應用于紫杉醇制劑的植物提取物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種應用于紫杉醇制劑的植物提取物及其制備方法，該應用于紫杉醇制劑的植物提取物以干燥粉碎后的紅豆杉枝葉為原料，用丙酮和乙酸乙酯的混合溶劑進行浸提，減壓濃縮后得到提取物浸膏，經(jīng)三氯甲烷-水萃取濃縮后得到提取物粗品，經(jīng)堿性氧化鋁固定相柱層析，再經(jīng)C18-硅膠柱反相層析，最后經(jīng)乙醇重結晶制得。本發(fā)明的應用于紫杉醇制劑的植物提取物具有紫杉醇含量高、純度高、雜質(zhì)少等的特點。本發(fā)明的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法具有紫杉醇回收率高、提取純化操作簡便、生產(chǎn)成本低、節(jié)能環(huán)保等特點。
【專利說明】應用于紫杉醇制劑的植物提取物及其制備方法

【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種應用于紫杉醇制劑的植物提取物及其制備方法，屬于醫(yī)藥技術領 域。

【背景技術】
[0002] 紫杉醇，英文名稱為Paclitaxel，化學名稱為5 β，20_環(huán)氧_1，2 α，4,7 β , 10 β , 13 α -六羥基紫杉烷-11-烯-9-酮-4,10-二乙酸酯-2-苯甲酸酯-13 [ (2'R，3'S)-N_苯 甲酰-3-苯基異絲氨酸酯]，分子量為853. 92,分子式為C47H51NO1415
[0003] 紫杉醇為白色結晶體粉末，無臭、無味，難溶于水，易溶于氯仿、丙酮等有機溶劑。 紫杉醇具有獨特的抗腫瘤作用，紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌，對肺癌、大腸癌、黑色 素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤、腦瘤也都有一定療效。目前的紫杉醇制劑主要為紫杉醇注射液等， 紫杉醇注射液為紫杉醇加適量助溶劑和穩(wěn)定劑制成的滅菌溶液，含紫杉醇（C 47H51NO14)應為 標示量的 90. 0%-110. 0%。
[0004] 目前紫杉醇主要從紅豆杉植物中提取，在紅豆杉科植物紅豆杉的干燥根、枝葉以 及樹皮中均含有紫杉醇，但是含量較低，約為樹皮干重的〇. 01%。紅豆杉是世界上公認瀕臨 滅絕的天然珍稀抗癌植物，是經(jīng)過了第四紀冰川遺留下來的古老孑遺樹種，在地球上已有 250萬年的歷史。由于在自然條件下紅豆杉生長速度緩慢，再生能力差，所以很長時間以來， 世界范圍內(nèi)還沒有形成大規(guī)摸的紅豆杉原料林基地。1994年紅豆杉被我國定為一級珍稀瀕 危保護植物，同時被全世界42個有紅豆杉的國家稱為"國寶"。 因此，提高紅豆杉中紫杉醇的回收率顯得非常必要。目前提取分離紫杉醇的方法有： 有機溶劑萃取法、超臨界流體萃取法、膜分離法等。有機溶劑萃取法步驟多，回收率低，產(chǎn)物 損失大。超臨界流體萃取法收率高、省時間，但該方法對設備的投入大，對設備要求高，操作 條件嚴格，生產(chǎn)成本高。膜分離法所需的半透膜和反滲透裝置價格昂貴，操作技術也非常復 雜,生產(chǎn)成本也高。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種應用于紫杉醇制劑的植物提取物及其制備方法，提高 紅豆杉中紫杉醇的回收率，采用簡便可行的提取純化紫杉醇的方法，降低成本，降低污染物 排放，有利于環(huán)境保護。
[0006] 為解決上述技術問題，本發(fā)明的應用于紫杉醇制劑的植物提取物以干燥粉碎后的 紅豆杉枝葉為原料，用丙酮和乙酸乙酯的混合溶劑進行浸提，減壓濃縮后得到提取物浸膏， 經(jīng)三氯甲烷-水萃取濃縮后得到提取物粗品，經(jīng)堿性氧化鋁固定相柱層析，再經(jīng)C 18-硅膠柱 反相層析，最后經(jīng)乙醇重結晶制得。
