從羅漢果中提取羅漢果甜甙v的方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙Ⅴ的方法，包括以下步驟：1)將羅漢果加入其重量3～6倍的乙醇回流提取3次，每次提取1～2h，合并提取液，過濾，收集濾液備用；2)將濾液濃縮至原體積的1/2～1/3，上大孔吸附樹脂柱層析，用酸液洗脫，合并流出液及酸洗液；3)調(diào)節(jié)流出液和酸洗液pH值至中性，上大孔吸附樹脂與硅膠作填充物的層析柱，分別用體積濃度為20％、40％和50％的乙醇洗脫，收集50％的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即為高純度羅漢果甜甙Ⅴ。本發(fā)明工藝簡單，對設(shè)備要求低，產(chǎn)品收率高，純度大，品質(zhì)好。
【專利說明】從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物活性成分提取【技術(shù)領(lǐng)域】，主要涉及一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]羅漢果屬葫蘆科多年生草質(zhì)藤本植物的果實，是我國南方特有植物，主要產(chǎn)于桂北地區(qū)，以廣西桂林的羅漢果品質(zhì)最好。羅漢果味甜、性涼、無毒，具有清肺止咳、潤腸通便、清熱解毒、祛痰補血，益肝、健脾、促進腸胃功能等功效。羅漢果中含有賽門甙I (sianenoside I )、羅漢果甜式 II E (eogroside II E)、羅漢果甜式III (mogroside III)、羅漢果甜式III E (mogroside III E)、羅漢果甜式IV (ogroside IV )、羅漢果甜式V (mogroside V )、羅漢果甜甙A、羅漢果新甙等葫蘆烷素三萜甙類物質(zhì)，除羅漢果甜甙IV和羅漢果新甙外，均為甜味物質(zhì)，其中羅漢果甜甙V的甜度最高，相當于蔗糖的300倍，且甜味純正、無異味、回味感強、熱穩(wěn)定性好，可作為食品、菜肴的甜味劑，是糖尿病人的理想糖代品。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種產(chǎn)品收率高、純度大的從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法。
[0004]本發(fā)明提供的技術(shù)方案是一種從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法，包括以下步驟:
[0005]I)將羅漢果加入其重量3?6倍的乙醇回流提取3次，每次提取I?2h，合并提取液,過濾,收集濾液備用；
[0006]2)將濾液濃縮至原體積的1/2?1/3，上大孔吸附樹脂柱層析，用酸液洗脫，合并流出液及酸洗液；
[0007]3)調(diào)節(jié)流出液和酸洗液pH值至中性，上大孔吸附樹脂與硅膠作填充物的層析柱，分別用體積濃度為20^^40%和50%的乙醇洗脫，收集50%的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即為高純度羅漢果甜甙V。
[0008]羅漢果中含有大量的蛋白質(zhì)、葡萄糖和果糖，采用乙醇為溶媒，乙醇不利于蛋白質(zhì)和果糖的溶解，可以減少雜質(zhì)的溶出，對后續(xù)純化有益。乙醇體積濃度為45?50%為佳，乙醇濃度過高會對蛋白質(zhì)產(chǎn)生凝聚作用，使得蛋白質(zhì)滯留在顆粒的內(nèi)部孔道中，反而增加羅漢果甜甙的擴散阻力，降低終產(chǎn)品的收率。乙醇濃度過低則雜質(zhì)含量較大，影響終產(chǎn)品的純度。
[0009]第一次上大孔吸附樹脂柱，由于溶液中的大量的脂溶性成分(葉綠素和油脂)及部分大分子低極性物質(zhì)更容易被樹脂吸收至飽和，采用酸液洗脫，可以將羅漢果甜甙以及少量雜質(zhì)(鹽類、糖類、多酚類物質(zhì))洗脫下來，采用PH值為2.5?3.5的酸液可以最大限度將羅漢果甜甙洗脫下來，提高收率。
[0010]第二次上層析柱，采用的是大孔吸附樹脂和硅膠的混合填充物，這兩種填充物按體積比1:1，并分層放置于層析柱中，大孔吸附樹脂在上，硅膠在下，并采用分級解吸的方式，可以將小分子物質(zhì)(鹽類、糖類、多酚類物質(zhì))以及羅漢果其他甜味成分除去，得到純度較高的羅漢果甜甙V。
[0011]上述大孔吸附樹脂的型號為D101、AB-8、DM130或LX-22。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明工藝簡單，對設(shè)備要求低，產(chǎn)品收率高，純度大，品質(zhì)好。

【具體實施方式】
[0013]以下具體實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但不作為對本發(fā)明的限定。
[0014]實施例1
[0015]I)將100g羅漢果粉碎后加入其重量3倍的45v%乙醇回流提取3次，每次提取lh，合并提取液，過濾，收集濾液備用；
