一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體及其合成方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體，所述的鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：。所述的鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的制備方法包括以下步驟：步驟1）化合物G0在碳酸鉀做堿的條件下和溴乙酸芐酯反應(yīng)生成化合物Ga；步驟2）Ga先和三光氣反應(yīng)，然后再與二苯甲醇反應(yīng)生成Gb；步驟3）Gb和氰基乙醇鈉反應(yīng)生成Gc；步驟4）Gc和Fmoc-氨乙基甘氨酸反應(yīng)生成目標(biāo)產(chǎn)物Ge。本發(fā)明的合成方法中使用的原料價(jià)格較低，具有非常低的成本，同時(shí)合成方法中步驟較少，操作非常簡(jiǎn)單，提取純化工藝較為方便，并且得到的鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的產(chǎn)率和純度也較高，純度達(dá)到了98%，產(chǎn)率也高于50%?？朔爽F(xiàn)有合成工藝中的缺陷。
【專利說(shuō)明】一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體及其合成方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物和醫(yī)學(xué)【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及一種肽核酸單體及其合成方法，具體是涉 及一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體及其合成方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 肽核酸（Peptide nucleic acid ;PNA)是一種與DNA和RNA相似的化學(xué)物質(zhì)，可經(jīng) 由人工合成制造，用來(lái)作為生物學(xué)研究或是醫(yī)學(xué)治療。
[0003] PNA的骨架是由重復(fù)排列的N-2-(氨乙基）-甘氨酸（N- (2-aminoethy 1) -glycine ) 單位，經(jīng)由肽鍵所組合而成，且堿基與骨架之間是以亞甲羰鍵相連。與多肽鏈相似的是PNA 也有N端(氮端）與C端(碳端）的差別。
[0004] 由于PNA沒(méi)有如DNA或RNA上的磷酸基團(tuán)，因此PNA與DNA之間缺乏電性相斥的現(xiàn) 象，使兩者之間的結(jié)合強(qiáng)度大于DNA與DNA。肽核酸基團(tuán)構(gòu)象不同于普通核酸，不易被蛋白 酶或者核酸酶水解，且堿基配對(duì)特異性極強(qiáng)，熱穩(wěn)定性高。在肽核酸合成中的幾個(gè)單體中， 鳥(niǎo)嘌呤單體占著重要的作用，不可缺失。
[0005]


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 要解決的技術(shù)問(wèn)題：常規(guī)的鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的合成方法中工藝較為復(fù)雜，合成 采用的原料的成本也非常高昂，并且合成得到的鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的純度和產(chǎn)率也較低， 純度不超過(guò)95%，產(chǎn)率也只有20%至30%。
[0007] 技術(shù)方案：針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明公開(kāi)了一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體，所述的鳥(niǎo)嘌呤肽 核酸單體化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體，其特征在于所述的鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
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2. -種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的制備方法，其特征在于包括以下步驟： 步驟1)化合物GO在碳酸鉀做堿的條件下和溴乙酸芐酯反應(yīng)生成化合物Ga ; 步驟2) Ga先和三光氣反應(yīng)，然后再與二苯甲醇反應(yīng)生成Gb ; 步驟3) Gb和氰基乙醇鈉反應(yīng)生成Gc ; 步驟4) Gc和Fmoc-氨乙基甘氨酸反應(yīng)生成目標(biāo)產(chǎn)物Ge ; 鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的合成路線如下：
ο
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鳥(niǎo)嘌呤肽核酸單體的制備方法，其特征在于包括以下步 驟： 步驟 1)把 GO (50g，0.295mol)和碳酸鉀（61g，0.44mol)加入到 500ml 的 Ν，Ν-二甲基 甲酰胺中，加熱溶液溫度至84°C，直至GO全部溶解，然后冷卻溶液至-5°C，滴入溴乙酸芐 酯，滴完后該溫度下再攪拌3小時(shí)，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，過(guò)濾，濾液倒入1. 2L水中，加入濃鹽酸調(diào) pH為酸性，攪拌2小時(shí)后過(guò)濾產(chǎn)品，水洗，乙腈重結(jié)晶，拉干產(chǎn)品得到68g ; 步驟2)-5°C條件下，把Ga (50g，0. 158mol)加入到冰冷的500ml四氫呋喃中，攪 拌下加入三光氣（160. 8g，0. 0566mol)，然后攪拌1小時(shí)，然后滴入二異丙基乙胺（44. 2g， 0. 343mol)，再攪拌30min，加入二苯甲醇（47. 4g，0. 2575mol)后室溫過(guò)夜反應(yīng)，然后加入乙 醇，旋干溶液，然后用二氯甲烷溶解，用10%的檸檬酸洗，然后再用5%的碳酸氫鈉溶液洗，旋 出二氯甲烷，產(chǎn)品用甲醇重結(jié)晶后拉干得到68g產(chǎn)品； 步驟3)把NaH (11.36g，0. 4735mol)加入到585ml四氫呋喃中，溶液冷卻到-30°C，然 后滴入3-羥基丙腈（33. 6g，0. 4735mol)，然后在0°C下攪拌2. 5小時(shí)，然后加入Gb (50g， 0. 0947mol)，反應(yīng)液室溫過(guò)夜，蒸去溶液，加入水中，20%的檸檬酸pPH為3-4,過(guò)濾得到粗 品，然后甲醇重結(jié)晶，拉干得到23g產(chǎn)品； 步驟4)把Gc(2g，4. 77mmol)溶解在無(wú)水N，N-二甲基甲酰胺（20ml)中，然后加入N-甲 基嗎啉（0. 48g，4. 77mmol)，冷卻至-20°C，滴入特戊酰氯（0. 6g，14. 3mmol)，反應(yīng)40min，把 Fmoc-氨乙基甘氨酸懸浮在乙腈/水中，加入三乙胺，直至溶清為止，然后滴入到反應(yīng)液中， TLC追S示，反應(yīng)完成后20%的朽1橡酸調(diào)pH為4,過(guò)濾提純后得到廣品1. 8g。
【文檔編號(hào)】C07K5/078GK104193801SQ201410392549
【公開(kāi)日】2014年12月10日 申請(qǐng)日期:2014年8月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年8月12日
【發(fā)明者】張冬冬 申請(qǐng)人:蘇州維泰生物技術(shù)有限公司