[0007] 為解決上述技術問題，本發(fā)明的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，該 方法包括如下步驟： 步驟1，將紅豆杉枝葉洗凈，低溫干燥后用粉碎機粉碎成粉末，用丙酮和乙酸乙酯的混 合溶劑進行浸提，將浸提液進行減壓濃縮，回收溶劑，得到提取物浸膏； 步驟2,將提取物浸膏用三氯甲烷溶解，再加入純化水，攪拌后靜置分層，回收有機相， 水層用三氯甲烷萃取，合并有機相，將有機相減壓濃縮回收三氯甲烷，得到提取物粗品； 步驟3,將提取物粗品用三氯甲烷進行溶解，加入到已活化的堿性氧化鋁固定相柱中， 抽干，先用三氯甲烷淋洗并抽干，然后用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑淋洗并抽干，再用三 氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑洗脫，將收集的洗脫液減壓濃縮，得到提取物半成品； 步驟4,將提取物半成品溶于乙腈水溶液，加入到已平衡好的C18-硅膠柱中，再用乙腈 水溶液洗脫，將收集的洗脫液減壓濃縮析晶，抽慮出的結晶再用乙醇溶解進行重結晶，最后 抽慮出結晶，真空干燥后得到高純度的提取物。
[0008] 作為本發(fā)明的改進，該步驟1中低溫干燥的溫度為50?60°C，干燥后水份彡10%， 粉碎成100?120目的粉末。
[0009] 作為本發(fā)明的改進，該步驟1中丙酮和乙酸乙酯的混合溶劑的重量為紅豆杉枝葉 粉末的4?5倍，混合溶劑中丙酮和乙酸乙酯的體積比為1 :0. 8?1，浸提在超聲波輔助下 進行，浸提溫度為35?45°C，浸提時間為1?2小時/次，浸提次數(shù)為3次。
[0010] 作為本發(fā)明的改進，該步驟1中減壓濃縮溫度為50?60°C，真空度為0.07? 0.09MPa。
[0011] 作為本發(fā)明的改進，該步驟2中用于溶解提取物浸膏的三氯甲烷的重量為提取物 浸膏的1?2倍，純化水的重量為提取物浸膏的1?1. 5倍，靜置分層時間為4?6小時。
[0012] 作為本發(fā)明的改進，該步驟2中用于水層萃取的三氯甲烷的重量為提取物浸膏的 1?2倍，萃取次數(shù)為2次。
[0013] 作為本發(fā)明的改進，該步驟3中用于溶解提取物粗品的三氯甲烷的重量為提取物 粗品的10?15倍，提取物粗品溶液在堿性氧化鋁固定相柱中的停留時間為30?40分鐘。
[0014] 作為本發(fā)明的改進，該步驟3中混合淋洗劑的三氯甲烷和甲醇的體積比為98 :2? 98. 5 :1. 5,混合洗脫劑的三氯甲烷和甲醇的體積比為95 :5?96 :4。
[0015] 作為本發(fā)明的改進，該步驟4中用于溶解提取物半成品的乙腈水溶液的重量為提 取物半成品的3?5倍，乙腈水溶液中乙腈和純化水的體積比為40 :60,提取物半成品溶液 每次加入量為2?2. 5mg紫杉醇每克固定相，洗脫用的乙腈水溶液中乙腈和純化水的體積 比為50 :50。
[0016] 將干燥的紅豆杉枝葉粉碎成100?120目的粉末，有利于紫杉醇的較好提取，實現(xiàn) 最佳效益。用4?5倍丙酮和乙酸乙酯(體積比為1 :0. 8?1)的混合溶劑浸提紅豆杉枝葉 中的紫杉醇，可以得到最好的提取效果，紫杉醇在提取物浸膏中的含量最高，而且提取物浸 膏的重量最小。用超聲波輔助浸提，可以縮短浸提時間，提高提取效果。浸提次數(shù)為3次， 可以實現(xiàn)紫杉醇較完全的提取。用堿性氧化鋁固定相柱層析提取物粗品，可以除去大量的 親水性物質(zhì)、脂質(zhì)物質(zhì)和7-表-紫杉醇，同時紫杉醇可以得到十幾倍以上的提純，紫杉醇的 回收率可以大于100%，獲得紫杉醇最高的回收率和純度。