。但是，在相同提取條件下，用95%乙醇提取后經(jīng)石油醚萃取的效果 與乙酸乙酯的提取效果相差不大，并且乙酸乙酯價(jià)格較高，提取過(guò)程中揮發(fā)較大，因此，采 用95%乙醇作為提取溶劑。作者通過(guò)正交試驗(yàn)確定提取的最佳工藝為95%乙醇、提取溫度 80°C、提取時(shí)間8h、料液比1:10,最高提取量達(dá)到4. 34mg/g。
[0005] 催韶暉等，采用95%乙醇，料液比1:7.5,水浴溫度80°C?90°C，提取時(shí)間8h? l〇h，用去離子水調(diào)提取液乙醇溶度至70%，石油醚萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮。濃縮液以石油 醚：丙酮（7:3) 200ml進(jìn)行硅膠柱層析2次分離純化，流速為ld/s，洗脫液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃 縮，濃縮液進(jìn)行真空冷凍干燥得到白色粗品，粗品用丙酮重結(jié)晶進(jìn)行純化，得到白色純化的 神經(jīng)酰胺樣品。
[0006] 魏靜等對(duì)不同提取方法進(jìn)行分析測(cè)定，結(jié)果表明在相似的條件下溶劑浸提法測(cè)定 的含量為1. 93%，而超聲波法測(cè)得的含量為2. 24%，后者提取效果明顯優(yōu)于前者。作者采 用單因素實(shí)驗(yàn)法對(duì)影響神經(jīng)酰胺提取率的主要因素進(jìn)行了分析，利用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了提 取神經(jīng)酰胺的最佳工藝條件。研究表明，超聲提取魔芋神經(jīng)酰胺的最佳條件為：乙醇濃度 95%，料液質(zhì)量比為1:4,提取溫度60°C，提取時(shí)間35min。在該條件下神經(jīng)酰胺粗提物的提 取率為2. 89%。
[0007] 超臨界萃取技術(shù)在魔芋提取神經(jīng)酰胺中的應(yīng)用雖尚未見(jiàn)報(bào)道，但李佳在研究微生 物發(fā)酵米糠制備神經(jīng)酰胺中應(yīng)用了該技術(shù)，預(yù)示著超臨界萃取技術(shù)將在魔芋提取神經(jīng)酰胺 得到應(yīng)用。李佳利用鞘磷脂酶使米糠中游離的神經(jīng)酰胺的含量提高3倍以上，并以萃取壓 力為30MPa，萃取溫度32°C?35°C，分離釜壓力為7MPa?8MPa，溫度35°C?38°C的條件進(jìn) 行超臨界萃取獲得最佳萃取效果。
[0008] 魔芋神經(jīng)酰胺為植物源神經(jīng)酰胺，安全性高于動(dòng)物源神經(jīng)酰胺和合成神經(jīng)酰胺， 含量也高于其他植物來(lái)源。從已有文獻(xiàn)來(lái)看，對(duì)魔芋神經(jīng)酰胺的研究主要集中在其藥理活 性方面，而其提取分離及質(zhì)量分析方面較少，且提取分離方法傳統(tǒng)繁瑣、分析方法不夠系統(tǒng) 全面，也未見(jiàn)其神經(jīng)酰胺的超臨界co 2萃取工藝研究。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 本發(fā)明提供了一種從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法。
[0010] 本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0011] 本發(fā)明的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法的具體步驟如下：
[0012] (1)將魔芋粉碎成細(xì)粉，然后加入乙醇，料液比為1. 5:500-1200Kg/ml，然后制粒；
[0013] (2)將步驟（1)制備的魔芋顆粒加入超臨界C02萃取設(shè)備的萃取釜中，對(duì)萃取釜、 分離釜I、分離釜II進(jìn)行加熱，并對(duì)冷機(jī)及儲(chǔ)罐制冷，當(dāng)萃取釜溫度為30-70°C，分離釜I溫 度為40-65°C，分離釜II溫度為30-60°C時(shí)，開(kāi)啟二氧化碳?xì)馄浚ㄟ^(guò)高壓泵對(duì)萃取釜、分離 釜進(jìn)行加壓，當(dāng)萃取釜壓力為20-40MPa，分離釜I壓力為6-18MPa，分離釜II壓力為4-7MPa 時(shí)，關(guān)閉二氧化碳，開(kāi)啟循環(huán)閥，進(jìn)行萃取循環(huán)，每循環(huán)30min，分別從分離釜I、II放料，循 環(huán)萃取l-2h。
