一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，工藝步驟是：a.將卡瓦胡椒干燥品粉碎，乙醇超聲提取，加活性炭脫色，過濾；b.濾液超濾除雜，納濾濃縮；c.濃縮液用高效逆流色譜分離，根據(jù)HPLC-ELSD檢測圖收集目標成分。本發(fā)明的方法工藝簡單、污染少、產(chǎn)品純度高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提純領(lǐng)域，涉及一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 草藥療法在治療的同時更注重養(yǎng)身，目前草藥療法已在世界各國比較流行，歐亞 許多國家用草藥制成補充物投入市場，據(jù)研究統(tǒng)計，在美國，大約有500萬人服用各種草藥 制成的補充物。
[0003] 胡椒科植物卡瓦胡椒中的醉椒素具有抗焦慮、鎮(zhèn)靜催眠、局部麻醉、抗驚厥等作用 ，且未觀察到藥物依賴性等優(yōu)點而在歐洲和美國臨床應(yīng)用。早在1990年，德國聯(lián)邦衛(wèi)生局 就批準卡瓦胡椒用于治療焦慮癥，目前英國將其收入《植物藥典》，美國將其收入新版《美國 藥典》，歐美許多國家將卡瓦胡椒列為非處方藥或處方藥。
[0004] 目前國內(nèi)現(xiàn)有的提取醉椒素的工藝很少，如專利《卡瓦胡椒提取物及其制備方法》 (申請?zhí)?00810057147. 9)中公開的工藝步驟是將卡瓦胡椒分揀-清洗-干燥-粉碎-醇 提，殘渣重復一次上述步驟，提取液減壓濃縮，混合粉碎即得卡瓦胡椒提取物。該方法提取 醉椒素產(chǎn)品純度太低，不適合用于藥物合成。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法。
[0006] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的： 一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于包括以下步驟： a. 取卡瓦胡椒干燥品粉碎過40目篩，加8-10倍量乙醇超聲提取，加入活性炭脫色，過 濾； b. 濾液超濾除雜，納濾濃縮，放置析出結(jié)晶； c. 將上述濃縮液以乙酸乙酯-乙醇-水為溶劑系統(tǒng)，用高效逆流色譜分離，根據(jù)ELSD 檢測圖收集目標流分。
[0007] 所述步驟a中，乙醇濃度80%-90%，活性炭量為溶液量的1%-5%，超聲頻率為 40-65KHZ，超聲時間為20-60min，提取1-2次。
[0008] 所述步驟b中，超濾膜為10000-30000D的中空纖維式聚砜膜，進口壓力為 0· 1-0. 3MPa，納濾膜為200-300D的中空纖維式聚砜膜，進口壓力為L 0-2. 2MPa。
[0009] 所述步驟C中，乙酸乙酯-乙醇-水的比例為2-3 :4-6 :3-5,上相為流動相，下相 為固定相。
[0010] 所述步驟C中，將固定相充滿逆流色譜柱，調(diào)整主機轉(zhuǎn)速800-1000rpm，再將流動 相泵入色譜柱，平衡后調(diào)整流速l_3ml/min，同時取流動相溶解粗濃縮液，進樣閥進樣。

【具體實施方式】
[0011] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細的描述，但本發(fā)明的實施方式不限于此。
[0012] 實施例1 : 取干燥的卡瓦胡椒lkg，粉碎，過40目篩，加入8倍量80%的乙醇超聲提取30min，提取2 次，超聲頻率為40KHZ，加入溶液量1%活性炭脫色，過濾。濾液先后經(jīng)10000D中空纖維式聚 砜膜超濾除雜，進口壓力為〇· lMPa，200D中空纖維式聚砜膜納濾濃縮，進口壓力為1. OMPa， 得到濃縮液。
[0013] 將乙酸乙酯-乙醇-水按2 :4 :3體積比混合，超聲搖勻，靜置分層后分離，下相 為固體相，上相為流動相，濃縮液用上相溶解，將固定相泵滿色譜柱，然后調(diào)整主機轉(zhuǎn)速為 800rmp，再以3ml/min流速泵入流動相，待柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)建立動態(tài)平衡后，由進樣閥進樣， 然后根據(jù)檢測器譜圖接收目標流分，蒸干即得醉椒素產(chǎn)品13. 8g，含量95. 3%。
[0014] 實施例2 : 取干燥的卡瓦胡椒2kg，粉碎，過40目篩，加入10倍量90%的乙醇超聲提取40min，提 取1次，超聲頻率為60KHZ，加入溶液量3%活性炭脫色，過濾。濾液先后經(jīng)經(jīng)20000D中空纖 維式聚砜膜超濾除雜，進口壓力為0.3MPa，300D中空纖維式聚砜膜納濾濃縮，進口壓力為 2. 2MPa，得到濃縮液。
[0015] 將乙酸乙酯-乙醇-水按3 :6 :5體積比混合，超聲搖勻，靜置分層后分離，下相 為固體相，上相為流動相，濃縮液用上相溶解，將固定相泵滿色譜柱，然后調(diào)整主機轉(zhuǎn)速為 lOOOrmp，再以2ml/min流速泵入流動相，待柱內(nèi)溶劑系統(tǒng)建立動態(tài)平衡后，由進樣閥進樣， 然后根據(jù)檢測器譜圖接收目標流分，蒸干即得醉椒素產(chǎn)品31. 2g，含量97. 4%。
【權(quán)利要求】
1. 一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于以下步驟： a. 取卡瓦胡椒干燥品粉碎過40目篩，加8-10倍量乙醇超聲提取，加入活性炭脫色，過 濾； b. 濾液超濾除雜，納濾濃縮； c. 將上述濃縮液以乙酸乙酯-乙醇-水為溶劑系統(tǒng)，用高效逆流色譜分離，根據(jù) HPLC-ELSD檢測圖收集目標流分。 2. 2.如權(quán)利要求1所述一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于，所述 步驟a中，乙醇濃度80%-90%，活性炭量為溶液量的1%-5%，超聲頻率為40-65KHZ，超聲時間 為 20-60min，提取 1-2 次。
3. 如權(quán)利要求1所述一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于，所述步 驟b中，超濾膜為10000-30000D的中空纖維式聚砜膜，進口壓力為0. 1-0. 3MPa，納濾膜為 200-300D的中空纖維式聚砜膜，進口壓力為1. 0-2. 2MPa。
4. 如權(quán)利要求1所述一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于，所述步 驟c中，乙酸乙酯-乙醇-水的比例為2-3 :4-6 :3-5,上相為流動相，下相為固定相。
5. 如權(quán)利要求1所述一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于，所述步 驟c中，將固定相充滿逆流色譜柱，調(diào)整主機轉(zhuǎn)速800-1000rpm，再將流動相泵入色譜柱，平 衡后調(diào)整流速l_3ml/min，同時取流動相溶解濃縮液，進樣閥進樣。
【文檔編號】C07D309/32GK104193709SQ201410446383
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2014年9月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月4日
【發(fā)明者】張金芳, 楊存 申請人:南京標科生物科技有限公司