提取物粗品溶液在堿性氧化鋁固 定相柱中的停留時間為30?40分鐘，可以使7-表-紫杉醇不斷轉(zhuǎn)化為紫杉醇，也可以防 止紫杉醇降解。用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑(體積比為98 :2?98. 5 :1. 5)可以取得最 好的淋洗效果。用三氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑(體積比為95 :5?96 :4)可以取得對紫杉 醇的最好洗脫效果，實現(xiàn)紫杉醇最好的回收。將提取物半成品用C18-硅膠柱常壓反相層析 精制，可以用簡單的操作步驟，就可以得到高純度的紫杉醇。在C18-硅膠柱反相層析中，采 用提取物半成品溶液每次加入量為2?2. 5mg紫杉醇每克固定相的量，可以得到最好的提 純效果。高純度的提取物可以應用于紫杉醇制劑中。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的應用于紫 杉醇制劑的植物提取物具有紫杉醇含量高、純度高、雜質(zhì)少等的特點。本發(fā)明的應用于紫杉 醇制劑的植物提取物的制備方法具有紫杉醇回收率高、提取純化操作簡便、生產(chǎn)成本低、節(jié) 能環(huán)保等特點。
[0017]

【具體實施方式】
[0018] 下面結合具體實施例對本發(fā)明的實施方案作詳細的說明。應當理解，本發(fā)明的實 施并不局限于下面的實施例，對本發(fā)明所做的任何形式上的變通和/或改變都將落入本發(fā) 明的保護范圍。
[0019] 實施例1 將紅豆杉枝葉洗凈去除其他雜物，經(jīng)50°C低溫干燥，控制水份在10%以下，用粉碎機粉 碎為100目的粉末。將10千克紅豆杉枝葉粉末均勻地填充到浸提容器內(nèi)，每次加入40千克 的丙酮和乙酸乙酯(丙酮和乙酸乙酯的體積比為1 :〇. 8)的混合溶劑在超聲波輔助下提取， 浸提溫度為35°C，浸提時間為2小時/次，浸提3次，合并浸提液。將合并的浸提液在溫度 50度，在真空度0. 〇9MPa條件下進行濃縮，回收溶劑，得到紅豆杉濃縮提取物浸膏1450克， 提取物浸膏中紫杉醇的含量為〇. 083%。
[0020] 將提取物浸膏用1倍提取物浸膏重量的三氯甲烷攪拌溶解，再加入1倍提取物浸 膏重量的純化水，攪拌15-30分鐘，靜置分層4小時，回收有機相，水層再加入提取物浸膏重 量1倍的三氯甲烷萃取兩次，合并有機相。有機相減壓濃縮回收三氯甲烷，得到提取物粗品 70. 20克，提取物粗品中紫杉醇濃度為1. 68%。
[0021] 將提取物粗品分批用10倍提取物粗品重量的三氯甲烷進行溶解，溶解完全后備 用。先往堿性氧化鋁（200-300目）固定相柱中依次加入甲醇、三氯甲烷并抽干，進行活化。 接著將溶有提取物粗品的三氯甲烷加到柱中，停留時間為30分鐘，抽干。然后用三氯甲烷 淋洗并抽干，用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑(體積比98 :2)淋洗并抽干。再在淋洗好的柱 子中加入三氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑(體積比95:5)，收集洗脫液。重復以上步驟，合并 洗脫液，將合并的洗脫液減壓濃縮，得到提取物半成品7. 76克，提取物半成品中紫杉醇濃 度為15. 2%。
[0022] 將提取物半成品分批用3倍提取物半成品重量的乙腈水溶液（乙腈和純化水的體 積比40 :60)溶解，溶解完全后備用。先將C18-硅膠柱用乙腈充分洗出固定相中的雜質(zhì)，再 用體積比40 :60的乙腈水溶液平衡。將提取物半成品溶液按2. 5mg紫杉醇每克固定相的量 加到C18-硅膠柱中，再用體積比50 :50的乙腈水溶液洗脫，收集洗脫液。重復以上步驟，合 并洗脫液，將合并的洗脫液在40°C下減壓濃縮析出結晶，抽慮出結晶后再用乙醇溶解進行 重結晶，最后抽慮出結晶并于40°C真空干燥，得到高純度的提取物1.06克，提取物中紫杉 醇濃度為99. 6%。