[0014] 步驟（1)中，乙醇的濃度為95%，料液比優(yōu)選為1. 5:1000Kg/ml。
[0015] 步驟（2)中，優(yōu)選萃取釜溫度為60°C，壓力為35MPa。
[0016] 步驟（2)中，優(yōu)選分離釜I溫度為50°C，壓力為15MPa。
[0017] 步驟（2)中，優(yōu)選分離釜II溫度為45°C，壓力為6MPa。
[0018] 步驟（2)中，優(yōu)選萃取時(shí)間為1. 5h。
[0019] 本發(fā)明的技術(shù)效果：
[0020] 本發(fā)明的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法與溶劑回流提取法相比較，超臨界 C02萃取較回流提取的C6_神經(jīng)酰胺的收率高約20 %，且超臨界C02萃取產(chǎn)物品質(zhì)較好，在 外觀、C6-神經(jīng)酰胺含量等方面都優(yōu)于溶劑回流提取法，同時(shí)萃取工藝簡(jiǎn)單、效率高，解決了 傳統(tǒng)回流提取法溶劑用量大、易燃易爆等問(wèn)題。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0021] 圖1是本發(fā)明的超臨界co2萃取設(shè)備流程示意圖。
[0022] 圖中：1_萃取釜、2-分離釜I、3_分離釜II、4_分離柱、5-換熱器、6-高壓泵、7_C0 2 氣瓶、8-冷機(jī)儲(chǔ)罐、9-流量計(jì)。

【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0024] 實(shí)施例1
[0025] (1)將魔芋粉碎成細(xì)粉，然后加入乙醇，料液比為1. 5:500Kg/ml，然后制粒；
[0026] (2)將步驟（1)制備的魔芋顆粒加入超臨界C02萃取設(shè)備的萃取釜中，對(duì)萃取釜、 分離釜I、分離釜II進(jìn)行加熱，并對(duì)冷機(jī)及儲(chǔ)罐制冷，當(dāng)萃取釜溫度為30°C，分離釜I溫度 為40°C，分離釜II溫度為30°C時(shí)，開(kāi)啟二氧化碳?xì)馄浚ㄟ^(guò)高壓泵對(duì)萃取釜、分離釜進(jìn)行加 壓，當(dāng)萃取釜壓力為20MPa，分離釜I壓力為6MPa，分離釜II壓力為4MPa時(shí)，關(guān)閉二氧化碳， 開(kāi)啟循環(huán)閥，進(jìn)行萃取循環(huán)，每循環(huán)30min，分別從分離釜I、II放料，循環(huán)萃取2h。
[0027] 步驟（1)中，乙醇的濃度為95%。
[0028] 實(shí)施例2
[0029] (1)將魔芋粉碎成細(xì)粉，然后加入乙醇，料液比為1. 5:1200Kg/ml，然后制粒；
[0030] (2)將步驟⑴制備的魔芋顆粒加入超臨界C02萃取設(shè)備的萃取釜中，對(duì)萃取釜、 分離釜I、分離釜II進(jìn)行加熱，并對(duì)冷機(jī)及儲(chǔ)罐制冷，當(dāng)萃取釜溫度為70°C，分離釜I溫度 為65°C，分離釜II溫度為60°C時(shí)，開(kāi)啟二氧化碳?xì)馄浚ㄟ^(guò)高壓泵對(duì)萃取釜、分離釜進(jìn)行加 壓，當(dāng)萃取釜壓力為40MPa，分離釜I壓力為18MPa，分離釜II壓力為7MPa時(shí)，關(guān)閉二氧化 碳，開(kāi)啟循環(huán)閥，進(jìn)行萃取循環(huán)，每循環(huán)30min，分別從分離釜I、II放料，循環(huán)萃取lh。
[0031] 步驟（1)中，乙醇的濃度為95%。
[0032] 實(shí)施例3
[0033] (1)將魔芋粉碎成細(xì)粉，然后加入乙醇，料液比為1. 5:1000Kg/ml，然后制粒；