[0016]2)將濾液濃縮至原體積的1/2，上DlOl大孔吸附樹脂柱層析，用pH值為2.5的鹽酸溶液洗脫，合并流出液及酸洗液；
[0017]3)將體積比為1:1的DlOl大孔吸附樹脂與硅膠作填充物分層置于層析柱中，大孔吸附樹脂在上，硅膠在下，調(diào)節(jié)流出液和酸洗液PH值至中性后上柱層析，分別用體積濃度為20 %、40 %和50 %的乙醇洗脫，收集50 %的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到2.55g高純度羅漢果甜甙V，為白色粉末，甜味純正，無澀味，經(jīng)HPLC檢測，成品中羅漢果甜甙V的含量為
95.2%。
[0018]實施例2
[0019]I)將100g羅漢果粉碎，加入其重量6倍的50v%乙醇回流提取3次，每次提取2h，合并提取液，過濾，收集濾液備用；
[0020]2)將濾液濃縮至原體積的1/3，上AB-8大孔吸附樹脂柱層析，用pH值為3.5的鹽酸溶液洗脫，合并流出液及酸洗液；
[0021]3)將體積比為1:1的AB-8大孔吸附樹脂與硅膠作填充物分層置于層析柱中，大孔吸附樹脂在上，硅膠在下，調(diào)節(jié)流出液和酸洗液PH值至中性后上柱層析，分別用體積濃度為20 %、40 %和50 %的乙醇洗脫，收集50 %的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到2.8Ig高純度羅漢果甜甙V，為白色粉末，甜味純正，無澀味，經(jīng)HPLC檢測，成品中羅漢果甜甙V的含量為
96.1%。
[0022]實施例3
[0023]I)將100g羅漢果粉碎，加入其重量4.5倍的48v%乙醇回流提取3次，每次提取
1.5h，合并提取液，過濾，收集濾液備用；
[0024]2)將濾液濃縮至原體積的1/3，上DM130大孔吸附樹脂柱層析，用pH值為3的鹽酸溶液洗脫，合并流出液及酸洗液；
[0025]3)將體積比為1:1的DM130大孔吸附樹脂與硅膠作填充物分層置于層析柱中，大孔吸附樹脂在上，硅膠在下，調(diào)節(jié)流出液和酸洗液PH值至中性后上柱層析，分別用體積濃度為20 %、40 %和50 %的乙醇洗脫，收集50 %的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到2.62g高純度羅漢果甜甙V，為白色粉末，甜味純正，無澀味，經(jīng)HPLC檢測，成品中羅漢果甜甙V的含量為 95.5%。
[0026]實施例4
[0027]I)將100g羅漢果粉碎，加入其重量3倍的50v%乙醇回流提取3次，每次提取lh，合并提取液，過濾，收集濾液備用；
[0028]2)將濾液濃縮至原體積的1/3，上LX-22大孔吸附樹脂柱層析，用pH值為2.5的鹽酸溶液洗脫，合并流出液及酸洗液；
[0029]3)將體積比為1:1的LX-22大孔吸附樹脂與硅膠作填充物分層置于層析柱中，大孔吸附樹脂在上，硅膠在下，調(diào)節(jié)流出液和酸洗液PH值至中性后上柱層析，分別用體積濃度為20 %、40 %和50 %的乙醇洗脫，收集50 %的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，得到2.58g高純度羅漢果甜甙V，為白色粉末，甜味純正，無澀味，經(jīng)HPLC檢測，成品中羅漢果甜甙V的含量為 95.8%。
【權(quán)利要求】
1.從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)將羅漢果加入其重量3?6倍的乙醇回流提取3次，每次提取1?2h，合并提取液，過濾，收集濾液備用； 2)將濾液濃縮至原體積的1/2?1/3，上大孔吸附樹脂柱層析，用酸液洗脫，合并流出液及酸洗液； 3)調(diào)節(jié)流出液和酸洗液pH值至中性，上大孔吸附樹脂與硅膠作填充物的層析柱，分別用體積濃度為20 %、40 %和50 %的乙醇洗脫，收集50 %的乙醇洗脫液，濃縮，干燥，即為高純度羅漢果甜甙V。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法，其特征在于:步驟1)中，乙醇體積濃度為45?50%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法，其特征在于:步驟2)和步驟3)中，大孔吸附樹脂的型號為D101、AB-8、DM130或LX-22。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法，其特征在于:步驟2)中，酸液的pH值為2.5?3.5。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從羅漢果中提取羅漢果甜甙V的方法，其特征在于:步驟3)中，大孔吸附樹脂與硅膠的體積比為1:1。
【文檔編號】C07J17/00GK104262446SQ201410522475
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月30日
【發(fā)明者】盧照凱, 謝冬養(yǎng), 周曉青, 鐘德品, 梁小珍 申請人:桂林三寶藥業(yè)有限公司