[0023] 實施例2 將紅豆杉枝葉洗凈去除其他雜物，經(jīng)60°C低溫干燥，控制水份在10%以下，用粉碎機粉 碎為120目的粉末。將10千克紅豆杉枝葉粉末均勻地填充到浸提容器內(nèi)，每次加入50千 克的丙酮和乙酸乙酯(丙酮和乙酸乙酯的體積比為1 :1)的混合溶劑在超聲波輔助下提取， 浸提溫度為40°C，浸提時間為1. 5小時/次，浸提3次，合并浸提液。將合并的浸提液在溫 度55度，在真空度0. OSMPa條件下進行濃縮，回收溶劑，得到紅豆杉濃縮提取物浸膏1433 克，提取物浸膏中紫杉醇的含量為〇. 084%。
[0024] 將提取物浸膏用2倍提取物浸膏重量的三氯甲烷攪拌溶解，再加入1. 5倍提取物 浸膏重量的純化水，攪拌15-30分鐘，靜置分層6小時，回收有機相，水層再加入提取物浸膏 重量2倍的三氯甲烷萃取兩次，合并有機相。有機相減壓濃縮回收三氯甲烷，得到提取物粗 品67. 45克，提取物粗品中紫杉醇濃度為1. 75%。
[0025] 將提取物粗品分批用15倍提取物粗品重量的三氯甲烷進行溶解，溶解完全后備 用。先往堿性氧化鋁（200-300目）固定相柱中依次加入甲醇、三氯甲烷并抽干，進行活化。 接著將溶有提取物粗品的三氯甲烷加到柱中，停留時間為35分鐘，抽干。然后用三氯甲烷 淋洗并抽干，用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑(體積比98. 5 :1. 5)淋洗并抽干。再在淋洗好 的柱子中加入三氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑(體積比96 :4)，收集洗脫液。重復以上步驟， 合并洗脫液，將合并的洗脫液減壓濃縮，得到提取物半成品6. 35克，提取物半成品中紫杉 醇濃度為18. 6%。
[0026] 將提取物半成品分批用5倍提取物半成品重量的乙腈水溶液（乙腈和純化水的體 積比40 :60)溶解，溶解完全后備用。先將C18-硅膠柱用乙腈充分洗出固定相中的雜質(zhì)，再 用體積比40 :60的乙腈水溶液平衡。將提取物半成品溶液按2mg紫杉醇每克固定相的量加 到C18-硅膠柱中，再用體積比50 :50的乙腈水溶液洗脫，收集洗脫液。重復以上步驟，合并 洗脫液，將合并的洗脫液在45°C下減壓濃縮析出結晶，抽慮出結晶后再用乙醇溶解進行重 結晶，最后抽慮出結晶并于40°C真空干燥，得到高純度的提取物1.06克，提取物中紫杉醇 濃度為99. 7%。
[0027] 實施例3 將紅豆杉枝葉洗凈去除其他雜物，經(jīng)55°C低溫干燥，控制水份在10%以下，用粉碎機粉 碎為110目的粉末。將10千克紅豆杉枝葉粉末均勻地填充到浸提容器內(nèi)，每次加入45千克 的丙酮和乙酸乙酯(丙酮和乙酸乙酯的體積比為1 :〇. 9)的混合溶劑在超聲波輔助下提取， 浸提溫度為45°C，浸提時間為1小時/次，浸提3次，合并浸提液。將合并的浸提液在溫度 60度，在真空度0. 〇7MPa條件下進行濃縮，回收溶劑，得到紅豆杉濃縮提取物浸膏1455克， 提取物浸膏中紫杉醇的含量為〇. 083%。
[0028] 將提取物浸膏用1. 5倍提取物浸膏重量的三氯甲烷攪拌溶解，再加入1. 3倍提取 物浸膏重量的純化水，攪拌15-30分鐘，靜置分層5小時，回收有機相，水層再加入提取物浸 膏重量1. 5倍的三氯甲烷萃取兩次，合并有機相。有機相減壓濃縮回收三氯甲烷，得到提取 物粗品69. 04克，提取物粗品中紫杉醇濃度為1. 70%。