[0034] (2)將步驟⑴制備的魔芋顆粒加入超臨界C02萃取設(shè)備的萃取釜中，對(duì)萃取釜、 分離釜I、分離釜II進(jìn)行加熱，并對(duì)冷機(jī)及儲(chǔ)罐制冷，當(dāng)萃取釜溫度為60°C，分離釜I溫度 為50°C，分離釜II溫度為45°C時(shí)，開(kāi)啟二氧化碳?xì)馄?，通過(guò)高壓泵對(duì)萃取釜、分離釜進(jìn)行加 壓，當(dāng)萃取釜壓力為35MPa，分離釜I壓力為15MPa，分離釜II壓力為6MPa時(shí)，關(guān)閉二氧化 碳，開(kāi)啟循環(huán)閥，進(jìn)行萃取循環(huán)，每循環(huán)30min，分別從分離釜I、II放料，循環(huán)萃取1. 5h。
[0035] 步驟（1)中，乙醇的濃度為95%。
[0036] 對(duì)比例（傳統(tǒng)溶劑提?。?br> [0037] 稱取魔芋粉，放入圓底燒瓶，加入95%乙醇，80°C水浴回流提取2次，每次2h (第一 次加入960ml95 %乙醇，第二次加入720ml95 %乙醇），過(guò)濾，合并提取液，50°C旋蒸濃縮至 無(wú)水，得棕褐色油狀提取物，稱重并計(jì)算收率。
[0038] 收率的計(jì)算
[0039] 收率是評(píng)價(jià)萃取效果的重要指標(biāo)，收率的計(jì)算公式如下：
[0040] 粗提物收率=藥材粗提物質(zhì)量+藥材投料量X 100%
[0041] C6-Cer收率=藥材粗提物質(zhì)量X粗提物中C6-Cer百分含量％ +藥材投料 量 X100%。
[0042] 實(shí)施例1-3的收率如表1所示：
[0043] 表 1
[0044]

【權(quán)利要求】
1. 一種從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，其特征在于：所述方法的具體步驟如下： (1)將魔芋粉碎成細(xì)粉，然后加入乙醇，料液比為1. 5:500-1200Kg/ml，然后制粒； ⑵將步驟⑴制備的魔芋顆粒加入超臨界C02萃取設(shè)備的萃取釜中，對(duì)萃取荃、分離 釜I、分離釜II進(jìn)行加熱，并對(duì)冷機(jī)及儲(chǔ)罐制冷，當(dāng)萃取釜溫度為30-70°C，分離釜I溫度為 40-65°C，分離釜II溫度為30-60°C時(shí)，開(kāi)啟二氧化碳?xì)馄?，通過(guò)高壓泵對(duì)萃取釜、分離釜進(jìn) 行加壓，當(dāng)萃取釜壓力為20-40MPa，分離釜I壓力為6-18MPa，分離釜II壓力為4-7MPa時(shí)， 關(guān)閉二氧化碳，開(kāi)啟循環(huán)閥，進(jìn)行萃取循環(huán)，每循環(huán)30min，分別從分離釜I、II放料，循環(huán)萃 取 l-2h。
2. 如權(quán)利要求1所述的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，其特征在于：步驟（1)中， 乙醇的濃度為95%，料液比為1. 5:1000Kg/ml。
3. 如權(quán)利要求1所述的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，其特征在于：步驟（2)中， 萃取釜溫度為60°C，壓力為35MPa。
4. 如權(quán)利要求1所述的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，其特征在于：步驟（2)中， 分離釜I溫度為50°C，壓力為15MPa。
5. 如權(quán)利要求1所述的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，其特征在于：步驟（2)中， 分離釜II溫度為45°C，壓力為6MPa。
6. 如權(quán)利要求1所述的從魔芋中提取魔芋神經(jīng)酰胺的方法，其特征在于：步驟（2)中， 萃取時(shí)間為1. 5h。
【文檔編號(hào)】C07C231/24GK104083556SQ201410336065
【公開(kāi)日】2014年10月8日 申請(qǐng)日期:2014年7月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月15日
【發(fā)明者】葛發(fā)歡, 李海池, 史慶龍, 馬晉芳, 張湘東 申請(qǐng)人:廣州中大南沙科技創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)園有限公司, 中山大學(xué)