一種舒張血管活性化合物鉤藤堿的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種舒張血管活性化合物鉤藤堿的提取方法，所述方法包括如下步驟：(1)將原料粉碎、過篩，得原料粉末，將其加入到有機溶劑中，再通入二氧化碳，形成膨脹溶劑體系進(jìn)行攪拌提取，得提取液；(2)濃縮提取液，得初提濃縮物；(3)向初提濃縮物中加入無機物溶液和有機溶劑，進(jìn)行液液萃取，分層得有機相I，向有機相I中加入水，充分?jǐn)嚢杈鶆颍謱拥糜袡C相II，將其濃縮得浸膏；(4)將浸膏溶解并裝入層析柱頂部，溶劑洗脫，收集洗脫液，濃縮得粗產(chǎn)物，重結(jié)晶得鉤藤堿。如此得到的鉤藤堿具有良好的得率和純度，在工業(yè)化生產(chǎn)上具有良好的應(yīng)用前景和潛力。
【專利說明】一種舒張血管活性化合物鉤藤堿的提取方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及具有藥理活性的植物活性化合物的提取方法，更具體地涉及一種舒張 血管活性化合物鉤藤堿的提取方法，屬于植物活性成分提取領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】
[0002] 鉤藤（RamulusUucariaecumuncis)原名鉤藤,是我國傳統(tǒng)的重要中藥，屬于茜 草科鉤藤屬，廣泛分布在我國的南方各省，如貴州、福建、江西、湖南、云南、廣東、廣西、四川 等地。其種類繁多，例如有鉤藤、大葉鉤藤、毛鉤藤、華鉤藤、無柄果鉤藤等。
[0003] 鉤藤的入藥部位主要為鉤藤屬植物的干燥帶鉤莖枝，經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，其主要成分 為鉤藤生物堿以及常春藤苷元、鉤藤苷元A、鉤藤苷元B、鉤藤苷元C、烏蘇酸、β-谷留醇等， 進(jìn)一步的主要為吲哚類生物堿，例如鉤藤堿、異鉤藤堿、柯諾辛堿、柯諾辛堿B、去氫鉤藤堿、 去氫異構(gòu)鉤藤堿等。其中，鉤藤堿和異鉤藤堿是鉤藤生物堿中最重要的兩種成分，其含量可 分別達(dá)到鉤藤生物堿的30%和15%左右。
[0004] 鉤藤堿具有優(yōu)異的藥理活性，其結(jié)構(gòu)式如下：
[0005]

【權(quán)利要求】
1. 一種舒張血管活性化合物鉤藤堿的提取方法，所述方法包括如下步驟： (1) 將原料粉碎、過篩，得原料粉末，將其加入到有機溶劑中，再通入二氧化碳，形成膨 脹溶劑體系進(jìn)行攪拌提取，得提取液； (2) 濃縮提取液，得初提濃縮物； (3) 向初提濃縮物中加入無機物溶液和有機溶劑，進(jìn)行液液萃取，分層得有機相I，向 有機相I中加入水，充分?jǐn)嚢杈鶆?，分層得有機相II，將其濃縮得浸膏； (4) 將浸膏溶解并裝入層析柱頂部，溶劑洗脫，收集洗脫液，濃縮得粗產(chǎn)物，重結(jié)晶得鉤 藤堿。
2. 如權(quán)利要求1所述的提取方法，其特征在于：在步驟（1)中，所述有機溶劑為異丙醇 和乙酸乙酯的混合物，其中異丙醇與乙酸乙酯的體積比為1:2-4。
3. 權(quán)利要求1或2所述的提取方法，其特征在于：在步驟（3)中，所述無機物溶液為 ΚΗ2Ρ04水溶液，其質(zhì)量百分濃度為8-12 %。
4. 如權(quán)利要求1-3任一項所述的提取方法，其特征在于：在步驟（3)中，所述有機溶劑 為丙酮與石油醚的混合物，其中丙酮與石油醚的體積比為1:1. 5-4。
5. 如權(quán)利要求1-4任一項所述的提取方法，其特征在于：在步驟（4)中，所述層析柱以 其體積計，自上而下依次填充20%堿性氧化鋁、15%中性硅膠、10%堿性硅膠、5%中性氧化 鋁和30%大孔弱酸性陽離子交換樹脂。
6. 如權(quán)利要求5所述的提取方法，其特征在于：所述堿性硅膠的制備方法如下： ⑴將粒度為100-200目的中性硅膠于馬弗爐中和550°C下高溫烘烤15小時，然后降 低溫度到200°C并在該溫度下保溫下1. 5小時，然后取出并自然降溫到室溫，得到活化硅 膠； (II)向活化硅膠中加入摩爾濃度為lmol/L的NaOH水溶液，并在搖床上充分振蕩，直至 沒有結(jié)塊為止，得到所述堿性硅膠；其中，所述活化硅膠與NaOH水溶液的質(zhì)量比為1:0. 5。
7. 如權(quán)利要求5所述的提取方法，其特征在于：所述大孔弱酸性陽離子交換樹脂優(yōu)選 為丙烯酸系列陽離子交換樹脂，更優(yōu)選為CD180樹脂、D110樹脂、D113樹脂、D151樹脂或 D152樹脂，最優(yōu)選為⑶180樹脂。
8. 如權(quán)利要求1-7任一項所述的提取方法，其特征在于：在步驟（4)中，首先使用正 己烷進(jìn)行洗脫，其體積用量為1-2倍柱體積；然后使用乙酸乙酯進(jìn)行洗脫，其體積用量為 1. 5-2. 5倍柱體積；最后使用正丁醇與乙醚的不同體積比的混合溶劑進(jìn)行梯度洗脫，正丁 醇與乙醚的體積比為分別為15:1、12:1、10:1、7:1、5:1、3:1和2:1，每個不同體積比的混合 溶劑用量均為1-1.4倍柱體積，收集并合并兩者體積比為10:1、7:1和5:1的洗脫液，然后 在40-50°C水浴中，用氮氣吹掃洗脫液，直至近干，得到粗產(chǎn)物。
9. 如權(quán)利要求1-8任一項所述的提取方法，其特征在于：步驟⑷中，將粗產(chǎn)物在乙酸 乙酯與正己烷的混合溶劑中進(jìn)行重結(jié)晶，粗產(chǎn)物與混合溶劑的質(zhì)量體積比為l:15-25g/ml， 其中，在混合溶劑中，乙酸乙酯與正己烷的體積比為1:4-6。
10. 如權(quán)利要求1-9任一項所述的提取方法，其特征在于：步驟（4)中，重結(jié)晶步驟如 下：將體積比為1:4-6的乙酸乙酯與正己烷的混合溶劑加熱到50-60°C，然后加入粗產(chǎn)物， 粗產(chǎn)物與混合溶劑的質(zhì)量體積比為l:15-25g/ml，攪拌使其充分溶解；然后以3°C /分鐘的 降溫速率進(jìn)行梯度降溫，直至降至10±2°C，并在該溫度下保持3-4小時；最后過濾，得到晶 體，去離子水洗滌，在45-55°C的真空烘箱中干燥，得到最終產(chǎn)物鉤藤堿。
【文檔編號】C07D471/20GK104262341SQ201410531144
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年10月10日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月10日
【發(fā)明者】韓瑋娜 申請人:濰坊醫(yī)學(xué)院