[0029] 將提取物粗品分批用12倍提取物粗品重量的三氯甲烷進行溶解，溶解完全后備 用。先往堿性氧化鋁（200-300目）固定相柱中依次加入甲醇、三氯甲烷并抽干，進行活化。 接著將溶有提取物粗品的三氯甲烷加到柱中，停留時間為40分鐘，抽干。然后用三氯甲烷 淋洗并抽干，用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑(體積比98. 3 :1. 7)淋洗并抽干。再在淋洗好 的柱子中加入三氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑(體積比95. 5 :4. 5)，收集洗脫液。重復以上步 驟，合并洗脫液，將合并的洗脫液減壓濃縮，得到提取物半成品6. 99克，提取物半成品中紫 杉醇濃度為16. 8%。
[0030] 將提取物半成品分批用4倍提取物半成品重量的乙腈水溶液（乙腈和純化水的體 積比40 :60)溶解，溶解完全后備用。先將C18-硅膠柱用乙腈充分洗出固定相中的雜質(zhì)，再 用體積比40 :60的乙腈水溶液平衡。將提取物半成品溶液按2. 2mg紫杉醇每克固定相的量 加到C18-硅膠柱中，再用體積比50 :50的乙腈水溶液洗脫，收集洗脫液。重復以上步驟，合 并洗脫液，將合并的洗脫液在50°C下減壓濃縮析出結晶，抽慮出結晶后再用乙醇溶解進行 重結晶，最后抽慮出結晶并于40°C真空干燥，得到高純度的提取物1.06克，提取物中紫杉 醇濃度為99. 6%。
[0031] 將干燥的紅豆杉枝葉粉碎成100?120目的粉末，有利于紫杉醇的較好提取，實現(xiàn) 最佳效益。用4?5倍丙酮和乙酸乙酯(體積比為1 :0. 8?1)的混合溶劑浸提紅豆杉枝葉 中的紫杉醇，可以得到最好的提取效果，紫杉醇在提取物浸膏中的含量最高，而且提取物浸 膏的重量最小。用超聲波輔助浸提，可以縮短浸提時間，提高提取效果。浸提次數(shù)為3次， 可以實現(xiàn)紫杉醇較完全的提取。用堿性氧化鋁固定相柱層析提取物粗品，可以除去大量的 親水性物質(zhì)、脂質(zhì)物質(zhì)和7-表-紫杉醇，同時紫杉醇可以得到十幾倍以上的提純，紫杉醇的 回收率可以大于100%，獲得紫杉醇最高的回收率和純度。提取物粗品溶液在堿性氧化鋁固 定相柱中的停留時間為30?40分鐘，可以使7-表-紫杉醇不斷轉(zhuǎn)化為紫杉醇，也可以防 止紫杉醇降解。用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑(體積比為98 :2?98. 5 :1. 5)可以取得最 好的淋洗效果。用三氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑(體積比為95 :5?96 :4)可以取得對紫杉 醇的最好洗脫效果，實現(xiàn)紫杉醇最好的回收。將提取物半成品用C18-硅膠柱常壓反相層析 精制，可以用簡單的操作步驟，就可以得到高純度的紫杉醇。在C 18-硅膠柱反相層析中，采 用提取物半成品溶液每次加入量為2?2. 5mg紫杉醇每克固定相的量，可以得到最好的提 純效果。高純度的提取物可以應用于紫杉醇制劑中。
[0032] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的應用于紫杉醇制劑的植物提取物具有紫杉醇含量高、 純度高、雜質(zhì)少等的特點。本發(fā)明的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法具有紫杉 醇回收率高、提取純化操作簡便、生產(chǎn)成本低、節(jié)能環(huán)保等特點。
【權利要求】
1. 一種應用于紫杉醇制劑的植物提取物，其特征在于：所述應用于紫杉醇制劑的植物 提取物以干燥粉碎后的紅豆杉枝葉為原料，用丙酮和乙酸乙酯的混合溶劑進行浸提，減壓 濃縮后得到提取物浸膏，經(jīng)三氯甲烷-水萃取濃縮后得到提取物粗品，經(jīng)堿性氧化鋁固定 相柱層析，再經(jīng)C 18-硅膠柱反相層析，最后經(jīng)乙醇重結晶制得。
2. -種根據(jù)權利要求1所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在 于：該方法包括如下步驟： 步驟1，將紅豆杉枝葉洗凈，低溫干燥后用粉碎機粉碎成粉末，用丙酮和乙酸乙酯的混 合溶劑進行浸提，將浸提液進行減壓濃縮，回收溶劑，得到提取物浸膏； 步驟2,將提取物浸膏用三氯甲烷溶解，再加入純化水，攪拌后靜置分層，回收有機相， 水層用三氯甲烷萃取，合并有機相，將有機相減壓濃縮回收三氯甲烷，得到提取物粗品； 步驟3,將提取物粗品用三氯甲烷進行溶解，加入到已活化的堿性氧化鋁固定相柱中， 抽干，先用三氯甲烷淋洗并抽干，然后用三氯甲烷和甲醇的混合淋洗劑淋洗并抽干，再用三 氯甲烷和甲醇的混合洗脫劑洗脫，將收集的洗脫液減壓濃縮，得到提取物半成品； 步驟4,將提取物半成品溶于乙腈水溶液，加入到已平衡好的C18-硅膠柱中，再用乙腈 水溶液洗脫，將收集的洗脫液減壓濃縮析晶，抽慮出的結晶再用乙醇溶解進行重結晶，最后 抽慮出結晶，真空干燥后得到高純度的提取物。
3. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于：所 述步驟1中低溫干燥的溫度為50?60°C，干燥后水份彡10%，粉碎成100?120目的粉末。
4. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟1中丙酮和乙酸乙酯的混合溶劑的重量為紅豆杉枝葉粉末的4?5倍，混合溶 劑中丙酮和乙酸乙酯的體積比為1 :〇. 8?1，浸提在超聲波輔助下進行，浸提溫度為35? 45°C，浸提時間為1?2小時/次，浸提次數(shù)為3次。
5. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟1中減壓濃縮溫度為50?60°C，真空度為0. 07?0. 09MPa。
6. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟2中用于溶解提取物浸膏的三氯甲烷的重量為提取物浸膏的1?2倍，純化水的 重量為提取物浸膏的1?1. 5倍,靜置分層時間為4?6小時。
7. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟2中用于水層萃取的三氯甲烷的重量為提取物浸膏的1?2倍，萃取次數(shù)為2次。
8. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟3中用于溶解提取物粗品的三氯甲烷的重量為提取物粗品的10?15倍，提取物 粗品溶液在堿性氧化鋁固定相柱中的停留時間為30?40分鐘。
9. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟3中混合淋洗劑的三氯甲烷和甲醇的體積比為98 :2?98. 5 :1. 5,混合洗脫劑的 三氯甲烷和甲醇的體積比為95 :5?96 :4。
10. 根據(jù)權利要求2所述的應用于紫杉醇制劑的植物提取物的制備方法，其特征在于： 所述步驟4中用于溶解提取物半成品的乙腈水溶液的重量為提取物半成品的3?5倍，乙 腈水溶液中乙腈和純化水的體積比為40 :60,提取物半成品溶液每次加入量為2?2. 5mg 紫杉醇每克固定相，洗脫用的乙腈水溶液中乙腈和純化水的體積比為50 :50。
【文檔編號】C07D305/14GK104211667SQ201410371839
【公開日】2014年12月17日 申請日期:2014年7月31日 優(yōu)先權日:2014年7月31日
【發(fā)明者】傅苗青, 張倩 申請人:大生祥(武漢）中醫(yī)投資管理有限公司